- 年份
- 2024(2812)
- 2023(4291)
- 2022(3700)
- 2021(3507)
- 2020(2994)
- 2019(6751)
- 2018(6995)
- 2017(11734)
- 2016(7452)
- 2015(8685)
- 2014(9109)
- 2013(8645)
- 2012(8303)
- 2011(7597)
- 2010(8004)
- 2009(7100)
- 2008(7389)
- 2007(7015)
- 2006(6290)
- 2005(5666)
- 学科
- 济(20472)
- 经济(20431)
- 管理(18195)
- 业(15537)
- 企(12851)
- 企业(12851)
- 学(9692)
- 农(7337)
- 中国(7186)
- 方法(7077)
- 理论(6813)
- 财(6493)
- 制(6073)
- 业经(5446)
- 教育(5352)
- 银(5230)
- 银行(5182)
- 数学(5067)
- 行(4926)
- 教学(4898)
- 数学方法(4892)
- 农业(4675)
- 和(4601)
- 融(4548)
- 金融(4543)
- 地方(4491)
- 务(4137)
- 财务(4114)
- 财务管理(4092)
- 体(3828)
- 机构
- 学院(107794)
- 大学(106461)
- 研究(41346)
- 科学(31031)
- 管理(30761)
- 中国(30670)
- 济(30491)
- 经济(29366)
- 农(27843)
- 理学(24868)
- 京(24656)
- 所(24475)
- 理学院(24429)
- 管理学(23562)
- 管理学院(23388)
- 研究所(22333)
- 农业(22224)
- 业大(21063)
- 江(20579)
- 中心(18283)
- 财(17448)
- 技术(17328)
- 省(17133)
- 范(16388)
- 州(16141)
- 师范(16052)
- 北京(15551)
- 院(15397)
- 农业大学(14213)
- 室(14082)
- 基金
- 项目(67613)
- 科学(48614)
- 研究(46391)
- 基金(43274)
- 家(41009)
- 国家(40600)
- 科学基金(31023)
- 省(29563)
- 划(25153)
- 社会(23476)
- 教育(22960)
- 基金项目(22267)
- 自然(21917)
- 社会科(21810)
- 社会科学(21801)
- 自然科(21323)
- 自然科学(21307)
- 自然科学基金(20904)
- 编号(20205)
- 资助(18601)
- 成果(18481)
- 重点(16731)
- 课题(16472)
- 计划(15386)
- 科技(15203)
- 发(14760)
- 创(13747)
- 科研(13371)
- 部(13266)
- 年(13139)
共检索到174226条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
徐悦 梁利群 孙博 常玉梅
为探究碱水环境中自然优势种瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii)的耐碱离子调节机制，采用胰蛋白酶消化法对其鳃细胞(Gill cells ofLeuciscuswaleckii，LWG)进行体外培养，确定该类原代和传代细胞培养的适宜条件并进行耐受实验，用以对瓦氏雅罗鱼在碱生境中的生长特性进行论证。结果表明：瓦氏雅罗鱼原代鳃细胞培养在15℃，含有10%胎牛血清(Fetal bovine serum，FBS)的DMEM培养基（Dulbecco's modified eagle medium）中可获得稳定、良好的培养效果；36 h～72 h即可传代，稳定传代后的细胞命名为：LWG细胞。传代培养过程中，36 h时LWG细胞生长代谢旺盛可用于后续实验。碱水生境中，为缓解碱离子对鱼体造成的损伤，鳃细胞将启动渗透压胁迫应答机制。本研究对LWG细胞进行碱胁迫实验并检测其细胞活性和功能后发现：LWG细胞在25～50 mmol/L NaHCO_(3)浓度下耐受3h时，增殖率约60%并初现细胞凋亡。由此推断，在25～50 mmol/L的碳酸盐碱度胁迫下，LWG细胞具有强渗透压的碱度耐受性并促使细胞发生凋亡现象。对LWG细胞原代培养条件的摸索，将为探索瓦氏雅罗鱼碱胁迫下渗透压应激响应机制和相关基因功能的验证提供相对稳定的实验材料。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王楠 常玉梅 唐然 何强 张利民 梁利群
