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[期刊] 中国水产科学  [作者] 毛文君  林洪  管华诗  
首次对 6种琼胶寡糖的分子量 ,采用电喷雾电离质谱 (ESI -MS)进行分析测定。结果表明 ,琼胶寡糖的ESI -MS谱图非常清晰 ,能准确判断出琼胶寡糖的分子量。这些寡糖只出现 [M +Na]+ 加成离子 ,而不出现 [M + 1]+ 的准分子离子 ,且 [M +Na]+ 分子离子峰均特强 ;同时还出现一系列 [M + 2Na]+ 的加成离子。当化合物分子量大于 10 0 0时 ,则给出双电荷离子 ;当化合物分子量小于 10 0 0时 ,则ESI -MS谱出现[2M +Na]+ 的系列离子。实验结果揭示 ,所得 6种琼胶寡糖的分子量分别为 32 4、630、936、12 4 2、15 48...
[期刊] 水产学报  [作者] 毛文君  林洪  管华诗  
[期刊] 中国水产科学  [作者] 赵雪  薛长湖  徐强  许加超  李兆杰  林洪  
在不同条件下对琼胶进行酸水解,得琼胶寡糖A1(以二、四糖为主)和A2(以己糖、辛糖为主)采用化学发光法和DPPH体系分别研究A1、A2对O2·-、·OH和DPPH3种自由基的清除作用。结果表明,A1、A2对3种自由基都有较好的清除作用,而且清除活性随糖浓度的增加而加强。在O2·-体系中,A2的IC50为0.54mg/mL,效果要好于A1(IC50为0.8mg/mL)。在·OH体系中,A2对·OH的清除作用比A1效果好,IC50分别为1.2和2.3mg/mL。2个体系比较发现A1、A2对O2·-的清除作用高于对·OH的清除作用。在DPPH体系中,A1、A2对DPPH有一定的清除,但A1较A2效果...
[期刊] 水产学报  [作者] 孙闪闪  缪杭斌  朱正刚  陈海敏  朱竹君  严小军  朱鹏  
为研究不同生长阶段的坛紫菜对琼胶寡糖激发子的抗性响应差异,选择生长期为50、60、80、110和140 d的坛紫菜叶状体以及自由丝状体,检测在琼胶寡糖刺激后各生长阶段坛紫菜的H_2O_2释放,相关防御基因(PHHsP70、PHrbOH、PHsOd、PHlOx)的表达,以及挥发性物质的变化。结果显示,丝状体H_2O_2的释放量显著高于叶状体,100μg/m l琼胶寡糖可诱导不同时期坛紫菜的H_2O_2爆发。丝状体响应琼胶寡糖刺激后,4个防御相关基因出现显著上调,而叶状体各生长阶段的基因上调幅度较小,各基因变化趋势不同。挥发性物质的种类及含量在不同生长阶段不同,但C8类物质较多。经寡糖处理后,80...
[期刊] 水产学报  [作者] 杜莉  杨锐  骆其君  严小军  陈海敏  
为了研究琼胶寡糖对坛紫菜自由丝状体藻丝生长和壳孢子囊枝形成的激发的影响,实验采用琼胶寡糖激发坛紫菜自由丝状体,以液相氧电极检测坛紫菜丝状体净光合放氧速率的变化;以对羟基苯乙酸(POHPAA)化学发光法检测坛紫菜丝状体的H_2O_2释放量;利用LC-MS检测红藻糖苷含量变化;利用实时定量PCR技术检测坛紫菜丝状体H_2O_2产生相关基因(Phrboh、Ph SOD)和红藻糖苷合成相关基因(Phnho1、Phgpdh、Phtps)的表达情况;并利用显微镜观察法检测壳孢子囊枝数量的变化。结果发现,琼胶寡糖能够激发坛紫菜自由丝状体的系列响应,表现在净光合放氧速率以及光合同化产物红藻糖苷的含量和生物合成出现增加;H_2O_2释放量持续增加,与产生H_2O_2相关的2个酶基因Phrboh和Ph SOD的表达增强。此外,琼胶寡糖也能够促进在坛紫菜自由丝状体的发育,在培养第30天时,琼胶寡糖处理组的壳孢子囊枝形成率达到59%,显著高于对照组46%。综上所述,琼胶寡糖能够增加坛紫菜自由丝状体的光合速率和光合同化产物,并通过形成H_2O_2的酶的表达来诱导活性氧的释放;琼胶寡糖还能促进坛紫菜自由丝状体的繁殖发育。
[期刊] 水产学报  [作者] 朱竹君  陈海敏  骆其君  杨锐  严小军  王秀娟  何山  
研究了琼胶寡糖诱导坛紫菜氧爆发的响应及其活性氧产生的位点。用琼胶寡糖诱导坛紫菜,以微呼吸测量系统检测坛紫菜氧消耗的变化;以对羟基苯乙酸(POHPAA)化学发光法检测坛紫菜的H2O2释放量;利用DCFH-DA染色观察活性氧在细胞上的定位;并利用实时定量PCR检测坛紫菜NADPH氧化酶基因Phrboh的差异表达;通过2-AMAC标记琼胶寡糖,观察其在坛紫菜的结合部位。结果显示,100μg/mL琼胶寡糖处理坛紫菜,出现两次呼吸爆发,分别在4min和10min左右,强度分别是基础呼吸的4倍和14.1倍;5min内出现H2O2的积累,15min达到峰值,比对照组高出近10倍。10μmol/LDPI可部分...
