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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
严准 田志宏 孟金陵
甘蓝是一种重要的蔬菜作物，利用小孢子培养方法可以获得纯合的双单倍体，加快甘蓝的育种进程以及提供遗传分析的材料。目前，有关甘蓝小孢子培养国内外报道较少，而且这些研究所用的材料多为结球甘蓝和青花菜等［１，２］，而有关苤蓝的游离小孢子培养还未见报道。根据前...
关键词：
甘蓝 小孢子培养 胚状体
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李浩杰 蒲晓斌 张锦芳 张德发 夏凊 石化娟 蒋俊 蒋梁材
本试验对甘蓝型油菜新胞质不育恢复系(NER)进行游离小孢子培养,对小孢子培养的影响因素作了初步研究,结果表明:不同遗传背景下的甘蓝型油菜NEA不育胞质恢复系(NER)胚产量差异显著,即表明在相同的试验条件下基因型的差异是造成胚产量差异的重要原因。提高小孢子胚发生能力试验表明:在诱导培养基上添加适当的6-BA和NAA有利于小孢子胚的发生;固液双层培养优于液体单层培养;在诱导培养基中添加秋水仙碱加倍处理小孢子胚产量与对照差异不明显。在诱导直接成苗前对子叶型胚进行12h/12h弱光照1~2 d、在生根培养基中添加一定浓度的NAA等处理能提高小孢子胚成苗率。建立了一套新胞质不育材料的小孢子培养优化体系...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
祁魏峥 颉建明 郁继华 康俊根
对１０８个甘蓝品种进行游离小孢子培养，计算出胚率，分析表型与出胚难易的关系。经流式细胞仪对其再生植株进行倍性鉴定，计算自然加倍率。以流式细胞仪的结果为基准对再生植株叶片气孔保卫细胞周围叶绿体数目，保卫细胞长、宽以及周长规律进行研究。结果表明：具有圆球、早熟、春甘蓝３个特性的甘蓝品种易出胚，而扁球、中熟、晚熟以及越冬甘蓝不易出胚；再生植株的自然加倍率会因基因型的不同而有较大差异；不同倍性的再生植株叶片保卫细胞周围叶绿体平均个数所得规律为：单倍体６～９个，二倍体９～１２个，四倍体１２～２３个，且随着倍性的增加，叶绿体个数分布范围更加广泛。保卫细胞长度变化范围为：单倍体１８～２３μｍ，二倍体２５～３．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
余凤群 刘后利 傅丽霞 瞿波
研究了培养基中激素种类和浓度以及蔗糖浓度对甘蓝型油菜小胚状体增大和形态的影响。在NLN培养基中，分别附加2，4-D、IAA、6－BA、Zt和GA3对小胚状体的进一步增大作用不大，用不含激素的NLN培养基效果最好。蔗糖浓度对小胚状体生长和发育影响显著，挽救球形、心形和畸形小胚，用含13％蔗糖和NLN培养基效果最佳，挽救鱼雷形小胚，蔗糖浓度可降至2％～8％。
关键词：
甘蓝型油菜 小孢子培养 胚状体
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈玉萍 田志宏 陈爱武 孟金陵
包心芥菜游离小孢子培养的初步研究陈玉萍１）田志宏２）陈爱武２）孟金陵２）（１）华中农业大学园艺系；２）华中农业大学作物遗传改良国家重点实验室，武汉４３００７０）ＳＴＵＤＩＥＳＯＮＭＩＣＲＯＳＰＯＲＥＣＵＬＴＵＲＥＯＦＢｒａｓｉｃａｊｕｎｃｅａｖａｒ...
关键词：
包心芥菜 小孢子 胚状体 单倍体植株
[期刊] 华北农学报
[作者]
曾爱松 冯翠 高兵 宋立晓 严继勇
以20份类型丰富的F1及亲本甘蓝为试材,探讨了不同甘蓝类型、F1及其亲本材料、供体植株的生长温度、供体植株的花期、高温热激时间、NLN培养基pH值等因素对甘蓝小孢子胚胎产量及质量的影响,为建立高效、完善的结球甘蓝小孢子培养技术体系提供依据。结果表明:不同叶球类型与小孢子的产胚率无明显相关性,但不同栽培季节及熟性的甘蓝品种间却存在显著差异,其中春秋类型的早、中熟甘蓝要明显好于晚熟的越冬甘蓝;用产胚能力强与产胚能力弱的材料分别做亲本杂交,所得杂交种的出胚率介于两亲本之间,表明小孢子产胚能力是一种受基因调控的遗传性状;供体植株的生长温度对于结球甘蓝胚状体的产生并无显著影响;从胚胎发生频率及胚胎质量来...
