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[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
孙骞 胡鑫 罗永康 刘昌蓉 白涛
为建立猪血红蛋白抗氧化活性肽的酶法制备工艺,采用6种食品级商业蛋白酶Alcalase 2.4L、胰蛋白酶、风味蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶和AS1398中性蛋白酶在各自最适反应条件下分别酶解猪血红蛋白8 h,结果显示:采用AS1398中性蛋白酶获得的产物水解度最高,其酶解过程中第2小时获得的抗氧化活性肽(NDAPⅡ)还原力最高,较猪血红蛋白还原力高31.8%;AS1398中性蛋白酶的酶解条件为底物5%(质量分数),底物中含酶400U/g,温度45℃,pH 7.0。NDAPⅡ的还原力随浓度的增加基本呈线性增长趋势,虽然在低浓度下其还原力较阳性对照物BHT及VC弱,但在40 mg/mL质量浓度条件...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
宗绪岩 刘长江 李丽 刘玲
为了更好地了解和研究啤酒糟蛋白的酶水解特性,选取了4种微生物蛋白酶(Alcalase、Flavourzyme、Neutrase和Protamex)对啤酒糟蛋白进行水解试验,并监测反应过程中水解度的变化和中间产物的还原力改变。结果表明:Alcalase的水解啤酒糟蛋白能力最强,在水解接近3h时基本达到DHmax。水解度的变化同还原力的变化并不完全符合对应关系,在接近DHmax时,还原力的变化随着水解的进行波动很大,还原力的极值点也基本都出现在水解度曲线的拐点附近,说明抗氧化活力同水解度的变化并不完全符合对应关系。
关键词：
啤酒糟 蛋白 蛋白酶 水解度 还原力
[期刊] 水产学报
[作者]
杨帆 栗丽 陈荫 王斌 王加斌
以孔鳐软骨为材料,采用盐酸胍抽提、丙酮分级沉淀,制备孔鳐软骨蛋白;以DPPH·和HO·清除活性为导向,采用胰蛋白酶酶解、膜超滤、DEAE-52阴离子交换层析、Sephadex G-15凝胶层析和反相高效液相色谱(RP-HPLC)等技术,制备抗氧化肽,并对其活性进行系统评价。结果显示,孔鳐软骨蛋白经胰蛋白酶酶解和分离纯化得到2个抗氧化肽RCPE-A和RCPE-B,经氨基酸序列分析确定其序列分别为Gly-Glu-Glu-Gly-ProArg-Gly (GEEGPRG)和Gly-Glu-Glu-Gly-Thr-Met-Gly-Leu (GEEGTMGL),质谱(ESI-MS)测定其分子量分别为700.71和792.87 u。体外自由基清除实验结果显示,RCPE-A与RCPE-B对DPPH·(EC50 2.94和1.16 mg/mL)、HO·(EC_(50) 0.34和0.54 mg/mL)、ABTS~+·(EC_(50) 0.34和0.10mg/mL)和O_2~-·(EC_(50) 0.11和0.03 mg/mL)具有良好的清除作用,RCPE-A与RCPE-B亦显示出较强的脂质过氧化抑制作用。研究表明,孔鳐软骨蛋白酶解物及制备多肽可用于抗氧化相关的功能食品开发,也可以用作抗氧化剂延长相关产品的货架期。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
周亚迪 汪之颖 姚旻晶 范鸿冰 洪惠 罗永康
为系统考察酶解时间、酶种类和酶加入的顺序对猪血浆蛋白酶解产物抗氧化性的影响,采用风味蛋白酶、碱性蛋白酶及双酶(风味蛋白酶,碱性蛋白酶不同的加入顺序)在各自最适条件下对猪血浆蛋白进行酶解,并研究酶解产物的功能特性。结果表明:0~120min内,随着酶解时间的延长,水解度升高,各酶解产物的抗氧化性均有所增强;60~180min内,双酶酶解产物的清除DPPH自由基的能力、亚铁离子螯合能力和还原力显著高于单酶酶解产物(P<0.05);90~150min内,先加碱性蛋白酶后加入风味蛋白酶酶解的酶解产物的水解度、清除DPPH自由基能力和还原力显著高于先加风味蛋白酶酶解后加入碱性蛋白酶酶解的酶解产物(P<0...
