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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
董伟 唐琴 卓如意 孙志良 刘静
为建立一种快速、准确的仔猪大肠杆菌病诊断方法,从某猪场腹泻病死的小猪采取病料,经处理后取处理病料腹腔注射12只小白鼠,同时以灭菌生理盐水作对照.24 h内,注入病料的小白鼠全部死亡.采取死亡小白鼠的肝脏,充分研磨后加灭菌生理盐水作1∶5稀释,向稀释液中加入适量大肠杆菌兔血清抗体,混匀后分别于5,10,30 min时取病料涂片,用荧光标记的抗兔IgG抗体染色,荧光显微镜观察.结果显示:从死亡小白鼠病料涂片中能检测出大肠杆菌,其形态与标准大肠杆菌革兰氏染色形态一致.接种生理盐水小鼠未出现死亡,处死后取病料,以同样的方法进行检测,未检测出大肠杆菌.
关键词：
大肠杆菌病 免疫荧光技术 诊断
[期刊] 华北农学报
[作者]
李学伍 张改平 阎玉河 邓瑞广 杨艳艳 王爱萍 李青梅
应用分子免疫学理论 ,将定居因子K88,K99,987P ,F4 1与其特异受体结合 ,封闭肠粘膜上皮细胞的受体 ,阻断致病菌的定居因子与肠粘膜上皮细胞特异受体的结合 ,使致病菌无法定居。试验结果显示 ,其仔猪攻毒保护率为 10 0 % ,预防试验保护率为 10 0 % ,可以有效控制仔猪大肠杆菌的发生 ,为该病的现有预防模式增添了新的内容
关键词：
仔猪 致病性大肠杆菌 定居因子 预防
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘泽文 田永祥 袁芳艳 刘威 周丹娜 杨克礼
为建立大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原的快速鉴别诊断和定量检测方法,用纯化的大肠杆菌K88、K99、987P纤毛抗原免疫家兔制备阳性血清,其琼扩效价分别达到1∶32、1∶32、1∶128;利用该阳性血清IgG致敏醛化的绵羊红细胞,确定了最适K88、K99、987P阳性血清IgG的质量浓度分别为40、160、80μg/mL。用该方法对同一批次的K88、K99和987P纤毛抗原进行3次检测,K88、K99和987P纤毛样品的RIHA效价均为1∶1 600、1∶1 600和1∶800。结果表明,该检测方
关键词：
仔猪 大肠杆菌 纤毛抗原 反向间接血凝
[期刊] 中国农业科学
[作者]
周传丽 刘铮铸 俞英 张勤
【目的】猪源产肠毒素大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)是一类世界范围内流行的致仔猪腹泻的病原菌。依据养猪业生产实践中对致仔猪腹泻病原菌血清学鉴定结果可知,F4ac型ETEC的流行性最为广泛。到目前为止,对ETEC导致仔猪腹泻的机理已经有了比较透彻的阐释。但对ETEC培养液的免疫原性尚未有研究和描述。论文以F4ac型ETEC为研究对象,探索其菌液上清(即培养液)对仔猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的免疫刺激作用。【方法】首先收集F4ac型ETEC菌株200培养12h后的培养液,后经4℃,4 000 r/min,离心15 min收集培养液上清,将...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
方向红 王永娟
为筛选合理的中药方剂,应用人工感染耐药严重的猪源大肠杆菌进行治疗性试验。通过体内外抑菌试验,筛选出马齿苋、黄柏、白头翁、椿皮4味效果较好的中药,再对4味中药的水提物进行抑菌试验。结果表明:黄柏水提物和齿苋水提物对大肠杆菌有较好的抑制作用。
关键词：
大肠杆菌 分离鉴定 中药 抑菌试验
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
李国平 周伦江 姚金水 李沁光 李孟潮 黄沧海
用猪致病性大肠杆菌 K88、K99、987P、F4 1 标准菌株制成的灭活油佐剂作为免疫原 ,待产蛋鸡免疫后收集高免卵黄 ,然后提取、纯化 ,精制成鸡抗猪大肠杆菌特异性高免卵黄抗体并用于临床 .结果表明该制剂安全性好 ,每头仔猪注射或口服 2-4m L剂量预防仔猪大肠杆菌性腹泻 ,效果明显