关键词：
结球甘蓝 小孢子培养 技术优化
[期刊] 华北农学报
[作者]
李光威 兰素缺 孙宝启
在游离小孢子培养过程中认为子房共培养可显著地提高游离小孢子胚状体愈伤率和再生率 ,子房共培养以 2 0个子房为宜。低温子房共培养胚状体发生和愈伤率低 ,但绿苗分化率较高 ,施加PAA、谷氨酰胺对游离小孢子形成的胚状体有促进作用。麦芽糖是游离小孢子培养最好的碳源 ,以蔗糖、葡萄糖以及葡萄糖和果糖搭配作碳源均未获得胚状体。检查培养 3d后的小孢子活力发现 ,唯有麦芽糖作碳源培养的小孢子有活力 ;认为高浓度的蔗糖、葡萄糖以及葡萄糖加果糖对小孢子有毒害作用。当葡萄糖浓度达到 2 0mmol/L时就对小孢子有毒害作用且致死。当在麦芽糖培养基中培养 1d后加入高浓度的葡萄糖发现小孢子存有活力 ,而且随着...
关键词：
小麦 游离小孢子培养 诱导率
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
马勇斌 张恩慧 李殿荣 肖怀娟 许忠民 程永安
【目的】探索一种能将有限的DH株快速扩繁的植株再生技术,扩大DH株数量以提高育种效率。【方法】以甘蓝小孢子胚状体不定芽叶片为试材,MS为基础培养基,分别添加不同质量浓度的6-BA(1.0,2.0,3.0,4.0mg/L)和NAA(0.05,0.1,0.2,0.4mg/L),筛选出最优质量浓度组合;在6-BA和NAA最优质量浓度组合上,继续添加不同质量浓度的GA3(0.5,1.0,1.5,2.0mg/L),比较筛选小孢子不定芽叶片的最佳再生方法。最后,在MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1mg/L不定芽诱导培养基上,研究不同生长日龄DH株叶片的诱导效果。【结果】在MS+6-BA 2.0...
关键词：
甘蓝 DH株系 叶片 植株再生
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
于文佳 侯喜林 赵晓嫚 刘照坤
以7个基因型的小菘菜品种为供试材料,采用游离小孢子培养技术,研究基因型、培养方法、激素及AgNO3对小孢子胚芽诱导率和植株再生的影响。结果表明:基因型是影响小菘菜小孢子胚芽诱导率的最重要的因子;小菘菜小孢子培养初期用170 g.L-1蔗糖处理1 d后,更换培养基能显著提高小孢子的胚芽诱导率;0.05 mg.L-16-BA和0.2 mg.L-1NAA能促进小菘菜小孢子胚的发生;添加0.1 mg.L-1GA3和0.3或0.4 mg.L-1AgNO3可显著提高小菘菜小孢子胚的胚芽诱导率和平均每胚出芽数。
关键词：
小菘菜 游离小孢子培养 胚状体 植株再生
[期刊] 华北农学报
[作者]
张德双 曹鸣庆 秦智伟
对绿菜花“Ｇａｌａｘｙ”、“ｂｃ－０”和“ｂｃ－４”３个基因型进行了渗透压、外源激素、热激处理温度和时间、花蕾长度或小孢子发育时期的影响因素研究。结果表明，激素的作用并不明显，但相比之下，单独加入６－ＢＡ比同时加入６－ＢＡ、ＮＡＡ效果好；绿菜花游离小孢子培养的最适热激处理温度和时间为３２．５℃，２４ｈ；绿菜花游离小孢子的最适培养花蕾长度因基因型而异，如基因型“ｂｃ－４”蕾长为４．１～５．０ｍｍ，此时大多数小孢子处在单核晚期、双核早期，出胚率高达３７．０８胚／蕾
关键词：
绿菜花,小孢子培养,影响因素
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
冯翠 曾爱松 严继勇 宋立晓 高兵 侯喜林
以10份不同类型的F1代青花菜为试材,研究了基因型、小孢子发育时期的细胞学观察、培养基类型及pH值等对青花菜游离小孢子培养因素的影响。结果表明:基因型是影响青花菜小孢子胚状体产量的主要因素,不同品种间胚胎诱导频率差异显著;花蕾大小与小孢子发育时期有一定的关系,不同基因型之间最适花蕾的长度也有一定的差异;1/2 NLN+130 g蔗糖是青花菜小孢子培养的最佳培养基;培养基最佳pH值为6.2;子叶胚在液体培养基中停留25 d为最佳时间;MS培养基中琼脂含量为7.0 g.L-1时胚状体苗的成活率最高。
关键词：
青花菜 游离小孢子培养 胚状体 植株再生
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张琳 侯喜林 郝慧楠
以3个高菜品种三池高菜、紫高菜、柳川大缩缅为试材,研究不同培养条件对小孢子胚诱导和植株再生的影响。结果表明:基因型是限制小孢子胚发生的主要因素,相同处理条件下,不同基因型之间出胚率有显著差异,紫高菜出胚率为16.00%,三池高菜出胚率为10.67%,而柳川大缩缅未产生小孢子胚;热激诱导时间对胚发生也有明显影响,当热激(33℃)时间为48~72 h时出胚率有较大提高;转胚后适宜胚状体生芽培养基为B5+0.02 mg.L-1TDZ+0.02 mg.L-1NAA+0.05 mg.L-1KT+1 g.L-1活性炭+30 g.L-1蔗糖+8 g.L-1琼脂,生芽率为88%;继代生根培养基以1/2MS+0...
