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[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
何钢 周再魁 袁靖 刘贤桂
通过预培养时间、菌液稀释倍数、浸染时间、共培养时间、抗生素质量浓度5因素4水平的正交实验,得出优化组合,认为组培苗叶片外植体预培养5 d,菌液稀释45倍,浸染4 min,共培养3 d,然后转入含500 mg/L羧苄青霉素的1/2M S培养基上培养,金银花的发根诱导率最高,达54.3%.随机抽取离体培养的发根经PCR检测,证实为转化发状根.
关键词：
金银花 发根 发根农杆菌 诱导率
[期刊] 林业科学研究
[作者]
杨至德 王雁 刘雪梅 缪崑 汤巧香
The paper explored the possibility of hairy root occurrence of peony induced by Agrobactrium rhizogenes.It showed that R1000 had the highest hairy root inducement with a hairy root rate of 35%,whereas strains A4,MSU-2 and MT232 had little difference in hairy root occurrence.Infect conditions had gre...
关键词：
发根农杆菌 牡丹 侵染 组织培养 毛状根
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
宗晓秋 张东升 黄文坤 彭焕 彭德良
选取中国大豆品种中黄13、黑豆44和黑豆51的子叶为外植体材料,用发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)K599菌株诱导3个大豆品种产生毛状根,通过β-葡聚糖苷酶(GUS)染色进行转化效率检测。结果表明:在25℃、12h/d黑暗培养条件下,黑豆44上诱导的毛状根数量最多,显著多于中黄13和黑豆51;黑豆44诱导的毛状根转化率最高,显著高于中黄13,但与黑豆51没有显著差异;光照或黑暗培养对中黄13产生毛状根的效率没有显著影响,但黑豆44和黑豆51在黑暗培养条件下子叶产生的毛状根数明显高于光照培养条件下产生的毛状根数;大豆孢囊线虫(Heterodera glycines ...
关键词：
大豆 毛状根 大豆孢囊线虫 发根农杆菌
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙力军 陆兆新 陈磊 孙德坤
首先采用P lackett-Burm an设计法,对影响金银花内生菌EJH 1抗菌作用发酵的9个相关因素进行了筛选。结果表明,对发酵液抗菌活性具有显著影响的因子是谷氨酸钠和KH2PO4。然后,采用响应曲面法(Response Surface M ethod-ology,RSM)(中心组合设计)对影响抗菌物质发酵的谷氨酸钠和KH2PO4最佳水平及其交互作用进行了研究与探讨。通过模型方程3 D图及其等高线图研究发现,谷氨酸钠和KH2PO4分别在5.12 g.L-1和2.13 g.L-1的条件下,可获得抑菌圈直径的最大预期值20.27 mm。验证试验证实了该方程的预测值与实际值之间吻合较好。优化后的...
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘鸣韬 孙化田 张定法
对金银花上一种新病害进行了病原鉴定,系统描述了其症状表现。并对病原物的生物学特性进行了研究。该病菌生长的最适温度为25℃左右;孢子产生的最适温度为30℃;分生孢子萌发的适温范围为25～30℃。病菌在pH值2～12范围内均能生长,其中以pH6～9生长较好;孢子萌发的pH值为5～10,以pH9为最适。光照对菌丝生长的影响不显著,但对产孢影响较大。而紫外线对孢子有明显杀伤作用。
关键词：
金银花 根腐病 病原 生物学特性
[期刊] 林业科学
[作者]
王敬文 陆秀华 蒋晶