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
张元元 汪之和 陈敏 施文正
本文研究了３种不同的蛋白酶（木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶）分别水解南极磷虾得到多肽的体外抗氧化活性，以清除超氧阴离子、羟自由基和ＤＰＰＨ的能力为指标。结果表明，木瓜蛋白酶水解制备的多肽抗氧化活性比较好，其次是碱性蛋白酶。用响应面法优化木瓜蛋白酶水解南极磷虾制备多肽的工艺参数，经凝胶电泳测定其分子量，显示该多肽有３个明显条带，其分子量大多位于３～７ ｋｕ。将上述多肽溶液脱氟后经超滤系统分离，按分子量（ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｗｅｉｇＨｔ，ｍｗ）大小分为ｍｗ≥１０ ｋｕ，５～１０ ｋｕ，ｍｗ≤５ ｋｕ的３种多肽，并比较其抗氧化活性的强度。在本实验体系浓度范围内，３种不同分子量的多肽对超氧阴离子、羟．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
陈思远 刘永祥 曹小舟 张逸婧 陈海娟 沈新春
【目的】探究能有效地从小麦胚芽清蛋白二步双酶酶解物中分离得到高活性抗氧化肽的工艺。【方法】以小麦胚芽清蛋白为原料，ＤＰＰＨ自由基清除率和Ｆｅ～（２＋）螯合能力为抗氧化活性的评价指标，通过胰蛋白酶进行酶解，依次采用超滤膜和凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－７５）对酶解产物进行分离纯化，筛选出活性较高的组分；采用碱性蛋白酶对获得的活性较高组分进行酶解，通过凝胶过滤色谱（ＳｅＰＨａＤｅｘ Ｇ－１５）和反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）分离纯化其酶解产物；采用质谱技术（ｅＳＩ－ＴＯＦ ＭＳ／ＭＳ）对抗氧化活性最高的组分进行结构鉴定。【结果】分离得到３个活性组分（峰）Ｐ＿ａ、Ｐ＿ｂ、Ｐ＿Ｃ，采用ＤＰＰ．．．
[期刊] 水产学报
[作者]
向泽敏 邱晓挺 娄永江 严小军
为有效提高鲣鳔蛋白的附加值,研究以DPPH自由基清除率为抗氧化活性评价指标,采用蛋白酶酶解制备活性多肽的工艺,选用菠萝蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶7种酶在各自最适的条件下酶解,筛选出复合蛋白酶为最适用酶,通过单因素实验分别研究加酶量、溶液初始p H、酶解温度和时间对酶解物抗氧化活性的影响,在此基础上,根据响应面法优化鲣鳔抗氧化酶解物的制备工艺。结果显示,最佳酶解工艺条件为加酶量8.53 U/mg,p H 5.54,温度50.03°C,时间5.07 h。此外,利
关键词：
鲣 鳔 酶解 抗氧化活性 响应面法
[期刊] 中国农业科学
[作者]
方勇 杨方美 赵殿峰 杨文建 赵立艳 辛志宏 马宁 施瑛 胡秋辉
【目的】研究木瓜蛋白酶对条斑紫菜R-藻红蛋白的抗氧化性和肿瘤增殖抑制活性的影响。【方法】采用超声波破壁法提取条斑紫菜R-藻红蛋白,用DEAE柱层析法纯化后进行木瓜蛋白酶酶解,通过正交试验设计,以还原力A700为考察指标确定酶解反应的最佳工艺参数,进一步测定获得的R-藻红蛋白及其酶解物的还原力、清除羟自由基能力和对人肉瘤细胞U2O及人肝癌细胞HepG-2的肿瘤增殖抑制活性。【结果】R-藻红蛋白的最佳酶解工艺条件为:木瓜蛋白酶添加量25 000 U.g-1,pH 7.0,温度50℃,酶解时间4 h。在此条件下,R-藻红蛋白酶解物还原力为0.573,较未酶解的R-藻红蛋白提高了2.35倍;清除羟自由...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
德力格尔桑 韩杰 玛丽娜 乌兰塔娜
探索蒙古绵羊脾蛋白的最佳酶解条件,确定最具抗氧化活性的脾肽及其分子质量。将不同饱和度硫酸铵沉淀制得的脾蛋白分别经胰蛋白酶、木瓜蛋白酶及二者混合物(质量比1∶1,下称酶混合物)水解制得脾肽,经G-25柱层析分离后,电泳确定脾肽分子质量。分别在非脂质的DPPH.和.OH体系,及脂质的卵磷脂和猪油体系中对制得的脾肽进行体外抗氧化活性试验,结果表明:60℃,pH7.0,酶混合物添加量5.0%(质量分数),5.5 h为最佳酶解条件。饱和度为60%的硫酸铵沉淀制得的脾蛋白电泳条带最多,此脾蛋白经酶混合物水解后,柱层析分离得到F1、F2、F3、F44个峰区,其中F3(分子质量6 ku)的脾肽在非脂质体系中清...
