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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
袁晨 张恩 王佳璐 黄璐璐 杨倩
[目的]本试验旨在建立体外分离猪肠黏膜派尔集合淋巴结(Peyer’s patch,PP)中树突状细胞(dendritic cell,DC)的方法。[方法]应用密度梯度离心的方法获得单个核细胞,然后分别采用免疫磁珠法、流式细胞术根据细胞表面标志MHC-Ⅱ和SWC3a分选猪肠黏膜PP结DC,并进行DC形态学和免疫学性质鉴定。[结果]磁珠分选(magnetic cell sorting,MACS)富集SWC3a+细胞纯度达90.2%,而SWC3a+/MHC-Ⅱ+细胞纯度达50.5%。流式细胞术分选猪肠黏膜PP结中SWC3a+/MHC-Ⅱ+DC纯度高达95.6%,将该DC培养2 d后,细胞有聚集现象,细胞表面不规则,略有突起,具有刺激同种异体淋巴细胞增殖的能力。[结论]成功建立了体外分离猪肠黏膜PP结中DC的方法,分离到的DC具有体内DC的生物学特性,为进一步研究猪肠黏膜PP结中DC的功能奠定了基础。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
周传丽 刘铮铸 俞英 张勤
【目的】阐明产肠毒素大肠杆菌F18(ETEC F18)引发仔猪腹泻的机理,针对其候选基因FUT1的CDS区第307位点处的突变(G→A),建立3个仔猪小肠黏膜上皮细胞系(GG、GA和AA)。【方法】首先以胎鼠和仔猪为试验材料,确定小肠上皮细胞的最佳分离方法。采用XI型胶原酶和I型中性蛋白酶的联酶混合液,将胎鼠小肠组织机械剪碎后用联酶进行消化和直接将联酶灌注到仔猪小肠腔内消化的两种方法进行比较。针对仔猪小肠黏膜上皮细胞体外培养过程中成纤维细胞污染难以消除的问题,本研究采用局部画圈法逐步去除成纤维细胞。最后,用电镜和CK18免疫荧光染色对纯化后的原代仔猪小肠黏膜上皮细胞进行鉴定。【结果】两种小肠上...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
申育萌 赵姗姗 杨倩
本试验选用MHCⅡ、CD11b和CD16三种猪树突状细胞(DC)的抗体,对10头2月龄的杜长大三元杂交猪咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体中的DC进行标记,应用荧光显微镜和激光共聚焦显微镜技术对分布于猪扁桃体内的DC进行观察和分析。结果发现:猪咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体黏膜下固有层和淋巴滤泡内的DC可共表达CD11b与CD16或CD11b与MHCⅡ分子。咽鼓管扁桃体和软腭扁桃体黏膜下固有层中双阳性DC数量大约是淋巴滤泡双阳性DC数量的3倍。正常状态下双阳性DC在扁桃体上皮细胞间分布较少,咽鼓管扁桃体上皮细胞间几乎没有分布。单阳性CD11b+DC多分布于咽鼓管上皮细胞下方,仅有少量的CD11b+DC可向上皮...
