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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 李仕新  李加琪  田允波  陈赞谋  古飞霞  
【目的】研究猪肌肉组织中猪载脂蛋白E(Apolipoprotein E,ApoE)基因5′调控区的DNA甲基化状况。【方法】以180日龄长白母猪为试验动物,采集其肌肉组织,提取其DNA,经亚硫酸氢盐修饰后用作PCR反应模板;通过生物信息学预测猪ApoE5′调控区潜在的CpG岛,根据预测结果选用甲基化特异性引物对CpG岛进行PCR扩增,对回收、纯化的PCR产物进行克隆和测序,并与GenBank中的ApoE5′调控区序列进行比对,分析CpG岛的甲基化水平。【结果】生物信息学预测发现,猪ApoE基因5′调控区有2个CpG岛,第1个CpG岛有10个CpG位点,第2个CpG岛有12个CpG位点;PCR扩...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 梁秋菊  刘丽娜  彭健  孙智达  蒋思文  
【目的】测定纯种大白猪(LW)、长白猪(L)、梅山猪(M)及其LW×L、L×LW、LW×M和M×LW等杂种猪血液和肌肉组织DNA甲基化含量,比较亲本与杂种DNA甲基化含量的差异,为揭示杂种优势的分子机制提供依据。【方法】采用高效液相色谱法测定血液和肌肉组织中甲基化含量。【结果】163份肌肉组织DNA样平均甲基化含量为16.92%,182份血液样平均甲基化含量为6.49%,两者之间差异达到了极显著水平(P<0.01),血液中DNA甲基化含量均低于10%,L×LW杂交猪最高,达到了9.93%,而长白猪最低,仅为2.97%;大白猪和长白猪之间差异极显著(P<0.01),而大白猪和梅山猪之间差异不显著...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 鲍建军  苏锐  王庆增  吕晓阳  高雯  于嘉瑞  王利宏  陈玲  吴文忠  盛水兴  周洪  孙伟  戴国俊  
【目的】通过在m RNA表达水平检测TGF-β/smAd信号通路基因在湖羊肌肉组织中时空表达,来探究各基因的表达规律及内在联系。【方法】利用荧光定量PCR技术对湖羊smAds基因在出生后不同生长阶段(2日龄,2月龄和6月龄)不同性别的两种不同骨骼肌(腓肠肌、趾长伸肌)的相对表达进行分析,以及对湖羊smAd家族(smAd2、smAd3、smAd4、smAd7)基因、YAP1基因的表达相关性分析。【结果】湖羊肌肉TGF-β/smAd信号通路中smAds基因时空表达规律研究发现:smAds在不同肌肉组织的表达分析中,smAds在腓肠肌中的表达高于趾长伸肌,可能与这两种骨骼肌分属不同部位有关;smAd...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 赵保平  杨金增  
本文用20头猪的肌肉样品研究了肌肉组织中丙酮酸激酶(PK)、磷酸果糖激酶(PFK)、乳酸脱氢酶(LDH)和PSE肌肉的相关性。结果表明:屠宰后45min采取的肌肉中PK和PFK活性在正常肌肉和PSE肌肉之间差异极显著(P<0.01)。并且PK与常规肉质指标pH值、系水力和光反射值存在显著相关性(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 郝称莉  李齐发  乔永  刘振山  邵丹青  李伟华  林建良  吴福荣  沈补根  谢庄  
【目的】研究湖羊不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因mRNA的发育变化规律,结合屠宰试验分析H-FABP和PPARγ基因mRNA表达水平对肌内脂肪沉积的影响。【方法】选取初生、1、2、3、4、5、6月龄湖羊公羔和12月龄的成年公湖羊各5只,屠宰后取背最长肌、腰大肌和股二头肌检测肌内脂肪含量,用荧光实时定量PCR法检测湖羊不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因mRNA表达水平,分析其在不同时期的变化及其与肌内脂肪含量的关系。【结果】(1)随着月龄的增加,肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量持续上升;同月龄背最长肌和腰大肌IMF含量显著高于股二头肌(P<0.05)。(2...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 单艳菊  顾华兵  宋卫涛  束婧婷  朱文奇  胡艳  李慧芳  
【目的】研究不同品种鸭胚胎期和出雏早期胸肌、腿肌中IGF-Ⅰ基因mRNA表达水平的发育性变化。【方法】采用实时荧光定量PCR方法,研究生长速度不同的"高邮鸭"和"金定鸭"13,17,21,25,27胚龄和出雏后7日龄胸肌、腿肌中IGF-Ⅰ基因mRNA的表达规律。【结果】IGF-ⅠmRNA的表达规律在2个品种鸭的早期肌肉发育过程中较为一致,胸肌和腿肌IGF-ⅠmRNA表达量都是在13胚龄时最高,公鸭和母鸭同一肌肉组织IGF-ⅠmR-NA表达没有显著差异(P>0.05);不同品种间,IGF-ⅠmRNA在"高邮鸭"胸肌中的表达量除27胚龄外,其他发育时期均高于"金定鸭",且在13和21胚龄及7日龄时...
