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[期刊] 水产学报
[作者]
吴红棉 雷晓凌 洪鹏志 陈方 吴铁 艾春媚
珠母贝糖胺聚糖粗制品经吸附、等电点沉淀、醇沉、溴化十六烷基三甲铵（ＣＴＡＢ）络合等法进行分离纯化，得一糖胺聚糖级分。经醋酸纤维素薄膜电泳显示为单一区带。化学组成分析表明：该级分氨基已糖含量较高（７１．３％），其中以氨基半乳精为主（５９％），含有少量的已糖醛酸，含硫酸基、半乳糖、岩藻糖。元素分析表明其碳、氢、氮、硫的含量分别为３７．７％、５．８％、５．８％、３．０％。对级分的残余氨基酸分析表明，８４．２％氨基酸已被清除。
关键词：
马氏珠母贝 糖胺聚糖 纯化 化学性质
[期刊] 水产学报
[作者]
吴红棉 雷晓凌 洪鹏志 陈方 吴铁 艾春媚
以马氏珠母贝全脏器为原料提取、纯化后所得的珠母贝糖胺聚糖PG2 - 3- 2 ,经醋酸纤维素薄膜电泳显示其迁移率相对接近于 6 -硫酸软骨素 (C - 6 -S) ,红外光谱类似于C - 6 -S。抗肿瘤试验结果显示 :PG2 - 3- 2对体内S180肉瘤和艾氏腹水癌可显著增敏临床抗癌药的抑瘤作用 ,抑瘤率分别达 6 1.96 %与 46 .3%。并有抗凝血作用。
关键词：
马氏珠母贝 糖胺聚糖 结构 生理活性
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
刘义 钱和
糖胺聚糖在许多生物学、生理学起着重要的作用,同时由于糖胺聚糖在体内的代谢紊乱而导致了许多糖胺聚糖类疾病,已引起世界医学界的广泛关注。国内外已对糖胺聚糖进行了大量的研究,本文综述了糖胺聚糖的提取、分离方法,并展望了其发展趋势。
关键词：
糖胺聚糖 提取 分离
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王时良 朱劼 邬敏辰
采用硫酸铵盐析、Phenyl—Sepharose CL-4B疏水层析、Sephadex G-50凝胶层析和DEAE- Sepharose fast flow阴离子交换层析等分离技术,从宇佐美曲霉(Aspergillus usamii)固态培养物浸出液中分离出一种SDS—PAGE电泳纯木聚糖酶组分,其最终的收率为19．0％,纯化倍数为26．9。该木聚糖酶的相对分子质量20．7 ku,等电点pl5．0,含糖量0．42％;该酶的最适作用温度为50 C,在50 C以下较稳定;最适作用pH 5．0,在pH 5．5～9．0时较稳定;Ca2+对该酶活性有一定的激活作用,而Pb2+,Sn2+,Cu2+,Al3...
关键词：
字佐美曲霉 木聚糖酶 纯化 性质
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
刘新育 崔世修 刘艳芳 贾新成 陈红歌
【目的】从成熟的小麦籽粒中纯化小麦木聚糖酶抑制蛋白，并研究其对木聚糖酶的抑制作用，从而探明小麦中木聚糖酶抑制蛋白对外加木聚糖酶的影响。【方法】采用硫酸铵盐析、Ｍａｃｒｏ－ｐｒｅｐ ｃＭ阳离子交换层析、Ｍａｃｒｏ－ｐｒｅｐ Ｄｅａｅ阴离子交换层析以及Ｍａｃｒｏ－ｐｒｅｐ ２５Ｓ阳离子交换层析等方法，从小偃２２小麦中分离纯化木聚糖酶抑制蛋白，通过ＳＤＳ－ｐａＧｅ电泳检测木聚糖酶抑制蛋白的纯度和分子质量，并进一步研究了不同温度和反应时间对木聚糖酶抑制蛋白抑制活力的影响。【结果】小麦木聚糖酶抑制蛋白分子质量约为２９ｋｕ，Ｎ端氨基酸序列为ＳＶＳＳＶＶＳ，经ＮｃＢＩ ＢＬａＳＴ比对，该抑制蛋白Ｎ端序列与其．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
丁基喆 姜泰兴 李载昌
真菌壳聚糖酶类催化水解壳聚糖,它们在自然界的碳氮循环以及用于处理海洋食品和生产药用寡聚壳聚糖等工业上均有非常重要的意义。自1981年来,已有一些真菌源壳聚糖酶获得了纯化、明确了其特性,并作了序列分析。本文从以下3个方面阐述了真菌壳聚糖酶的近期研究进展:1)从Aspergil-lus fumigatus KH-94,Fusarium solani,Mucor rouxii A·B,Penicillum islandicum,P.spinulosum,Rhodotorula gracilis,Trichoderma reesei,A.oryzae,A.fumigatus Y2K和A.fumigat...