本研究以来自达里湖(碱水)和松花江(淡水)的瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii)杂交F2为实验材料,通过碱度耐受实验进行性状测定,以39对多态的EST-SSR和SSR为标记,对77个F2个体进行基因分型,根据Fisher确切概率法对F2基因型和耐碱性状进行关联分析。结果发现,有2个标记与耐碱性状显著相关(P
[期刊] 林业科学
[作者]
刘磊 顾玉红 孟坤 王莉 黄伟
以文冠果成熟种胚诱导的愈伤组织为材料,进行悬浮培养细胞系的建立及细胞生长特性的研究。结果表明:文冠果细胞悬浮培养的初始接种量在100mL三角瓶40mL液体培养基中以2.0g为宜,最适激素浓度以2,4-D,6-BA,NAA均为0.5mg·L-1为宜,细胞活力在接种第3天时达到最大,细胞分裂指数在接种第10天时达到最大,鲜质量增长量在第14天时达到最大。
[期刊] 林业科学研究
[作者]
倪建伟 魏琦 杨秀艳 许秀玉 武海雯 张华新 刘涛
以野生唐古特白刺的茎段、叶片为外植体,研究了Na Cl O对外植体的消毒效果和激素2,4-D、NAA和6-BA对愈伤组织诱导及愈伤组织形态的影响,并利用疏松型愈伤组织建立了白刺悬浮细胞系,对其生长特征进行了分析。结果表明:对茎段和叶片用2%的Na Cl O消毒10 min最适宜,时间过长或过短均会影响成活率;3种激素对愈伤组织的相对生长量和形态均有影响,其中,2,4-D是主要影响因子,且茎段诱导出的愈伤组织相对生长量比叶片的高;根据愈伤组织的生长速度和形态,适宜用浅黄色疏松型愈伤组织构建唐古特白刺悬浮细胞系,最佳试验组合为MS+2,4-D 1.5 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1+6...
[期刊] 中国水产科学
[作者]
赵建青 贾鹏 刘文枝 周勇 江南 范玉顶 易梅生 曾令兵
采用组织块移植法,对尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)的肾脏组织细胞进行原代培养,建立了罗非鱼肾脏细胞系,已稳定传代培养50代以上,命名为TiK。罗非鱼肾脏细胞系为纤维样细胞,其最佳培养基为DMEM,最适培养温度为28℃,最适血清浓度为15%。在最适培养条件下,罗非鱼肾脏细胞系的群体倍增时间为45.8 h。细胞经液氮冷冻保存6个月后进行复苏,经台盼蓝染色,约(89.84±3.48)%的细胞具有活性,复苏后细胞生长旺盛。染色体分析显示,第32代罗非鱼肾脏细胞系染色体数目分布在20～66之间,众数为48。使用本实验室分离鉴定的罗非鱼病毒感染罗非鱼肾脏细胞,可产生典型的细胞病变效应,表明罗非鱼肾脏细胞对该病毒敏感。该细胞系的建立为罗非鱼病毒病防控技术研究提供了重要的实验材料。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李莲军 韦精卫 黎宗强 卢盛晟 卢克焕
体外培养雄性新生仔猪生殖细胞,并检测其碱性磷酸酶活性及O ct-4蛋白,探讨用雄性新生仔猪生殖细胞建立干细胞系的可行性及检测方法。结果表明,雄性新生仔猪生殖细胞在BRL细胞饲养层上培养2 d,大部分生殖细胞呈碱性磷酸酶阳性(AP+),而全部呈O ct-4蛋白阴性(O ct-4-);培养1周后,生殖细胞及细胞克隆均为AP-和O ct-4-。雄性新生仔猪生殖细胞体外培养时出现2类细胞克隆,一类体积较小,数量众多,形成1周后又开始分化,仅能传至第2代;另一类细胞克隆的形态与猪原生殖细胞来源的胚胎生殖细胞(EGC)克隆相似,细胞克隆与周围细胞分界明显,而克隆中细胞相互间界限不清,这类细胞克隆易于分化,...