[期刊] 上海水产大学学报  [作者] 杨琳琳  蒋燕  杨桂梅  许柳雄  陈新军  徐善良  鲍宝龙  
采用目前国际上最为通用的cDNA文库构建方法,构建了银鲳皮肤和肌肉组织的cDNA文库,通过一定规模的序列测定,并借助生物信息学技术,分析了164个序列,得到了105个不同的基因(或表达序列标签),在105个不同的基因中,68.6%基因没有冗余,1倍、2倍、3倍和4倍冗余的分别占23.8%,3.8%,2.8%和1%。皮肤和肌肉组织表达基因的组成中,除了21个没有同源序列的未知基因外,可初步归为代谢相关的酶(38个)、DNA有关的酶(7个)、结构蛋白(4个)、膜蛋白(13个)、线粒体蛋白(1个)、转录因子(9个)、信号传导相关的蛋白(10个)和未知蛋白(2个)等8大类,其中,转录因子、膜蛋白,和D...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴奎  梁宏伟  李忠  王丹  王春枝  邹桂伟  
应用引物退火控制技术(ACP)筛选尼罗罗非鱼雌雄鱼肌肉组织差异表达基因,寻找与雌雄鱼肌肉生长发育相关的候选基因。本实验从同等条件下养殖的尼罗罗非鱼群体中随机选取雌、雄鱼各5尾组成RNA池,采用引物退火控制技术,分析了两组个体肌肉组织差异表达基因。利用20对随机引物差异显示扩增,共获得8条ESTs,其中5个已知的ESTs分别为转录变体3(LOC100691543)、60S核糖体蛋白(RL3)、小白蛋白β样蛋白、肌型肌酸激酶M2-CK和转录因子Sox4,其余3个为未知的ESTs。实时定量PCR分析各差异表达基因在尼罗罗非鱼雌雄肌肉组织中的表达发现,8个差异表达基因中转录变体3与ACP6-Y在尼罗罗...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李明桂  徐洪涛  李隐侠  于莎莉  赵兴波  潘增祥  朱翔  谢庄  李齐发  
【目的】研究b-Boule基因5′调控序列的序列特征,以及牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织b-Boule基因DMR甲基化状态的差异,为揭示b-Boule基因的表达调控和犏牛雄性不育的表观遗传机制提供依据。【方法】采用PCR扩增和克隆测序技术获得牦牛b-Boule基因5′调控序列,利用生物信息学方法分析b-Boule基因5′调控序列的序列特征,采用亚硫酸氢钠测序法检测牦牛、黄牛与犏牛睾丸组织中b-Boule基因DMR的甲基化状态。【结果】b-Boule基因5′调控序列长度为1 352 bp,核心启动子区含有SP1等甲基化敏感位点,5′端存在一个CpG岛。犏牛b-Boule基因DMR的甲基化水平(17.7...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王文龙  王敬龙  杨晓雯  刘建枝  赵宝玉  路浩  陈基萍  马烽  王保海  
疯草是我国西部草原的主要毒害草,其毒性成分为苦马豆素。本实验以内蒙古阿拉善的一只变异黄芪自然中毒山羊为对象,采集其肌肉组织,运用不同处理方法对其进行处理后,气相色谱仪检测组织中苦马豆素的含量。结果显示,室温水浸泡、室温水浸泡+超声、水蒸煮和水蒸煮+超声,4种不同处理方法对疯草自然中毒羊肌肉组织中苦马豆素的清除明显不同,分别为81.7%、94.7%、100%和100%。结果表明,采用水蒸煮的方法即可完全清除中毒羊肌肉组织中的苦马豆素。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 缪宇平  乔庆林  裘塘根  陈琪  