关键词：
猪 咽鼓管扁桃体 软腭扁桃体 树突状细胞
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨倩
在研究富含淋巴细胞的肠绒毛形成过程中观察了大量的猪小肠和子宫黏膜组织切片 ,发现小肠和子宫黏膜上皮内的淋巴细胞实际上就是来源于固有膜中的淋巴细胞 ,并能通过小肠上皮迁移到腔中 ,作者暂时称之为“腔排”现象。
关键词：
猪 黏膜上皮 淋巴细胞 “腔排”
[期刊] 水产学报
[作者]
陈孝煊 李思思 周成翀 吴志新
树突状细胞(DCs)是目前已知的体内功能最强的抗原递呈细胞,是唯一能够激活初始T淋巴细胞反应的细胞,在先天性免疫、适应性免疫以及维持自身免疫耐受方面具有重要的作用,因此一直是免疫学研究的重要领域。本文简要综述了DCs的类型及其在动物体内的功能、各类DCs的细胞标记。总结了鱼类DCs的分离、纯化方法和形态学观察方法;现有研究表明,鱼类DCs具有吞噬细菌、刺激T细胞增殖、诱导CD4+T细胞的活化、表达DCs的标记基因、被Toll样受体的配体激活、迁移能力、引起混合淋巴细胞反应等生物学功能;不同鱼类DCs的分子标记并不完全一样;鱼类的头肾、肾、鳃、皮肤、胸腺、脾、肠等均有DCs的分布。目前,对鱼类DCs的研究虽然取得了一定进展,但仍有许多重要问题需要解决:①鱼类DCs目前缺乏明确的细胞标记,加强这方面的研究有助于提高鱼类DCs的分离、体内分布与功能的研究水平;②加强和完善鱼类DCs的分离、培养技术的研究,掌握各种鱼类DCs的分离培养方法;③加强鱼类DCs在抗原递呈中的功能研究,对深入分析鱼类免疫机理,合理设计和应用疫苗,具有重要的理论指导意义。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
邢亚丽 宋慧 姜云瑶 牛姝力 丁国栋 尚红梅
为研究肉鸡日粮中添加树舌发酵浸膏多糖(Polysaccharides from the fermentation concentrate of Ganoderma applanatum(Pers.ex Gray.),GAP)对肉鸡肠黏膜结构及上皮内淋巴细胞和杯状细胞数量的影响,选用1日龄健康AA肉鸡225只,随机分成5个处理组,每组3次重复,每次重复15只。5个处理组分别为空白对照组(基础日粮)、抗生素阳性对照组(基础日粮+5mg/kg黄霉素)和3个GAP组(基础日粮中分别添加0.05%、0.10%和0.20%GAP),试验期42d。结果表明:1)与对照组相比,日粮中添加0.10%和0.20%...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
乔文娜 王培永 李翔 马志禹 苏娟 雷治海
[目的]本文旨在探讨不同浓度神经介素U(NMU)对外周血单核源树突细胞(DC)刺激T淋巴细胞增殖和相关细胞因子分泌的影响。[方法]采集小梅山猪外周血,用集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4联合诱导外周血单核细胞形成未成熟树突细胞,再加入脂多糖(LPS)刺激获得成熟的树突细胞,同时观察DC形态。加入不同浓度(0.01、0.1、1、10、100、1 000 nmol·L(-1))NMU并分别培养2、4、8和12 h后,收集细胞上清液,用ELISA法测定IL-4、IL-5和IL(-1)3的浓度。加入不同浓度(
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
付佳 梁金逢 阴银燕 杨倩
为建立鸡骨髓源树突状细胞(DC,dendritic cells)体外培养方法,用重组鸡粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rGM-CSF)和重组鸡白细胞介素4(rIL-4)体外诱导鸡骨髓细胞分化为DC,然后通过形态观察、表型鉴定及功能分析来初步鉴定所培养的DC。试验结果表明:培养7 d后,光学显微镜下观察到细胞表面不规则,有显著的树突状突起,呈典型的DC形态,流式细胞仪测得细胞表面CD11c和MHCⅡ分子的表达量分别为69.3%和63.0%。经脂多糖或CpG-ODN刺激24 h后的DC,其表面成熟分子标志CD40和CD86上调表达,同时其刺激同种异体T细胞增殖的能力显著增强(P<0.01)。结论:本...