[期刊] 水产学报
[作者]
关柠楠 兰天 陈宇龙 刘莉芳 周芬 高泽霞
为研究鱼类骨组织细胞的特征,实验建立了团头鲂骨组织细胞的体外分离培养方法,并对其生物特性进行了鉴定。以3月龄团头鲂尾椎骨及肋骨为实验材料,利用组织块培养法和胰蛋白消化法分别进行骨组织细胞培养,确定最佳培养条件:采用组织块培养法,28°C培养,M-199培养基中加入体积分数为20%的胎牛血清、25 ng/m L表皮生长因子EGF和25 ng/m L碱性成纤维生长因子b FGF。细胞生物学特性鉴定结果显示:细胞碱性磷酸酶、钙化结节茜素红染色及矿化结节von Kossa氏法染色均呈阳性,表明所培养的细胞具有典型
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张雪萍 曾令兵 陈倩 周勇 张琳琳
采用组织块移植培养技术，对来源于青鱼（Ｍｙｌｏｐｈａｒｙｎｇｏｄｏｎ ｐｉｃｅｕｓ）的鳍条组织细胞进行原代培养，建立了青鱼鳍条组织细胞系，定名为Ｂｃ－Ｆｉｎ。青鱼鳍条组织细胞为成纤维样细胞，已稳定传代培养５０多代，其最适培养温度为２５℃，最佳培养基为ｌ－１５，最适血清浓度为１５％，在最适培养条件下，青鱼鳍条组织细胞的群体倍增时间为６０．６ ｈ。青鱼鳍条组织细胞液氮冷冻保藏６个月后，经台盼蓝染色，约（９０．０９±４．６５）％的细胞具有细胞活性，复苏后的细胞生长旺盛。细胞染色体分析显示，第１６代青鱼鳍条组织细胞的染色体数目为正常二倍体（２ｎ＝４８），第４１代细胞染色体众数为４６。通过对离体培养细胞．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
李伟 王建国 郑蒙蒙 陈小江 熊良伟 袁圣 王权
采用对传统酶消化法稍进行改进建立了中华鳑鲏皮肤细胞的分离方法,获得RSDCs株(系)以便用于后续关于中华鳑鲏体色细胞研究。结果显示,对中华鳑鲏抑菌暂养824 h后,0.25%胰酶—EDTA消化处理35 min,用手术刀片顺鳞片方向刮除鳞片,在体式显微镜下解剖获得鱼类皮肤,采用IV型胶原酶—胰酶联合消化皮肤获得单细胞;获得的RSDCs于28°C,5%CO_2条件下进行培养,采用血球计数板计数法测定绘制了RSDCs生长曲线;采用RT-PCR的方法检测RSDCs F_0、F_5和F_(10)上皮标记物(Kera
关键词：
中华鳑鲏 皮肤细胞 细胞培养 酶消化法
[期刊] 淡水渔业
[作者]
张洁明 郭峰 柳凌
作者将在水泥池中用井水暂养 4 0d后发病的日本锦鲤的鳃用波恩氏液固定 ,组织切片 ,埃利希氏 (Ehrlich’s)苏木精—暑红染色 ,在显微镜下观察鳃组织的形态特征和变化。结果显示鳃组织的间充质异常。
关键词：
环境因子 鳃 间充质
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾丽 张凤琴 孙彩霞 张永旺 赵小兵 石利东 连瑞军 梁文刚 班顺利 马晓棠
将15万粒瓦氏雅罗鱼受精卵移植到呼和浩特市"2814"项目区的盐碱池塘,以研究其在盐碱池塘环境下的养殖技术与生长速度。经过120d的养殖,其生长速度比在达里湖自然生长要快2～3倍,这为内蒙古自治区在池塘养殖上增加了一个新的优良养殖品种。
关键词：
瓦氏雅罗鱼 孵化 池塘养殖
[期刊] 中国水产科学
[作者]
王双毅 梁利群 常玉梅 孙博
