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[期刊] 淡水渔业  [作者] 章龙珍  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
[期刊] 水产学报  [作者] 章龙珍  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
泥鳅胚胎 (胚孔封闭期 )用 10 #玻璃化液作为低温保护剂 ,经低温 (- 196℃ )冷冻保存 17h后 ,38℃水浴解冻 ,解冻后的胚胎获得了成活。在稀释液B1、B2、B3中分别有 2 6 .7% ,15 .0 % ,3.0 %成活的胚胎。解冻后的胚孔封闭期胚胎经过 5 0h的培养 ,胚胎从胚孔封闭期发育至尾鳍出现期。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 章龙珍  刘宪亭  鲁大椿  柳凌  郭峰  张洁明  
通过不同抗冻剂组成的玻璃化液在室温和低温下对泥鳅胚胎的平衡处理,证实了抗冻剂在室温下对胚胎的渗透比在低温下迅速。不同组合的抗冻剂渗透速度不同,但对胚胎的作用均表现为使胚胎从一开始的透明状态逐步变成乳白色不透明状态,从乳白色不透明状态逐步变成透明状态,再从透明状态逐步变成乳白色不透明状态。在一定的时间范围内,更换解冻液后,这种反应呈“可逆反应”,胚胎能够成活。证明了胚胎在抗冻剂中,当第一次变成不透明时并不是真正死亡,真正的死亡是胚胎达到完全透明以后,第二次变成乳白色不透明状态。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 章龙珍  刘宪亭  鲁大椿  郭峰  张洁明  柳凌  
本文通过5种不同抗冻剂,55组不同浓度组合,筛选出11组冷冻时能形成玻璃化最低浓度的抗冻剂和10组解冻时能形成玻璃化的抗冻剂。并对11组玻璃化液在低温下的一些物理特性进行了测定。不同组合的玻璃化液其冰点和融点各不相同,最高冰点在-19.5℃,最低达-39℃。融点最高-40℃,最低-90℃。鳝鱼胚胎在5-e中心跳时间最长达30分钟,在10-c、5-e中换17号解冻液后存活最多,达89.0%以上。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 田永胜  陈松林  严安生  
用大菱鲆(Scophthalmusmaximus)神经期胚对6种抗冻剂的毒性进行检测,发现其毒性排列为:1,2-丙二醇(PG)<甲醇(MeOH)<甘油(Gly)<二甲基甲酰胺(DMF)<乙二醇(EG)<二甲亚砜(DMSO)。以DMF为主因子配制和筛选出11种玻璃化程度较好的玻璃化液,并用大菱鲆肌节期胚对其中5种玻璃化程度最好的玻璃化液进行检测,结果显示,A4(DMSO20%+DMF25%)、A7(DMSO25%+DMF20%)较适合于大菱鲆胚胎的平衡处理,利用A4和A7平衡处理神经期胚、肌节期胚、心跳期胚、出膜前期胚,结果显示大菱鲆神经胚和肌节胚对玻璃化液的适应能力较强。实验测试出不同时期胚胎...
[期刊] 海洋水产研究  [作者] 田永胜  刘本伟  陈松林  
为避免鱼类胚胎玻璃化冷冻过程中脱玻璃化现象发生,本文对冷冻过程中温度变化及解冻方法进行了研究。在室温13℃下,将含有玻璃化液FVS3的麦管直接投入到-196℃的液氮中,麦管内温度达到-196℃时,所用的时间为15.46±1.38s,降温速率为800℃/min。对玻璃化麦管在35~45℃水浴中解冻时间进行测定。结果显示,解冻所需时间在6.17~7.94s之间,麦管从-196℃升高到13℃的解冻速率为1500~2000℃/min。当水浴温度从37℃逐步升高到72℃时,对水浴表面蒸气温度的变化进行了测定,相应水温下蒸气温度从25.47℃升高到38.6℃。在麦管中加入不同浓度的玻璃化液FVS1、FVS...