近年来,已发展出遗传转化高等植物的一些新技术,其中有些技术如脂质体融合,微注射技术和电击导入都是基于动物细胞培养方面的工作,而另一些技术是来自于植物界独特的天然转化系统,其中包括已知能遗传转化高等植物的农杆菌(Agrobacterium)的二个种,即致瘤农杆菌(A.tumefaciens)和发根农杆菌(A.rhizogenes),这二个种都能够将其致病质粒Ti或Ri所携带的DNA序列(T-DNA)插入到双子叶植物细胞核基因组中。pTi诱发寄主产生根基肿瘤,pRi诱发寄主产生毛状根。二者的差别可能是毛状根可以从毛状根培养物获得具有完整的T-DNA序列的有生育能力的再生植株,而从致病农杆菌...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王跃华 孙雁霞 吴洁 阎文昭 徐作英 张海强
杜仲是中国特有的经济树种,杜仲毛状根能够合成与杜仲含量相当的次生代谢产物。本实验用发根农杆菌ATCC15834分别感染杜仲Eucommia ulmoidesOliv的子叶、叶片、叶柄、下胚轴和根5个营养器官,结果表明杜仲植物的5个营养器官均能单独诱导出大量的毛状根。经PCR检测,发根农杆菌ATCC15834Ri质粒的rolB基因已转入杜仲毛状根基因组中。说明用发根农杆菌诱导杜仲产生大量的毛状根的方法有效,为大规模用发根农杆菌Ri质粒转化到杜仲植物中提供了理论基础。
关键词：
杜仲 毛状根 发根农杆菌 PCR扩增
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
彭正云 刘德华 肖海军 蒋立文 张丽霞 向勤锃 唐道方
以3个品种茶树的不同部位、器官为材料,探讨发根农杆菌转化茶树及毛状根增殖的条件.感染1025菌种的大红品种茎段,在添加IBA 0.4mg/L的1/2MS培养基上诱导出了毛状根.茶树毛状根细如头发,着生稀疏长根毛,具有激素自主性、分枝多、生长快等特点.经正交试验,将1/2MS培养基的KNO3,NH4NO3质量浓度降至MS培养基的1/8时的培养基,是毛状根伸长、分枝较好的基本培养基.添加IBA 0.2mg/L的培养基,毛状根的伸长、分枝优于添加IBA 0.1mg/L的培养基,但在毛状根上出现少量愈伤组织.
关键词：
茶树 发根农杆菌 毛状根 转化
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
刘锦春 马晔 陶建平 高凯敏 梁千慧
近年来我国西南岩溶地区干旱频发、干湿交替现象严重,植被生存环境恶劣,植被恢复困难,石漠化程度呈加剧之势。丛枝菌根真菌能与植物根系形成互惠共生关系,对植物生长发育及抗逆性有积极影响。研究表明,丛枝菌根真菌能够提高植物的抗旱性。然而,丛枝菌根真菌是否能够提高宿主植物对干湿交替等多变环境的耐受性,目前并没有见到相关报道。以西南岩溶地区适生植物金银花为研究对象,利用盆栽控制实验,采用3因素(接种、水分处理、干旱时间处理)随机区组设计,研究了接种丛枝菌根-摩西管柄囊霉对不同干旱及干湿交替条件下金银花根系形态参数及根系生物量的影响。结果表明:短时间的干旱促进了未接种真菌的金银花根系长度、根系表面积和根系体...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
李慧 刘东超 徐瑞瑞 侯立娜 王天琪 刘忠华 付晓 李圣波
【目的】通过开发特异性高的多态性分子标记位点,以弥补金银花在简单重复序列(SSR)标记方面的匮乏,推动金银花在遗传资源管理及良种鉴定等方向的研究,为后续全基因组测序及组装策略奠定基础。【方法】运用RAD-seq技术对2份金银花样品进行简化基因组测序,利用MISA软件识别contig上的SSR序列并对各类型序列特征进行归纳分析,进而设计引物并利用生物信息学的方法进行引物筛选和有效性检测。【结果】对‘九丰一号’和‘亚特’金银花进行简化基因组测序,分别获得27.805 Mbp和42.560 Mbp干净读长。在组装的45 850个基因序列中共检测到46 999个SSR位点,其中单核苷酸重复单元比例最高(49.15%),六核苷酸重复单元最少(0.20%)。SSR位点的重复基序以(A/T)n为主,具有偏向性。除单碱基和二碱基重复类型外,SSR位点基序的重复次数集中在5～6次,且随重复次数增加,SSR位点重复类型出现的频率呈下降趋势。金银花基因组SSR序列长度介于10～310 bp之间,随重复次数增加,各SSR序列出现的频率逐渐下降。利用Primer3.0成功设计出38 507对SSR引物,设计成功率为81.93%。对挑选的35对SSR引物进行多态性分析,等位基因数、观测杂合度和多态性信息含量(PIC)的平均值分别为5.057、0.363和0.568,其中高多态信息位点26个,中度多态信息位点9个,均未偏离哈迪–温伯格平衡。【结论】利用RAD-seq技术可实现SSR标记的大量开发和多态性SSR引物的筛选,并为金银花在遗传多样性分析和种质鉴定等相关方面的研究提供数据支持。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