关键词：
壳聚糖酶 纯化 序列分析
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
王海桃 刘赛
采用人脐静脉内皮细胞株ECV304体外培养的方法,复制过氧化氢(H2O2终浓度为50μg/ml)诱导的血管内皮细胞氧化损伤模型,应用硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)的含量,采用化学比色法分别检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性、总抗氧化能力(T-AOC)、总一氧化氮合酶(T-NOS)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的活性。结果显示,与正常对照组相比,过氧化氢损伤的血管内皮细胞其GSH-PX活性、T-AOC、NO含量及T-NOS活性均明显降低(P<0.01),iNOS活性明显增加(P
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
王平平 周培根 王艳 周颖 刘文杰
壳聚糖是由氨基葡萄糖通过β-1,4键连接而成的天然线形高聚物,其在工业、农业尤其是医药、食品等领域都具有重要的应用价值。但由于壳聚糖相对分子质量大,水溶性差,其在人体内不易吸收,使其应用受到限制。而甲壳低聚糖(chitooligosaccharides)不仅水溶性好,易吸收,而且具有抗菌、抗癌以及促进双歧杆菌增殖、增强机体免疫等功能。目前制取方法常用盐酸水解壳聚糖来制备,但该法反应条
关键词：
壳聚糖酶 纯化 特性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
丁长河 江正强 李里特 李秀婷 张艳
为了进一步研究链霉菌木聚糖酶的酶学性质 ,探讨了卷须链霉菌一种木聚糖酶的纯化方法。粗酶液经硫酸铵饱和度为 2 0 %～ 5 0 %的分级沉淀和Q sephroseFF离子交换柱层析 2步纯化 ,得到一种电泳纯的木聚糖酶 ,定名为XynB ;酶蛋白纯化倍数达到 10 0倍 ,酶活力回收率达到 2 4 0 %。SDS PAGE结果表明 ,该木聚糖酶的分子质量为 2 2 0ku ,属于低分子质量的木聚糖酶。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
朱泾 赵述淼 彭楠 梁运祥
利用PCR技术从冰岛硫化叶菌(Sulfolobus islandicus)REY15A中分别扩增得到带有和不带有信号肽编码序列的β-1,4-内切葡聚糖酶基因(S.islandicus eng),将其克隆至硫化叶菌表达载体pZC2中,构建重组表达载体pZC2-eng-YS和pZC2-eng-WS,并转化至S.islandicus E233S(△pyrEF△lacS)。重组菌株经D-阿拉伯糖诱导后,细胞破碎上清经镍离子金属鳌合亲和层析介质(Ni-NTA)柱纯化,得到重组蛋白。SDS-PAGE结果表明:不带有信号肽的葡聚糖酶(ENG-W)分子质量为41ku,带有信号肽的分子质量(ENG-SP)为43...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
李燕妹 吕峰 许雅楠 汤陈鹏
采用酵母发酵结合酶法纯化石莼功能性低聚糖.以蛋白脱除率、低聚糖保留率和低聚糖含量为指标,探讨影响石莼功能性低聚糖脱蛋白、去除游离糖的主要因素,并采用U_(10)*(108)拟水平均匀试验设计优化其关键工艺参数.结果表明,酵母发酵结合酶法纯化石莼功能性低聚糖的最佳工艺条件组合为:酵母接种量7%、发酵时间4.0 h、酸性蛋白酶使用量250 U·g(-1)、酶解液pH 4.0、酶解温度45℃,同时结合150 r·min(-1)的摇床转速、30℃的发酵温度、2.5 h的酶解时间,所得纯化后的石莼功能性低聚糖样液中