关键词：
精制卵黄抗体 防治 仔猪大肠杆菌性腹泻
[期刊] 西南农业学报
[作者]
崔赟 谢江 左之才 邓俊良 蔡景义 杨丁
将18头断乳仔猪分成Ⅰ、Ⅱ两组,每组9头(其中♀:4头,♂:5头),分成3个重复,每个重复3头。Ⅰ组为对照组,Ⅱ组为添加1%"清增康"中药组。通过28 d的临床实验,观察其对仔猪生产性能及仔猪各肠段大肠杆菌数的影响。结果表明:①"清增康"可降低仔猪的腹泻率,Ⅰ组、Ⅱ组的腹泻率分别为5.95%、1.59%;但饲料中添加1%的"清增康"可使仔猪的生产性能降低21.42%;②清增康"能显著降低仔猪盲肠、结肠和直肠内大肠杆菌的数量。结论:复方中药"清增康"显著降低肠道内大肠杆菌的数量和降低仔猪腹泻率。
关键词：
中药 仔猪 生产性能 大肠杆菌
[期刊] 中国农业科学
[作者]
周利华 舒青龙 彭秋玲 郭源梅 晏学明
【目的】鉴别影响中国地方猪种仔猪抗水肿与腹泻病的关键基因位点。【方法】采用比较测序法对位置候选基因a1-岩藻糖转移酶基因(FUT1)进行cSNPs搜寻、鉴别,使用PCR-SSCP在10个中、西方猪种共计539个样本中开展SNPs遗传多态性检测;采用小肠上皮细胞体外显微黏附实验在白色杜洛克×二花脸资源家系的479个F2代个体中开展大肠杆菌F18ab黏附表型测定;使用SAS软件包分析SNPs基因型与黏附表型间的相关性。【结果】在FUT1基因中鉴别到两个新的cSNPs位点(M229C/T和M714T/C),其中M714T/C为同义突变,M229C/T引起亮氨酸转变为苯丙氨酸;遗传多态性分析表明FUT...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
党如意 杨增岐 孙世铎 杜恩岐 张淑霞 张改智
本试验主要选择了引起猪黄白痢的常见致病菌株E.coli,K88,通过对其在专用培养基上增菌培养,制成油佐剂灭活苗免疫产蛋母鸡,运用微量凝集试验测母鸡抗体水平,待抗体水平达8 log2以上时,收取鸡蛋制成高免卵黄。选择6窝56头刚出生的未吮乳仔猪(母猪未免疫),第1,2窝16头用E.coli K88标准菌株500亿／头口服人工感染,第3,4窝18头口服E.coli K88标准菌株250亿／头,第5窝10头作为抗生素治疗对照组,第6窝12头为空白对照组,观察记录发病情况,待明显发病后,对第1~4窝仔猪用自制抗E.coli K88高免卵黄口服治疗。试验结果表明,口服抗E.coli K88菌株高免卵黄...
关键词：
猪 大肠杆菌 高免卵黄抗体
[期刊] 华北农学报
[作者]
袁秀芳 王一成 徐丽华 刘邓 牛登元 王朝文
大肠杆菌不耐热性肠毒素(LT)具有免疫增强作用,是良好的免疫佐剂。为了更好的研究其免疫增强效果,本研究将LT的两个亚基LTa(R210G)和LTb克隆到pGST中,原核表达LTa(R210G)和LTb,经Western-blotting分析,表达蛋白具有免疫原性。对表达蛋白进行大量纯化后,以卵清蛋白为模式蛋白(OVA)为模式蛋白,免疫小鼠,ELISA结果表明,OVA+LTa(R210G)佐剂组小鼠的抗体滴度最高,OVA+LTb和OVA+LTa+LT组抗体滴度相似,高于OVA+氢氧化铝组,而OVA+氢氧化铝组高于无佐剂OVA组。因此,LTa(R210G)和LTb具有良好的免疫增强作用,是一种极有...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
任素芳 郭立辉 骆延波 凌泽春 柳尧波
为阐明发酵床养殖对断奶仔猪消化道菌群的影响,对发酵床和水泥地养殖仔猪消化道大肠杆菌和乳酸菌的动态变化进行比较分析。试验期为42d。15头30日龄断奶仔猪分别在试验开始第1天(断奶当天)、第21天和第42天进行扑杀,每次每组扑杀3头,取胃、回肠、盲肠、结肠粘膜层及各段内容物进行2类细菌的分离计数,同时检测相同时间点发酵床表层与深层垫料中的细菌数量。结果发现:随着养殖时间的延长(1～42d),消化道大肠杆菌呈下降趋势,如发酵床仔猪结肠段大肠杆菌由开始的6.4×107降低到2.2×105,而乳酸菌先下降后上升,如发酵床仔猪回肠段内容物乳酸菌数量由4.6×109降到2.6×108后再增加到1.4×10...