冯图 何洋 阮培均
采用不同序列对金银花及其易混品开展基于ＤＮＡ条形码的鉴别研究。结果表明：１４个样品中仅有４个个体为金银花，其余分属于大花忍冬复合类群，为山银花基原植物，多序列ＮＪ树支持《ＦｌｏｒＡ ｏＦ ＣｈｉＮＡ》中的大花忍冬复合类群划分，ｉＴＳ、ｍＡＴ Ｋ、ＴｒＮ ｌＴｒＮ Ｆ序列可鉴别金银花及其易混品，ｒｐｌ３２－ＴｒＮ ｌ和ｒｐＳ１６序列也有较好的ＤＮＡ条形码应用前景，可作为金银花及其易混品分子鉴别的ＤＮＡ条形码候选序列。
关键词：
DNA条形码 金银花 易混品 鉴别
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
刘卫柏 李中
本文介绍了金银花的成分、疾病治疗和健康保健等药用价值;分析了隆回县发展金银花产业的优越自然生态环境条件;阐述了隆回县采取政府支持,进行农村土地互换,农村土地入股发展金银花产业的成功经验,在整合公司、农户、政府各主体的优势资源、实现现代农业的规模经营等方面做出了重要探索。提出以龙头企业控股的股份有限公司和农民合作社为核心的一体化经营,构建生产、加工、仓储、销售于一体的产业链,进行农村土地产权制度的改革等促进农村产业化发展的对策。
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
何新华 陈力耕 郭长禄
为了建立发根农杆菌Agrobacterium rhizogenes介导的杨梅Myrica rubra遗传转化体系,利用携带拟南芥Arabidopsis thaliana LEAFYcDNA片段的发根农杆菌R15834感染东魁杨梅M. rubra‘Dongkui’和荸荠杨梅M. rubra‘Boji’的子叶、叶片和茎段。结果表明,只从东魁杨梅子叶上诱导出毛状根,而且产生毛状根的东魁杨梅子叶数在10%以下。杨梅子叶产生毛状根受多种因素影响,新种子比旧种子容易产生毛状根,在1/2 MS(Murashige and Skoog)培养基培养较在MS培养基上培养好。东魁杨梅子叶上的毛状根经聚合酶链反应(p...
关键词：
经济林学 杨梅 遗传转化 发根农杆菌
[期刊] 林业科学研究
[作者]
刘端冲 杨金库 林若竹 姚艳霞 淮稳霞 赵文霞
[目的]分离并鉴定引起金银花黑斑病的病原菌，为该病害的有效防控提供理论依据。[方法]采用常规组织分离法对发病金银花叶片进行分离，结合形态学、多基因序列分析（ITS、gpd和EF-1α序列）和致病性测定进行病原物种鉴定。[结果]在形态学上，分离获得的菌株YP4在PDA培养基上的菌落呈灰白或黄白色棉毛状，与番茄匍柄霉的菌落特征相符；在基于ITS、 gpd和EF-1α序列联合构建的3种系统发育树中，供试菌株YP4均以较高支持率与番茄匍柄霉（Stemphylium lycopersici）聚在同一分支上；致病性接种实验结果表明，菌株YP4接种至金银花叶片上和番茄叶片上均可产生病斑，并可再分离获得其纯菌株；因此，结合形态学、分子系统发育学以及致病性测定，该病原真菌被鉴定为番茄匍柄霉。[结论]本研究明确了引起河北省金银花黑斑病的病原菌为番茄匍柄霉，这是该病菌在我国危害金银花的首次报道。
关键词：
金银花 黑斑病 番茄匍柄霉
[期刊] 华北农学报
[作者]
范双喜 解淑贞
对石刁柏组织培养中生根难、发根慢、畸形很多的原因及其影响因子进行了研究.结果表明,根系诱导与材料的异质性、外植体生长状况、激素浓度及配比以及继代繁殖代数等条件关系密切.同一品种茎端直接生根较愈伤组织根诱导率高,正常根数亦多.2～3cm长的粗壮幼芽最宜作根诱导材料,细弱幼芽则须进一步复壮.适宜生根培养基为1/2MS+VB_10.3mg/L+IBA2.5mg/L+BA0.25mg/L,生根率为86%,平均根数达9.26条,畸形根率仅8%.继代次数宜控制在16代内.
关键词：
石刁柏 组织培养 根诱导 畸形根
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