关键词：
树突状细胞 体外培养 鉴定
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张芮琪 罗启慧 陈正礼
【目的】制备硫酸化黄芪多糖（Ｓｕｌｆａｔｅｄ ａＳｔｒａｇａｌｕＳ ｐｏｌｙＳａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＳａｐＳ），研究其对雏鸡十二指肠组织发育及黏膜免疫相关细胞分布的影响。【方法】采用氯磺酸－吡啶法对黄芪多糖（ａＳｔｒａｇａｌｕＳ ｐｏｌｙＳａｃｃｈａｒｉｄ，ａｐＳ）进行硫酸化修饰，制备ＳａｐＳ，氯化钡－明胶浊度法测定ＳａｐＳ中硫含量，并计算ＳａｐＳ的硫酸基取代度。运用组织学制片技术和染色方法分别观察ａｐＳ及ＳａｐＳ干预后７ｄ和１４ｄ鸡十二指肠的组织学特点，对肠壁黏膜层上皮内淋巴细胞（ｉｎｔｒａｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｌｙｍｐｈｏｃｙｔｅＳ，ｉｅｌ）、柱状上皮细胞间杯状细胞（ｇｏｂｌｅｔ ｃｅｌｌＳ．．．
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
杨玉荣 姜义宝 郑世民 马春全
为了观察益生素对雏鸡肠道黏膜免疫的影响,将60只雏鸡随机分为益生素组和对照组,分别在灌服益生素后1,4,7,10和18 d,采集肠液、十二指肠派伊尔结和盲肠扁桃体,观测肠道黏膜抗体生成细胞数量、T细胞数量和肠液免疫球蛋白相对含量的变化,并在服用益生素后4 d对盲肠扁桃体的超微结构进行了常规透射电镜及扫描电镜观察。结果表明,在服用益生素后7 d,雏鸡肠液的IgA高于未服用益生素的对照雏鸡(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
贺俊平 董常生 游蓉丽 谢建山
【目的】研究转录因子c-Fos与凋亡相关蛋白Caspase3在羊驼小肠黏膜淋巴组织的表达,探索c-Fos与羊驼小肠黏膜淋巴细胞生发中心的关系。【方法】用免疫组织化学技术研究c-Fos蛋白与Caspase3蛋白在羊驼十二指肠和空肠淋巴组织的表达。【结果】免疫组织化学结果显示羊驼十二指肠黏膜淋巴细胞较少,c-Fos蛋白主要表达于空肠黏膜下淋巴组织生发中心,在黏膜下淋巴组织向固有层淋巴组织过渡区域有散在表达,在固有层弥散淋巴组织中c-Fos阳性表达细胞较少。Caspase3蛋白主要表达于空肠黏膜固有层淋巴组织,在黏膜下淋巴组织生发中心很少表达,在黏膜下淋巴组织向固有层弥散淋巴组织过渡区域Caspas...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
余剑
针对传统人工免疫网络安全模型在对异常检测中的弊端,首先定义了危险理论树突状细胞在网络安全模型中的表示形式,并提出了一种新的抗原识别和抗原提呈算法来解决该弊端。结果表明:该算法可以大大降低入侵检测系统的误报率和提高检测率,该模型不仅对建立计算机安全系统具有重要的理论意义,并能应用在农业病虫害预测和水文气象监测中建立实时监测模型。
关键词：
人工免疫 危险理论 树突状细胞算法
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
吴曙光 刘霞 王明镇 詹新义 周谷于 钱宁
【目的】观察、比较分析老龄贵州小型猪胃内分泌细胞的形态、数量和分布。【方法】采集老龄和青年贵州小型猪的胃,取胃的不同部位(贲门、胃体、胃窦),用免疫组织化学染色法分别对老龄和青年贵州小型猪胃黏膜中的5-羟色胺(5-HT)、生长抑素(SS)细胞染色,在400倍视野中观察其形态及分布,并进行计数,比较老龄与青年贵州小型猪胃黏膜的差异。【结果】老龄和青年贵州小型猪胃黏膜中的5-HT-IR、SS-IR阳性细胞呈锥形、圆形、卵圆形等多种形态;分布不均匀,分别主要分布于胃腺的体部、底部或黏膜表面上皮细胞之间。老龄贵州小型猪胃窦5-HT-IR阳性细胞数较贲门极显著增加(P<0.01),胃体较贲门显著增加(P...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
孙裴 杨榕 顾超逸 张彦明 张琛 魏建忠 李郁 王桂军
【目的】研究IBV感染鸡气管黏膜上皮细胞(Chicken trachea epithelium cells,CTECs)中基底细胞的特性,以进一步揭示IBV感染与α-2,3-唾液酸受体之间的关系。【方法】利用光学显微镜观察、电子显微镜技术、RTPCR方法,对接种IBV的细胞进行观察和检测,研究IBV对基底细胞的感染特征。【结果】与CTECs感染IBV结果相反,单独培养的基底细胞接种IBV后,无明显的形态学损伤和亚细胞结构(溶酶体、细胞核)的损伤,细胞中也检测不到IBV的增殖。【结论】气管黏膜上皮细胞可以被IBV感染,单独的基底细胞不能被IBV感染,提示α-2,3-唾液酸受体是否存在与IBV感染...
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