[期刊] 水产学报  [作者] 相悦  孙承锋  李来好  杨贤庆  吴燕燕  岑剑伟  魏涯  李锐  赵永强  
花鲈贮运期间易受微生物与内源酶的联合作用,导致新鲜度及蛋白质生化特性改变,影响其食用价值。因此,采用适当的保鲜方式对花鲈贮运流通过程中的品质变化加以调控,以保证其品质安全显得尤为重要。为探究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)及琼胶寡糖(AO)对冰藏花鲈鱼片的保鲜效果,对硬度值、色差及新鲜度指标(硫代巴比妥酸值、K值、挥发性盐基氮、菌落总数、感官评分)进行测定,并对蛋白质生化特性(肌原纤维蛋白含量、二级结构、巯基、羰基含量)进行分析。结果显示,对照组在第16天时感官得分低于8,且菌落总数和K值已分别高达(6.78±0.15) lg(CFU/g)与67.37%±1.75%,不可食用,而EGCG组(EG)、琼胶寡糖组(AO)及复合组的样品仍具有较好的硬度、色泽及新鲜度。贮藏至20 d时对照组的TBA值高达(0.81±0.03) mg/kg,而EG组、AO组及复合组的TBA值在贮藏期间均未出现大幅度增加,且始终低于对照组。另外,贮藏至12 d时对照组的羰基含量已显著高于其他保鲜处理组,对照组在贮藏末期的羰基含量上升至(1.63±0.04)nmol/mg,而EG组、 AO组及复合组的羰基含量仅为(1.14±0.03)、(1.28±0.08)与(0.99±0.09) nmol/mg。贮藏末期复合组的蛋白含量、α螺旋、巯基均高于对照组和单一保鲜组。研究表明,EGCG及琼胶寡糖均能较好地维持鱼片的新鲜度,能显著抑制蛋白质变性与氧化,且二者复合后的保鲜效果优于单一保鲜剂,延长鱼片保质期至20 d以上。该研究为EGCG及琼胶寡糖的保鲜机理提供了理论基础,为开发高效的新型生物保鲜剂提供参考。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 姚喜梅  石波  刘程程  梁平  李静梅  
【目的】探索荧光辅助糖电泳(FACE)检测葡甘露寡糖组分的条件。【方法】以魔芋葡甘露寡糖为原料,对比3种荧光衍生剂的电泳分离效果,在此基础上研究分离胶浓度、衍生化反应条件及样品杂质对FACE分离效果的影响,确定FACE分析葡甘露寡糖的最佳条件。【结果】FACE分析葡甘露寡糖最佳条件是:荧光衍生剂为ANTS,分离胶浓度25%,ANTS用量2μL,衍生化反应温度37℃,衍生化反应时间16 h。【结论】FACE对葡甘露寡糖组分有很好的分离效果,使用本方法可以确定葡甘露寡糖中至少含有14种组分,为葡甘露寡糖的定性定量分析提供一种有效的检测手段。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘程程  石波  姚喜梅  梁平  李静梅  
【目的】探索实验室低成本、规模化制备单一聚合度纤维寡糖的方法,并得到聚合度分别为2—5纯度较高的单一组分纤维寡糖。【方法】采用制备型常压硅胶柱层析(Ф22 mm×900 mm),选择干法填柱、干法上样对混酸降解法制备得到的纤维寡糖进行分离纯化。采用薄层色谱法(TLC)对分离过程进行监测,用荧光辅助糖电泳(FACE)对分离后的各单一组分进行定性检测,并用电喷雾-飞行时间质谱(ESI-TOF-MS)对各单一组分进行分子质量的确认。【结果】采用制备型常压硅胶柱层析法对于聚合度在2—5的纤维寡糖具有很好的分离效果。ESI-TOF-MS法检测本试验得到的4种单一聚合度纤维寡糖分子质量(钠离子峰)分别为3...