[期刊] 水产学报  [作者] 田永胜  陈松林  于过才  季相山  
大菱鲆隶属于鲆科(Bothidae)、菱鲆属(Scophthalmus), 自然分布于大西洋东侧欧洲沿岸以及黑海和地中海沿岸, 是欧洲的重要养殖鱼类之一,1992年黄海水产研究所自英国引进这一鱼种,目前已在我国山东、辽宁、福建等沿海地区推广养殖,成为我国工厂化海水养殖的名贵鱼种之一。对于这一引进的新鱼种,在其胚胎和仔稚幼鱼的发育,体表色素细胞形态,卵膜对DMSO的渗透性等生物学方面进行了一定的研究,而做为一个新的鱼种资源,对其种质资源的保存研究,目前国内还未有报道。冷冻保存是长期保存鱼类种质资源和遗传多样性的有效手段,但鱼类胚胎由于体积大(直径为1-6 mm),膜通透
[期刊] 中国水产科学  [作者] 黄晓荣  庄平  章龙珍  冯广朋  刘鉴毅  张涛  赵峰  
研究了中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)4个不同发育时期胚胎对A号玻璃化液的耐受性和玻璃化冷冻保存。结果表明,不同时期的胚胎对玻璃化液的耐受能力不同,其中卵裂期胚胎对玻璃化液的耐受能力较差(20~30 min),前无节幼体期和原溞状幼体期胚胎在玻璃化液中的适应时间较长(40~60 min);随着平衡时间的延长,中华绒螯蟹各个时期的胚胎成活率逐渐下降。中华绒螯蟹前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,0.25mol/L的蔗糖分别洗脱5、10、15、20 min后,胚胎成活率无显著性差异(P>0.05)。前无节幼体期胚胎在A号玻璃化液中平衡40 min,在–196℃冷冻4...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 剧世强  赵雪璠  张妍婷  孔妍  李建珅  芮荣  
以小鼠卵丘细胞为供核细胞,猪体外成熟去核卵母细胞为受体,构建小鼠-猪种间体细胞核移植(iSCNT)胚胎,并以猪体细胞核移植(pSCNT)胚胎为对照,采用开放式拉长细管(OPS)法对所获iSCNT胚胎进行冷冻保存,研究不同冷冻保护液(ES、EFS和EDFS)及胚胎不同发育阶段(2-、4-、8-细胞)对冷冻效果的影响。结果显示:小鼠-猪iSCNT胚胎卵裂率与猪pSCNT胚胎相比无显著差异(P>0.05),但其8-细胞发育率则明显较低(28.1%对56.8%,P<0.05)。采用ES液作为冷冻保护液,iSCNT胚胎冻后存活率与EDFS组相似,但显著高于EFS组(28.6%和22.7%对9.5%,P<...
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 蒋泽平  梁珍海  汪有良  韩杰峰  
在经选育的苦楝Melia azedarach优良无性系母株上,取其腋芽茎段和顶芽作外植体进行离体培养,探讨6-苄基腺嘌呤(BA)和萘乙酸(NAA)质量浓度和配比、白砂糖质量分数、琼脂用量、培养容器和封口材料等因素对试管芽苗玻璃化产生的影响。结果表明:BA对玻璃化具有显著作用,在0.5~1.0 mg.L-1时,玻璃苗率随BA质量浓度的增加而显著上升,较高质量浓度的BA促进玻璃苗的形成,在0.75 mg.L-1BA+00.15 mg.L-1NAA时,有较高的增殖系数(4.95),芽苗生长也较为健壮;白砂糖的质量分数也显著影响玻璃化的发生,40 g.L-1的白砂糖有利控制玻璃化的发生,玻璃苗只占18...