关键词：
发酵床 仔猪 大肠杆菌 乳酸菌 胃 肠
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
侯国珺 张民扬 汪晶 朱伟云
[目的]本试验旨在探究壳聚糖螯合锌对大肠杆菌K88攻毒仔猪盲肠微生物组成、代谢产物及炎症反应的影响。[方法]试验选取48头21日龄体重平均为6.21 kg的断奶仔猪,随机均分为4组:对照组(CON),饲喂基础饲粮;氧化锌组(ZnO),基础日粮中添加氧化锌(锌终含量1 600 mg·kg~(-1));壳聚糖螯合锌组(CS-Zn),在基础日粮中添加壳聚糖螯合锌(锌终含量100 mg·kg~(-1),壳聚糖终含量766 mg·kg~(-1));壳聚糖组(CS),在基础日粮中添加壳聚糖,壳聚糖含量与壳聚糖螯合锌组相等。在试验15 d时,每组随机选取6头仔猪,每头口服10~(10) CFU的大肠杆菌K88培养液进行攻毒,攻毒48 h后屠宰、取样,测定仔猪盲肠形态、盲肠食糜微生物组成和短链脂肪酸浓度以及盲肠黏膜中细胞因子浓度。[结果]与对照组相比,氧化锌和壳聚糖螯合锌处理均显著降低了仔猪盲肠隐窝深度,壳聚糖螯合锌组和壳聚糖组仔猪盲肠形态病理评分也显著降低。与对照组相比,饲粮中添加壳聚糖螯合锌和壳聚糖也均显著降低了仔猪盲肠微生物中变形菌门的相对丰度(P<0.05)。并且,壳聚糖螯合锌处理上调了乳杆菌属和普氏菌属9的相对丰度,下调了链球菌属和布劳特氏菌属的相对丰度。此外,与对照组相比,壳聚糖螯合锌组仔猪盲肠中乙酸、丁酸、总短链脂肪酸和乳酸含量显著上升,盲肠内容物的pH值显著降低,而壳聚糖螯合锌和壳聚糖组中丁酸、总短链脂肪酸和乳酸含量无显著差异。同时,壳聚糖螯合锌处理显著降低了盲肠黏膜中髓过氧化物酶(MPO)、白细胞介素1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和干扰素γ(INF-γ)水平。[结论]日粮中添加壳聚糖螯合锌可以改善断奶仔猪盲肠微生物组成,提高盲肠食糜中乳酸和短链脂肪酸浓度,降低盲肠黏膜中炎症因子浓度,有助于缓解大肠杆菌攻毒引起的肠道炎症反应。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郭蓉 张峰 郑卫江 饶时庭 薛永强 邹雪婷 李建航 姚文
［目的］本试验拟通过比较采食商品教槽料（含抗生素和无机铜）和自配教槽料（不添加抗生素和无机铜）苏淮哺乳仔猪粪便中氨苄西林（ＡＭＰ）、四环素（ＴＥＴ）、头孢噻肟（ＣＴＸ）耐受肠杆菌数的差异和分离自ＣＴＸ－ＭＡＣ平板大肠杆菌耐药性的变化，剖析和探讨撤除饲料中的抗生素和无机铜对缓解猪源大肠杆菌耐药问题的可行性与意义。［方法］选用９窝２７头７日龄哺乳仔猪，随机分为３组，每组３窝９头仔猪，从１４日龄开始Ｗ０组饲喂商品教槽料，Ｗ１和Ｗ２组饲喂不同的自配教槽料，３０日龄断奶，采集每头仔猪７日龄和３０日龄的粪样，进行ＭＡＣ平板和ＴＥＴ、ＡＭＰ、ＣＴＸ－ＭＡＣ平板计数，并用琼脂稀释法检测分离自ＣＴＸ－ＭＡＣ平板．．．
关键词：
无抗教槽料 大肠杆菌 耐药性 铜抗性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
刘威 何深宏 任绍科 李小燕 杨雪芬 程方俊 周作勇 曹立亭
通过制备兔抗化脓隐秘杆菌(Trueperella pyogenes)高免血清,筛选固定方法、封闭液、洗涤液、抗体稀释度、抗体孵育时间等应用条件,建立一种检测化脓隐秘杆菌的间接免疫荧光方法。结果表明:用冷丙酮作固定剂,10%山羊血清作封闭液,0.05%Tween–20的0.01 mol/L pH 7.4 PBS(磷酸缓冲盐溶液)作洗涤液,兔抗化脓隐秘杆菌高免血清(一抗)1∶50稀释,37℃作用2 h,羊抗兔FITC(二抗)1∶100稀释,37℃作用2 h,草酸铵结晶紫衬染菌体3 min,对纯培养物化脓隐秘杆菌检测,可见清晰的特异性荧光,能区分溶血隐秘杆菌、伪结核棒状杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、沙门氏菌、猪链球菌;在人工感染化脓隐秘杆菌死亡小鼠的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏及发病山羊临床病料中均能检出化脓隐秘杆菌。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孙伟 吴中勤 胡青海 李树香 李刚
利用地高辛标记的０８５ ｋｂ 的鸡传染性贫血病毒 （ Ｃ Ａ Ｖ） 核酸探针， 对江苏某地区疑为 Ｃ Ａ Ｖ 的１５～３０日龄病鸡的肝 Ｄ Ｎ Ａ 样品进行斑点杂交。结果在被检的２０份样品中有６份为阳性，阳性率为３０％ 。对相同样品根据已知引物（特异性扩增出 Ｃ Ａ Ｖ 的０５８ ｋｂ Ｄ Ｎ Ａ） 进行 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增， 所得结果与斑点杂交相同。对应的病鸡血清经间接免疫荧光试验 （ Ｉ Ｆ Ａ）， 有７份为 Ｃ Ａ Ｖ 抗体阳性， 与 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增结果的符合率为８３％ 。初步结果表明， 江苏某地区存在 Ｃ Ａ Ｖ 感染。
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