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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵明文 李娜 梁婉琪 王南 张大兵 潘迎捷
根据对韩国灵芝菌丝体、不同发育阶段子实体及孢子粉中灵芝酸含量的测定结果 ,以含量较高的灵芝原基为材料 ,提取mRNA ,从而构建以λZAPExpress为载体的表达型cDNA文库。经检测 ,所构建文库的滴度达到 6× 10 5pfu·mL-1,重组率达到 96 % ,插入片段的大小均在 70 0bp以上。该表达文库的构建 ,为进一步克隆和鉴定灵芝酸合成的相关基因打下了良好的基础。
关键词：
灵芝酸 原基 cDNA表达文库
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
苏振琪 韩莹琰 李雅博 刘然 刘超杰 郝敬虹 范双喜
为研究叶用莴苣中Hsp70基因的功能,以提高其耐热性,构建LsHsp70-3701过表达载体,农杆菌介导法转化叶用莴苣。从叶用莴苣中克隆得到LsHsp70-3701,利用NcoⅠ和SpeⅠ双酶切LsHsp70-3701和植物表达载体pCAMBIA1304,回收目的片段并连接,经鉴定后获得过表达载体。以‘P-S11'叶用莴苣为转化材料,针对遗传转化关键因素:苗龄、植物激素浓度、预培养时间、侵染液OD值、侵染时间和共培养时间进行优化。试验结果表明最佳转化条件为:苗龄5d的子叶,6-BA 0.2mg/L+NAA
关键词：
莴苣 过表达载体 农杆菌 遗传转化
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
王振东 孙仓
将引起人类腹泻主要病原物小球状病毒(Small round structured virus;SRSV)编码抗原蛋白基因的全长序列1605bp,导入来自三叶草黄脉病毒(Clover yellow vein virus;ClYVV)侵染性全长cDNA克隆的侵染性植物病毒表达载体pClYVV/CP/W基因组的NIb/CP基因之间,构建了重组病毒克隆pClYVV-NV1.6。用上述重组病毒克隆接种蚕豆植物,表现了与野生型ClYVV相同的症状。从发病叶中提取总RNA,用反转录PCR(RT-PCR)对上述重组病毒克隆的转录进行了检测,结果表明,外源基因在F4子代病毒基因组中仍然稳定存在。从发病叶中提取总...
关键词：
植物病毒载体 小球状病毒 抗原蛋白 表达
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
赵明文 陈明杰 王南 梁婉琪 尚晓冬 王晨光 曹哲民 张大兵 潘迎捷
利用RAPD技术对生产中常用的灵芝属 8个菌株的亲缘关系进行了分析。根据UPGMA构建的树状图表明 :8个菌株在较低的相似水平上可以分成 3个明显不同的组 :第 1组包括黑芝 (Ganodermaatrum)、松杉灵芝 (Ganodermatsugae)、圆芝 (Ganodermarotundatum)、灵芝 0 770 (Ganodermalucidum 0 770 )和韩国灵芝 (GanodermalucidumHG) ;第 2组包括密纹灵芝 (Ganodermacrebrostriatum)和紫灵芝 (Ganodermasinense) ;第 3组为树舌灵芝 (Ganodermaappl...
关键词：
灵芝 随机扩增多态性DNA 亲缘关系
[期刊] 中国高等教育
[作者]
韩震
"中国梦"就是实现中华民族的伟大复兴,这是近代以来历代中国人的夙愿,反映了中国人民希望国家富强、民族振兴和生活幸福的共同心声。经由习近平总书记明确提出之后,得到国内外各界的广泛关注和解读。但怎么样才能使"中国梦"这个核心目标理念成为凝聚人民群众、激发创新力量、推动社会发展的理论概念和思想体系,仍然是摆在我们面前的重要任务。作为教育工作者和哲学社会科学研究
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
郑炳松 陈苗 褚怀亮 艾雪 黄有军 李雪芹 黄坚钦
利用cDNA-AFLP(互补脱氧核糖核酸-扩增片段长度多态性)技术,在山核桃Carya carthayensis嫁接过程中分离得到1个与山核桃嫁接相关的cDNA片段。与美国国家生物技术信息中心(NCBI)同源性比较分析表明,该cDNA片段与小麦生长素响应因子部分区段有81%的同源性,命名为CcARF。荧光定量实时聚合酶链式反应(RT-PCR)分析表明:该基因在山核桃嫁接前砧木和接穗中都有强烈表达,但在嫁接后3d急剧下降,在这之后砧木中的表达增强不大,而接穗中嫁接后7d表达开始增强,到嫁接后14d表达明显,比嫁接后3d增强了4.7倍。该CcARF片段可能对山核桃嫁接起到基因表达调控的作用。图3表...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
赵凯歌 王文颖 陈龙清
应用cDNA-SRAP标记方法,筛选出19对引物,对8-12月所采集的24个蜡梅花芽(花朵)样品所制备的cDNA模板进行扩增,研究蜡梅花发育各时期的基因表达情况,并对部分差异片段进行了表达分析和功能预测。结果表明,cDNA-SRAP分子标记技术操作简便,能产生较丰富的条带,是进行差异显示分析研究的有效途径;与玉米淀粉去分支酶基因、欧洲山杨纤维素合成酶基因、玉米抗锈病基因和小麦多酚氧化酶基因相似性高的差异表达片段,可能对蜡梅花发育和抗性表现起着重要的作用。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
侯思名 张薇 翟书华 岑晓江 黄兴奇 程在全
云南药用野生稻具有许多优良性状和有利基因,其CC基因组的优良基因很难通过有性杂交转移到栽培稻(AA基因组)上,但可以通过双元细菌人工染色体(BIBAC)以大片段的形式转化到栽培稻中。利用BIBAC2载体构建了云南药用野生稻基因组DNA文库,该文库包含53 760个克隆,平均插入片段76 kb,保存在140块384孔板中,其库容相当于药用野生稻基因组的5.86倍。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张双双 陈晓斌 林冬梅 林春梅 林兴生 曹剑虹 林占熺
通过小鼠急性毒性试验、30 d喂养试验、黄曲霉毒素B1的测定和重金属测定,研究菌草灵芝菌糟的饲用安全性.结果表明:小鼠经口的急性毒性MTD>20 g.kg-1,对小鼠无不良影响;30 d喂养试验期间,各组小鼠的生长不受影响,且添加5%、15%灵芝菌糟组小鼠日增重分别比对照组提高21.62%(P>0.05)、27.03%(P0.05);黄曲霉毒素B1、重金属含量均在饲料卫生标准限定范围内.