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 刘涛  
探求层压板的玻璃化转变温度( tg) 对层压板性能的影响, 对研制开发层压板新产品和选择适用层压板制作印刷电路板有重要的理论意义和实际意义。对不同tg的层压板的耐热性、抗弯强度和热膨胀性等8 项性能进行了比较。结果表明层压板的tg 升高, 层压板的机械和电气性能明显提高。图6 表1 参2
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 黄梦雪  张文标  张晓春  余文军  李文珠  刘贤淼  戴春平  汪孙国  
利用动态机械热分析仪(DMTA)研究毛竹Phyllostachys edulis材在不同初含水率、径向部位、竹龄和高度等条件下的玻璃化转变温度(Tg)并分析其变化规律,旨在为竹材的软化和展平提供理论依据。结果表明:1在温度50.0~250.0℃范围,随初含水率增加(0%,15%,30%,60%和饱水),毛竹材的玻璃化转变温度显著降低,从绝干材的217.3℃降低到饱水材的113.0℃,毛竹材在较低含水率(15%)范围内变化对毛竹材的玻璃化转变温度影响更明显,表明提高毛竹材初含水率对竹材软化有益。2在相同竹龄、初含水率和高度条件下的毛竹材沿竹壁径向的竹青、竹肉和竹黄的...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 刘本伟  陈松林  田永胜  孔晓瑜  王春花  
以牙鲆(Paralichthys olivaceus)不同发育期胚胎为实验材料,研究了7种渗透性和5种非渗透性抗冻剂对牙鲆尾芽期和心跳期胚胎的毒性,同时对玻璃化液在不同胚胎发育期的毒性作用,以及玻璃化颗粒冷冻过程中,冷冻颗粒降温和解冻的时间进行了研究。结果表明,单一渗透性抗冻剂对牙鲆胚胎的毒性随着抗冻剂浓度的升高、平衡时间的延长而提高,其毒性由大到小依次为乙二醇(EG)、酒精(EtOH)、甘油(Gly)、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲基亚砜(DMSO)、甲醇(MeOH)、1,2-丙二醇(PG)。非渗透性抗冻剂中聚乙烯吡咯酮(PVP)对牙鲆尾芽期胚胎的毒性最强,其次是蔗糖和D果糖,葡聚糖和葡萄糖毒...
[期刊] 淡水渔业  [作者] 王永玲  杨彩根  蔡春芳  吴萍  
将泥鳅卵放入不同浓度的稀土溶液中进行孵化 ,观察胚胎发育状况 ,结果表明 :稀土浓度为2 5mg/L时 ,泥鳅胚胎发育时间最短 ,为 2 4 30h ,稀土浓度为 1 5mg/L时 ,孵化率最高 ,为 84 %。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 张玲玲  任瑞芬  姜雪茹  周好  刘燕  
【目的】为探究乙烯对PLBs超低温保存存活率的影响,以期为提高其存活率开拓思路。【方法】以春石斛‘红梦幻’类原球茎(PLBs)为材料,分别在其玻璃化超低温保存的预培养和装载阶段添加外源乙烯供体乙烯利和乙烯合成抑制剂硝酸钴,测定PLBs超低温保存过程中内源乙烯前体1-氨基环丙烷羧酸(ACC)含量、ACC氧化酶(ACO)活性及PLBs液氮保存后细胞存活率。【结果】结果显示:无论在预培养还是装载阶段,外源乙烯供体乙烯利处理后,超低温保存过程中PLBs内源ACC含量和ACO活性均显著提高,同时液氮保存后存活率也显著提高;在这两个阶段添加外源乙烯合成抑制剂硝酸钴后,超低温保存过程中PLBs内源ACC含量、ACO活性显著降低,液氮保存后存活率也显著降低。相关分析显示,PLBs液氮冻后存活率与其内源ACC含量和ACO活性呈极显著正相关。【结论】本研究表明,外源乙烯调节剂乙烯利和硝酸钴通过调节内源乙烯含量而对玻璃化超低温保存的春石斛类原球茎存活率产生显著影响。
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