[期刊] 华北农学报  [作者] 覃春富  孙鹏  张佩华  文静  
功能性寡糖作为新型的绿色饲料添加剂,具有广阔的应用前景。文章综述了功能性寡糖的概念、分类、结构特点以及功能性寡糖对动物免疫机能的影响及其作用机理,为下一步的研究与应用提供理论依据。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 栾晖  牟海津  罗兵  江晓路  
利用酶解法降解κ-卡拉胶,得到κ-卡拉胶寡糖(KOS)。利用甲酰胺-氯磺酸和二甲基亚砜-甲醇-吡啶方法,分别得到κ-卡拉胶寡糖磺化衍生物(SKO)和κ-卡拉胶寡糖脱硫酸基衍生物(DSK)。利用单纯疱疹病毒HSV-1研究了κ-卡拉胶寡糖硫酸基含量与抗病毒活性之间的关系,同时从对病毒的直接作用、阻止病毒对细胞的吸附和影响病毒复制与释放3个途径初步探讨了κ-卡拉胶寡糖抗疱疹病毒的机理。结果表明,KOS及SKO对Vero细胞毒性极低,对单纯疱疹病毒HSV-1无直接灭活作用,也不影响病毒的复制和释放,但是能够阻止病毒对细胞的吸附。相同浓度下,SKO对病毒吸附的抑制率要明显高于KOS,DSK对病毒则无明显...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 胡海娟  潘思轶  
为揭示柑橘果胶寡糖H1(POS_(H1))对胆固醇代谢的调控机制,采用巨噬细胞模型,基于胆固醇代谢外排、摄取与合成机制对POS_(H1)调控胆固醇代谢进行了研究。结果显示:POS_(H1)和POS_(H1)的肠道菌群发酵产物(P24)均通过显著上调肝X受体α-ATP结合盒转运体ABCA1/ABCG1通路中关键基因的蛋白表达量来促进巨噬细胞胆固醇外排。POS_(H1)对巨噬细胞胆固醇摄取相关基因的蛋白表达无显著影响,但P24却可以通过显著抑制A类清道夫受体和分化抗原簇36的蛋白表达来抑制巨噬细胞对胆固醇的摄取。POS_(H1)和P24均可通过显著抑制胆固醇合成基因3-羟基-3甲基-戊二酰辅酶A还原酶蛋白的表达来抑制巨噬细胞胆固醇的合成。研究结果表明,POS_(H1)通过促进胆固醇排出、抑制胆固醇摄取与合成调控胆固醇代谢,这是POS_(H1)调控胆固醇代谢的机制之一,且该机制与肠道菌群发酵POS_(H1)有关。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 商文静  吴云锋  赵小明  杜昱光  商鸿生  
采用ELISA-DSM法和半叶枯斑法,研究了壳寡糖诱导对普通烟(Nicotiana tabacum)体内TMV 增殖的影响。结果表明,普通烟经50μg/mL壳寡糖溶液诱导处理后,其对TMV的侵染表达了高水平的系统抗病性,显症推迟4~7 d,平均严重度降低了82.9%。ELISA-DSM法检测结果表明,壳寡糖诱导处理的普通烟植株体内病毒浓度明显降低;在接种后10 d,接种叶片OD值仅为0.400,相当于同期不诱导对照的23.0%;新生叶片OD 值为0.190,相当于同期不诱导对照的38.7%。以发病普通烟叶片为接种体,利用半叶法接种心叶烟(Nicotiana glutinosa),结果表明,壳寡...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 商文静  赵小明  杜昱光  商鸿生  
以海洋壳寡糖中科6号为试材,对寡糖类化合物抗病毒性质和抗病毒机理进行了初步研究。室内生测结果表明,烟草用50μg/mL中科6号预防处理后24h再接种烟草花叶病毒(TMV),其对由TMV引起的烟草花叶病毒病的相对防效为84.73%,显著高于对照;KI-I染色法试验结果表明,预防处理烟草半叶上的淀粉斑平均为35个,明显少于对照;叶绿素测定结果表明,50μg/mL中科6号预防处理的烟草叶绿素含量达8.67μg/g,高于发病对照和病毒A预防处理组,低于空白对照。
[期刊] 华北农学报  [作者] 康云艳  刘兵  杨暹  柴喜荣  
为探讨壳寡糖对菜薹接种立枯丝核菌后的发病率、病情相关蛋白和内源激素含量的影响。以菜心品种油青四九为材料,于菜薹形成初期叶面喷施0.4,2,8 mg/L壳寡糖预处理2 d,以喷施无菌水为对照,灌根接种立枯丝核菌。结果表明:0.4 mg/L壳寡糖处理可提高菜薹植株对立枯丝核菌的抗性,降低发病率,减少由于病害造成的产量下降。与单独接种立枯丝核菌相比,接种6 d内,0.4 mg/L壳寡糖处理可进一步增强病原菌对菜薹植株叶片中几丁质酶、β-1,3葡聚糖酶的诱导作用;接种6 d后,则显著促进内源激素吲哚乙酸(IAA)和脱落酸(ABA)的形成;接种处理期间,0.4 mg/L壳寡糖处理均显著诱导了乙烯的形成。...
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