[期刊] 西南农业学报
[作者]
侯思名 刘凌云 殷旭东 岑晓江 王波 程在全
水稻的生产一直受到生物和非生物逆境等因素的影响,容易造成遗传基础单一,迫切需要拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,引进不同来源的抗性和耐性基因。而野生稻是一个重要的有利基因库,充分利用野生稻的有利基因可拓宽现有栽培稻品种的遗传基础,有利于选育优良品种应用于生产或创造出特殊中间材料。但对于野生稻的利用目前仍存在许多困难,通过常规杂交途径一般难以实现。为了拓宽栽培稻的遗传基础,利用云南药用野生稻有利基因,通过构建BIBAC文库的策略挖掘云南药用野生稻有利基因用于栽培稻的改良。而高质量的载体制备在文库的构建中起非常重要的作用,是文库构建的一个关键因素。本研究对高质量BIBAC载体制备中的关键技术如提取、纯...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
Hong In Pyo Sung Gyoo Byung Nam Hack Woo
比较了利用无菌短木接种法、钻孔接种法和端木夹心接种法等接种方法接种桑树段木后Phellinus linteus的菌丝生长和定殖状况。研究表明利用灭菌的短木接种P.linteus,生长和定殖良好,传统的钻孔接种法和端木夹心接种法菌丝生长定殖不好。P.linteus在20 cm长的桑木上生长和定殖所需的最适的含水量为42%,接种后12 h,P.linteus立即进入快速生长期。接种后的桑木埋入土壤中需要5～6个月产生担子果,在培养室内温度为31～35℃,相对湿度大于96%时有利于子实体的形成。
[期刊] 教育发展研究
[作者]
秦玉友
在教育质量提升时代,人们开始广泛关注教育质量状况,希望通过科学的教育质量指标描述、测量、评价和改进教育质量。这就带来了一些不可回避的问题,包括哪些指标可以用来表达教育质量,这些指标面临怎样的理论合法性和实践合理性挑战。因此,厘清不同的教育质量指标,分析不同指标表达教育质量的比较优势,解释这些指标的使用情境就成为教育质量指标研究的重要内容。
关键词：
义务教育 教育质量 质量指标
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
韩彩霞 赵德明 吴长德 宁章勇 杨建民 刘美丽 马李颖
为快速、准确定量绵羊PrP基因的mRNA,建立了绵羊PrP基因实时荧光定量聚合酶链反应检测方法。根据已报道的绵羊PrP基因序列,设计合成引物;采用RT-PCR方法扩增目的片段;构建标准重组质粒制备标准曲线,用于样品检测。结果发现,中枢神经系统组织PrP基因的表达量(copies/ng总RNA,39420)比外周组织(为7845)的高;在中枢神经系统中,脑干的PrP基因的表达量最高(为67020);外周器官中,淋巴结PrP基因的表达量最高(为29086),肾脏的表达量最低(为125)。建立绵羊PrP基因实时荧光定量PCR方法,对PCR扩增反应中每一个循环的产物进行定量分析,为进一步研究绵羊组织器...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
任昂 曹鹏飞 吴凤礼 李梦娇 姜爱良 师亮 赵明文
[目的]利用比较基因组学方法，对药用模式真菌灵芝的基因组中的小G蛋白基因家族成员进行系统的预测分析和比较。[方法]利用真菌物种中已经报道的小G蛋白，对灵芝全基因组进行BLAST分析，筛选出所有灵芝的小G蛋白基因，并分析这些同源小G蛋白的基本特性。通过小G蛋白家族的进化树分析和功能域分析，解析灵芝小G蛋白家族成员的进化关系。设计每一个小G蛋白同源基因的特异性引物，通过荧光定量PCR检测小G蛋白同源基因的表达。[结果]灵芝中发现了29个小G蛋白家族基因，其中Ras亚家族4个，Rho亚家族4个，Rab亚家族12个，Arf亚家族7个，Ran亚家族1个,还有一个线粒体小G蛋白。菌丝体中有28个小G蛋白基...
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