关键词：
脾脏蛋白 酶水解 脾脏多肽 体外抗氧化
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
胡润锋 李浚哲 李鹏飞 周军 李湘洲
【目的】优化硒化桑叶多糖的制备工艺，获得抗氧化活性更高的硒化桑叶多糖。【方法】以硒含量为指标，利用HNO_3-Na_2SeO_3法对桑叶多糖（MLP）进行硒化修饰制备硒化桑叶多糖（MLP-Se），单因素实验分别考察Na_2SeO_3与MLP的质量比、HNO_3体积分数、反应温度和反应时间对制备的MLP-Se中硒含量的影响，进一步利用响应面法优化MLP-Se的制备工艺。对MLP和MLP-Se进行扫描电镜-能谱（SEM-EDS）分析、凝胶色谱（GPC）分析、粒径和zeta电位分析、红外光谱（FT-IR）分析，探究硒化改性对桑叶多糖结构的影响，最后还研究了MLP和MLP-Se的体外抗氧化活性。【结果】制备MLP-Se的最佳工艺条件为反应时间7 h、反应温度85℃、HNO_3体积分数0.54%、Na_2SeO_3与MLP的质量比1.27，此条件下制备的MLP-Se中硒含量为3.147 mg·g~(-1)，建立的响应面模型可用于分析预测MLP-Se的制备；SEM-EDS分析表明硒化修饰改变了MLP的表观形貌且MLP-Se中存在硒元素；GPC分析表明MLP和MLP-Se的相对分子质量分别为2.099×10~3和2.385×10~3 k Da，硒化修饰增大了MLP的分子量；硒化修饰后桑叶多糖的粒径减小，zeta电位绝对值增大，硒化修饰提高了MLP在溶液体系中稳定性；FT-IR分析表明MLP已被成功硒化，且硒与多糖是通过C-O-Se和Se=O结合；体外抗氧化活性分析表明硒化修饰可以提高MLP的抗氧化能力，MLP-Se对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)值分别为0.883和0.681 mg·g~(-1)，明显低于MLP对DPPH自由基和ABTS自由基的IC_(50)值2.157和1.792 mg·g~(-1)(P<0.05）。【结论】硒化修饰可以改良MLP的理化性质，提高MLP的抗氧化能力，研究有利于桑叶多糖在功能性食品、保健品和药物等领域的开发利用。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄明 王璐莎
氧化不仅影响食品的质量而且危害人体健康,因此抗氧化一直是生命科学领域的研究热点之一。动物蛋白源抗氧化肽在食品和生物体中表现出了有效的抗氧化活性(如清除自由基、抑制油脂氧化和螯合金属离子等);当它作为功能性原料时还具有增强人体健康的作用,因此动物蛋白源抗氧化肽被认为是一种安全的抗氧化物质,得到越来越多的关注。文中介绍了动物蛋白源抗氧化肽的研究状况,阐述了影响抗氧化肽抗氧化能力的因子和抗氧化能力的测定方法,并预测了抗氧化肽的应用前景与面临的挑战。
关键词：
动物蛋白 抗氧化肽 影响因子 抗氧化活性
[期刊] 中国水产科学
[作者]
牛瑞 孙谧 于建生 郑媛 王海英
以扇贝(Chlamys farreri)裙边为研究对象,通过海洋碱性蛋白酶水解获得抗氧化肽。研究酶解温度、pH值、固液比、加酶量、酶解时间对酶解效果的影响。在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,采用L16(45)正交试验,根据Box-Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,对酶解条件进行优化研究。结果表明,最佳酶解条件为:固液比1:3.26(m/V),加酶量0.44%(W/V),温度31.20℃,pH值为9.0,酶解时间为1 h,羟自由基清除率为83.78%,与预测值的相对误差为0.29%,理论值与预测值基本一致,预测模型能较好地反映实际情况。本研究旨在为今后扇贝裙边蛋白的开发...