为了探究瓦氏雅罗鱼(Leuciscus waleckii)极端盐碱环境下的适应机制,采用比较基因组学的研究方法,分别对来自内蒙古高盐碱湖泊达里湖(53.57mmol/L,pH9.6)和来自松花江流域的瓦氏雅罗鱼各5尾样本进行了基因组重测序,重点对两个种群全基因组水平的插入/缺失(insertion-deletion,InDels)位点进行了比较分析。测序共得到486.57 G高质量数据, 3243686532个clean reads,平均测序深度为51.34 X。序列比对后进行InDels调用共获得非冗余InDels位点983528个。种群比较分析获得差异InDels位点8176个,整合差异InDels和两个种群基因组强选择信号区域,共获得与盐碱适应相关的InDels位点325个,关联候选基因176个。富集分析显示,176个候选基因主要在离子转运、酸碱平衡和炎症免疫反应等生物学过程发挥重要作用。利用EasyCodeML、MEME和FEL3种模型,对离子转运和酸碱平衡等盐碱适应关键调控过程的候选基因abcc1、atp2b1、slc4a4、slc7a2和aqp4进行了进化分析和选择压力检测,结果显示净化选择均对候选基因起主导作用,但abcc1、atp2b1、slc4a4和slc7a2的受选择位点表现出不同程度的正向选择,并且部分位点处于关键功能结构域中。蛋白三维结构分析显示, SLC4A4和SLC7A2两个蛋白的少数位点与配体结合位点重合或非常接近,推测盐碱胁迫环境介导的正向选择压力驱动了对这些位点的选择。本研究可为瓦氏雅罗鱼盐碱适应候选基因的深入挖掘及育种新型分子标记的开发提供参考和依据。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
吴庆侠 董海龙 刘忠艳 朱洪云
为建立永生化山羊子宫内膜上皮细胞系并研究其生物学特性,将人端粒酶逆转录酶催化亚单位(Human telomerase reverse transcrip tase,hTERT)导入原代培养的山羊子宫内膜上皮细胞(Endometrium epithelial cells,EECs),经G418筛选培养,以获得一株永生化山羊子宫内膜上皮细胞(hTERT-EECs);利用流式细胞仪检测其生长周期、凋亡情况及倍体情况;利用MTT法检测其血清依赖性;软琼脂克隆形成试验检测其在半固体培养基中的克隆形成能力;裸鼠致瘤实
[期刊] 中国水产科学
[作者]
曾令兵 李晓莉 张林 徐进 张燕
采用组织块移植培养技术,对来源于斑点叉尾(Ictalurus punctatus Rafinesque)肾脏组织的细胞进行原代培养,建立了斑点叉尾肾脏组织细胞系,定名为CCK,目前已稳定传代培养70多次。斑点叉尾肾脏组织细胞为成纤维样细胞,最佳培养基为M199,最适培养温度范围为28～32℃,培养基血清体积分数为10%。在此条件下,CCK细胞的倍增时间为38.9～41.0h。斑点叉尾肾脏细胞的集落形成效率为(74.16±3.54)%,第9代传代细胞的染色体数目为正常二倍体2n=58,第33代传代细胞的染色体众数为60。液氮冷冻保存6个月后复苏的细胞经台盼兰染色检验,(86.69±1.0...
关键词：
斑点叉尾 肾脏组织 细胞系 生物学特性
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王娟 孙毅 程龙 宋孚阳 李敏 刘晓明 李勇
【目的】以滩羊胎儿皮肤组织为材料,获得符合体细胞克隆转基因基本要求的供体细胞系。【方法】取滩羊胎儿皮肤组织,采用组织块法分离培养获得滩羊胎儿成纤维细胞,观测其形态和生长情况,鉴定其性别,并对其染色体核型和红色荧光报告基因质粒(pmCherry-N1)转染等生物学特性进行研究。【结果】采用组织块法成功获得了滩羊胎儿成纤维细胞,其细胞群体倍增时间(PDT)约为48h;5代、15代、25代滩羊胎儿成纤维细胞核型分析表明,各代细胞染色体均为2n=54,未见异常;滩羊胎儿成纤维细胞的转染效率较高,约为50%,对最终获得的稳定表达红色荧光蛋白的胎儿成纤维细胞进行核型分析,结果证明遗传物质没有发生变化。【结...
关键词：
滩羊 成纤维细胞 生物学特性 体外培养
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