关键词：
酵母发酵 酶法 纯化 石莼功能性低聚糖
[期刊] 林业科学
[作者]
殷幼平 王中康 曹月青 何正波
经丙酮沉淀、UltrogelAcA5 4凝胶过滤、Q Sepharose离子交换柱层析和聚丙烯酰胺凝胶制备电泳 ,发现桑粒肩天牛幼虫肠液中具有所有水解纤维素成分的三种消化酶 ,并且每种酶都有不同数目的同工酶。纯化出一种内切 - β- 1 ,4 -葡聚糖酶 (EG - 1 ) ,其分子量为 2 6ku ,等电点约为pI4 0。酶的最适反应温度为 4 5℃ ,最适反应pH为5 2 ;不耐热 ,5 0℃处理 30min ,酶活大大降低 ,70℃处理 2h ,几乎丧失全部活性 ,显示出该酶适合动物肠道反应环境 ,是内源性酶。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张舒平 周鹏 苏春元 江正强 闫巧娟
研究嗜热枯草芽孢杆菌壳聚糖酶基因在大肠杆菌中的克隆、表达及其重组酶的纯化和性质。该基因序列全长723bp,编码240个氨基酸。根据基因同源性分析,该壳聚糖酶与枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis 168的壳聚糖酶前体基因的同源性最高,为98%。粗酶液经Ni-IDA亲和层析得到电泳级纯酶,比活力高达1 051.8U/mg。经测定,该酶反应最适温度为45℃,最适pH为6.0,在40℃和pH 4.5～8.0下稳定。该酶为内切壳聚糖酶,能够高效降解壳聚糖,生成一系列的壳寡糖,在壳寡糖的制备生产方面具有广阔的应用前景。
关键词：
枯草芽孢杆菌 壳聚糖酶 纯化 酶学性质
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张欣 吕作舟
采用水浸法、碱浸法从香菇菌盖中提取粗多糖 ,经乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白、CTAB络合沉淀、氯化钠溶液溶解、透析 ,得到 2种多糖 :Lew(水浸物 )和Lea(碱浸物 )。经PAGE电泳、纸层析、紫外光谱分析鉴定 ,两者都为均一组分。Lew的纯度为 79.1% ,Lea为 83.2 %。改良型膜渗透压法测分子量 ,Lew的分子量为 8.31× 10 4 ;Lea为 9.4 0× 10 4 。经红外光谱分析 ,Lew、Lea具相似结构 ,但不是同一物质 ,它们具多糖的特征吸收峰 ,是 β 酸性异多糖。采用纸层析、气相色谱分析 ,检测多糖的单糖组成及其摩尔比 ,Lew为Ara∶Rha∶Xyl∶...
关键词：
香菇 菌盖 多糖 纯化 理化性质
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李立恒 谢达平 兰时乐
寄生于南方亚麻茎杆上的环状芽孢杆菌发酵产生的果胶酶和木聚糖酶经采用(NH4)_2SO_4沉淀与半透膜透析,CM-Sephadex C-50凝胶离子交换柱层析,Sephadex G-100凝胶柱层析分离纯化.经鉴定果胶裂解酶和木聚糖酶基本达电泳纯,果胶裂解酶两个亚基的相对分子质量分别为32253,27400,木聚糖酶两个亚基的相对分子质量分别为86 489,57422;果胶裂解酶和木聚糖酶最适反应温度为45℃;果胶裂解酶最适反应pH值为10.5,木聚糖酶最适反应pH值为7;对果胶裂解酶而言,K~+,Mg~(2+)有轻度的抑制作用.Fe~(2+),Cu~(2+)有强抑制作用,Ca~(2+)有一定的...
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