以鲜活鲢为研究对象 ,从肌肉组织冷冻切片、盐溶蛋白、Ca2 + ATP酶活性等角度研究在缓慢冻结条件下鲢的冷冻变性情况 ,并探讨鲢冷冻变性的机理。结果表明 :冻结前后 ,鲢肌肉纤维组织结构变化十分显著 ;鲢冻结至 - 35℃后盐溶蛋白下降了 14.8% ;Ca2 + ATP酶活性变化则不明显。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 唐波  王群  奚雨萌  林丽娟  穆甜  王建球  韩兆玉  
选择平均年龄4-5岁、体重相近的徐州黄牛16头进行配对,随机分为对照组和试验组,每组8头,在相同的条件下饲养.试验组分别在每头肉牛的精料中添加8 g·d-1蛋氨酸羟基类似物异丙醇酯(HMBi),对照组的精料不添加HMBi.试验结束后统一屠宰,并测定相关指标,研究HMBi对肉牛胴体品质、血清生化指标、肌内脂肪含量以及心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因mRNA表达水平的影响.结果表明:在肉牛胴体品质方面,与对照组相比,试验组肉牛的肌肉色、脂肪色、剪切力和蒸煮损失均无显著差异(P>0.05);但大理石花纹等级高于对照组(P>0.05).在血清生化指标方面,试验组肉牛血清的甘油三酯含量在试验后极...
[期刊] 水产学报  [作者] 吴楠  魏华  沈竑  徐克怀  陈金民  
为研究溴氰菊酯对克氏原螯虾的毒性效应及致毒机制,实验将克氏原螯虾成虾暴露于农药溴氰菊酯0.5、0.1和0.005μg/L等3个浓度的药液中24 h后,采用透射电镜观察克氏原螯虾肌肉组织超微结构损伤情况,并以细胞色素氧化酶活力(CCO)、乳酸脱氢酶活力(LDH)和乳酸(LD)含量为生物标志物评价溴氰菊酯对克氏原螯虾肌细胞呼吸产能功能的影响。结果显示,3个浓度的溴氰菊酯都会造成肌细胞超微结构不同程度的损伤,且浓度越大损伤越严重,损伤主要表现为肌原纤维断裂、肌浆网溶解,线粒体溶解。此外,3个浓度的溴氰菊酯都会对CCO活力、LDH活力和LD含量产生影响。其中0.1μg/L的溴氰菊酯在6~24 h的暴露...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙伟  唐中林  谭林  雷初朝  李奎  
【目的】研究HMGCS1基因对猪骨骼肌生长发育的影响及其靶标的验证。【方法】采用real-time PCR对通城猪不同组织以及背最长肌不同发育时间点的HMGCS1基因的表达变化进行检测。【结果】①HMGCS1基因在成年猪肺组织中的表达量最高;②在背最长肌发育中,该基因分别在胚胎期33和65 d高表达,出生后20、30、40和60 d低表达;③双荧光素酶试验显示,转染miR-18a/b minics组荧光素酶活性低于对照组。【结论】HMGCS1参与了猪骨骼肌生长发育过程,并受miR-18a/b的调控,是猪的产肉性状的潜在候选基因。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 岳群华  袁建龙  郝斐  靳木子  王景园  杨文亮  刘东军  仓明  
【目的】构建骨骼肌特异表达目的基因卵泡抑制素(follistatin,FST)的真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red,分别转染到不同细胞系中,检测FST及下游基因在RNA和蛋白水平的表达情况,同时测定骨骼肌特异启动子SP和α-actin的启动效率,以研究FST的特异表达对肌肉发育的影响。【方法】利用脂质体分别将真核表达载体pCFCDs-red和pSPFCDs-red转染到绵羊胎儿成纤维细胞(SFFCs)、骨骼肌卫星细胞(SMSCs)和SMSCs诱导肌管中,获得转基因细胞;对获得细胞的生长状况、细胞周期、细胞形态大小以及目的基因和下游基因的表达情况,分别用流式细胞仪、实时定量...
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