关键词：
高菜 小孢子培养 胚状体 再生植株
[期刊] 华北农学报
[作者]
蒋武生 张晓伟 姚秋菊 原玉香 耿建峰
以24个小白菜品种为材料,通过在NLN培养基中添加不同浓度活性炭,研究其对游离小孢子培养的影响。结果表明:在NLN-13培养基中添加活性炭(0.5 g/L),有利于小孢子胚的诱导和形成,供试材料(N4,N8)添加活性炭处理胚诱导率较未添加活性炭的处理分别提高19,66.5倍。采用添加活性炭(0.5 g/L)的NLN培养基对24份小白菜品种进行游离小孢子培养,有20份材料诱导出胚,培养成功率为83.3%。表明添加活性炭的培养基对小白菜游离小孢子培养有较好的效果。不同基因型间胚诱导率差别较大,每花蕾诱导胚数为0.4~86.7个。依据胚诱导率的高低可将其分为极易诱导、易诱导、难诱导和不能诱导出胚4类...
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵前程 吉立柱 蔡荣旗 刘莉莉 佟志强 孙德岭
以186个花椰菜杂交品种及组合为试材,进行了游离小孢子培养研究。结果表明:基因型是胚状体发生的决定因素;24 h 32℃的高温前处理是胚状体发生的必须条件;单核靠边期到双核期的小孢子是进行胚状体诱导的最佳时期,胚状体发生频率最高;培养基中添加6-BA 0.1 mg/L,NAA 0.005 mg/L可以促进胚状体发育。将20 d的胚状体进行脱分化处理,可以大幅度提高胚状体的成活率,植株再生率为53%,再生植株中双单倍体占83.5%。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
曾爱松 李家仪 李英 宋立晓 侯喜林 严继勇
[目的]本文旨在探讨结球甘蓝游离小孢子培养早期体胚发生的分子机制,分析游离小孢子在热激处理下的基因表达谱。[方法]将易出胚结球甘蓝高代自交系611单核靠边期小孢子分别在体外32.5℃培养1 d(热激处理,E2)、体内正常生长1 d(对照组1,E3)及体外25℃培养1 d(对照组2,E5),利用转录组测序技术(RNA-Seq)对3个处理的小孢子文库进行差异基因表达谱分析,并鉴定热激处理下早期体胚发生的响应基因。[结果]将3个处理的小孢子Uni Gene表达量依次进行两两相比,即E2 vs E3、E2 vs E5以及E3 vs E5,分别鉴定出2 506、1 073和3 322个差异表达基因。基因本体(gene ontology,GO)聚类分析表明,热激处理下的差异表达基因显著富集到细胞组分中的细胞部件、细胞及细胞器;在分子功能中,这些基因在结合、催化活性及核酸结合转录因子活性中的比例最高;在生物过程中的细胞过程、代谢过程及刺激反应等类别中的比例也最高。京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路分析显示,热激处理下的差异表达基因显著富集到植物激素信号转导、植物病原互作、淀粉和糖代谢、抗坏血酸代谢、苯丙氨酸代谢以及多糖降解等途径。进一步对抗坏血酸代谢途径相关基因进行分析,抗坏血酸过氧化物酶基因APX1和APX2,半乳糖脱氢酶基因Gal DH以及乙醛脱氢酶基因AD在体外32.5℃培养1 d后均显著上调表达。[结论]通过转录组学方法揭示了结球甘蓝游离小孢子在热激处理下基因组的表达变化,鉴定了可能与早期体胚发生相关的抗坏血酸代谢途径基因,为进一步研究甘蓝小孢子体胚发生的分子机制奠定了基础。
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