关键词：
扇贝裙边 抗氧化肽 酶解 响应面分析
[期刊] 水产学报
[作者]
曾名湧 郭瑶 刘尊英 董士远 赵元晖 崔文萱
采用菠萝蛋白酶和Alcalase酶依次对尼罗罗非鱼皮胶原进行复合酶解。研究了该酶解产物的体外抗氧化活性。实验表明,该酶解产物具有较强的超氧阴离子/羟基自由基清除活性和还原能力。采用不同截留分子量的超滤膜将该酶解物分离成5个组分,即TGH-Ⅰ(>10ku),TGH-Ⅱ(10~5 ku),TGH-Ⅲ(5~3 ku),TGH-Ⅳ(3~1 ku)和TGH-Ⅴ(10 ku)。其中TGH-Ⅴ组分显示出最强的超氧阴离子自由基清除活性,因此采用凝胶过滤、离子交换和反向高压液相色谱技术对该组分进一步分离纯化。纯化得到的肽具有很强的超氧阴离子自由基清除活性,其IC50值为4.6μg.mL-1。通过质谱分析可知,该...
关键词：
尼罗罗非鱼 胶原蛋白 酶解 游离基清除肽
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
张翀 李致瑜 田玉庭 郑宝东
以大黄鱼为原料,采用不同蛋白酶(碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶和复合蛋白酶)分别水解鱼肉,制备抗氧化肽;研究不同酶的水解效果,筛选出最佳的水解用酶;采用单因素试验,以蛋白水解度及水解液的还原力和超氧阴离子自由基(O-·2)清除力为指标,研究不同水解p H、酶添加量、水解温度、底物浓度和水解时间对水解效果的影响;在此基础上,采用Box-Behnken响应面设计法,以水解液的还原力为评价指标,对水解工艺参数进行优化.结果表明,中性蛋白酶为水解大黄鱼的最适用酶,其最佳工艺条件为:底物浓度26.55%、水解温度46℃、水解时间7.2 h、p H 7.0、酶添加量2400 U·g...
关键词：
大黄鱼 水解 抗氧化能力 响应面优化
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
陈艳 吕春茂 韩金晶 刘璐 付沁璇 徐嘉一
为选出最佳的水解蛋白酶,选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶3种蛋白酶水解榛子粕蛋白,研究单一蛋白酶和复合蛋白酶水解产物的水解度、DPPH自由基清除能力和氨基酸含量,对榛子粕抗氧化肽制备工艺进行优化,分析体外模拟消化前后榛子粕抗氧化肽DPPH自由基清除能力和氨基酸含量的变化。结果表明:木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和中性蛋白酶水解产物水解度分别为2.89%,6.26%,9.50%。1N复合蛋白酶水解产物、1A复合蛋白酶水解产物、2NA复合蛋白酶水解产物和2AN复合蛋白酶水解产物水解度分别为6.31%,7.20%
关键词：
榛子粕 蛋白酶 抗氧化肽 氨基酸
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