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[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张传茂  聂其灼  
应用光镜和透射电镜技术对17头猪的淋巴结髓质进行了研究.结果显示:猪淋巴结的化质主要由粗细两种网状纤维及常与其伴行的成纤维型风状细胞和特殊型网状细胞、淋巴细胞和浆细胞、巨噬细胞以及一种强嗜酸伊红性的颗粒细胞组成,但其中淋巴细胞和浆细胞的数量远少于其他哺乳动物淋巴结髓质.无明显的髓素,髓窦小且不明显.
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 郁晓梅  聂其灼  
采用组织学和酶组织化学方法对16头猪的空肠淋巴结、腹股沟浅淋巴结和颈浅背侧淋巴结的组织结构进行了综合研究.结果表明,猪淋巴结组织结构并不完全属于皮质和髓质倒置,而是皮质可以位于外周,髓质可以位于中央,通常是皮质沿小梁分布.皮质由淋巴小结和弥散性淋巴组织构成;髓质无明显的髓索和髓窦,淋巴细胞数量少,T、B 淋巴细胞的分布类似于其他哺乳动物;树突状细胞、交错镶嵌型细胞、巨噬细胞和网状细胞的形态、分布以及组化反应也与其他哺乳动物相似.此外,在髓质中还发现一种特殊的网状细胞.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 孙岩  胡健  温俊歌  郜原  薄联锋  徐志坤  吴耀丽  张德礼  
【目的】克隆猪淋巴结双链RNA激活的蛋白激酶(PKR)基因,并在体外初步表达,为研究流感病毒感染时猪PKR与P58IPK在体内外的相互作用奠定基础。【方法】用Trizol法从猪淋巴结中提取总RNA,RT-PCR法扩增猪PKR基因的完整编码区,将该片段连接到原核表达载体pGEX-4T-1和真核表达载体pDsRed1-N1中,采用SDS-PAGE检测原核表达载体pGEX-PKR在大肠杆菌BL21中的表达情况,用脂质体转染法将真核表达载体pD-sRed1-PKR转入猪脐静脉血管内皮细胞系(SUVECs),Western blot检测其在细胞中的表达。【结果】PCR扩增得到了1 754bp的DNA片段...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 吕琼霞  张书霞  赵茹茜  
为研究运输应激对猪肠系膜淋巴结中IL-2、IL-6、IL-10及其受体mRNA转录的影响,并探讨p38丝裂原活化蛋白激酶(P38MAPK)和核因子κB(NF-κB)对其转录的调控作用,用荧光定量RT-PCR方法对肠系膜淋巴结中3种细胞因子及其受体mRNA进行定量检测,用ELISA方法检测猪肠系膜淋巴结组织匀浆液中P38MAPK含量的动态变化,用激光扫描共聚焦显微镜观察运输前后NF-κB在肠系膜淋巴结细胞中的分布。结果显示:经1、2和4 h的运输应激,肠系膜淋巴结中3种细胞因子的转录均发生了显著变化,且均是4 h时达到最大值,并极显著高于对照组、1 h组和2 h组(P<0.01),而其相应受体的...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 施旅娟  韩惠利  张书霞  
【目的】了解PCV-2感染仔猪后,病毒在腹股沟淋巴结中的位置、凋亡细胞的类型及其两者之间的关系。【方法】选用9头32日龄PCV-2抗体阴性的普通断奶仔猪,随机分为3组,即对照组、PCV-2攻毒组(PCV-2组)、PCV-2攻毒后再用钥匙孔血蓝蛋白(KLH)刺激组(PCV-2+KLH组),每组3头。感染后32d采集腹股沟浅淋巴结制作石蜡切片。采用免疫组织化学方法对病毒进行定位,用末端标记法(TUNEL)进行细胞凋亡的定位测定,并用流式细胞法对细胞周期和细胞凋亡进行定量检测。【结果】PCV-2组和PCV-2+KLH组仔猪淋巴结的主要病变为皮质和副皮质区淋巴细胞严重缺失,上皮样巨噬细胞浸润,巨噬细胞...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张传茂  聂其灼  
报道了猪淋巴结内一种特殊的嗜伊红性颗粒细胞(暂定名)的超微结构和几种酶的电镜细胞化学特征.该细胞主要分布于猪淋巴结的髓质和皮质一髓质交界区,呈圆形或椭圆形,核也呈圆形或椭圆形,细胞质中含有较多的特殊颗粒,其它类型的细胞器较少.特殊颗粒有单层膜包裹.内容物电子致密度高,Mg2+-腺苷三磷酸酶(Mg2+-ATPase)、酸性磷酸酶(ACPase)、非特异性脂酶(NSE)、5'-核苷酸酶(5'-AMPase)细胞化学反应均呈阳性.Mg2+-ATPasc主要定位于细胞膜,ACPase均匀分布于特殊颗粒内,NSE分布在特殊颗粒膜和颗粒内,5'-AMPase主要定位于颗粒膜。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王亭玮  刘转霞  陆佳  李沛轩  刘柯江  曾巍巍  索南吉  谢东旭  王雯慧  
【目的】制备兔抗双峰驼Toll样受体5(TLR5)的多克隆抗体并鉴定其活性。【方法】选择双峰驼TLR5基因序列,经软件分析选择其编码区的膜外区1~499氨基酸位为主要抗原位,再选取对应的核苷酸序列进行基因合成,并与pET-28a(+)载体连接构建重组质粒pET28a-TLR5,对其进行BamHⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定。将pET28a-TLR5转染大肠杆菌原核表达系统,用IPTG进行诱导表达,对IPTG浓度(0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mol/L)和诱导时间(2,3,4,5,6,7,8,9 h)进行优化。将表达的蛋白经亲和层析法纯化后免疫新西兰白兔以制备多克隆抗体,采用ELISA法检测多抗效价,用Western blot检测和免疫组化验证评价多克隆抗体的特异性。【结果】成功构建了重组质粒pET28a-TLR5,经IPTG诱导后获得了重组蛋白(大小约为57 ku),且以包涵体的形式表达。IPTG最佳诱导表达条件为:IPTG浓度为1 mol/L,诱导时间为6 h。TLR5多抗血清效价为1∶128 000。Western blot鉴定表明,TLR5多抗血清能特异性识别目的蛋白;免疫组化结果表明,TLR5多抗能很好地识别成年双峰驼十二指肠肠系膜淋巴中的TLR5阳性细胞。【结论】成功制备出特异性良好的兔抗双峰驼TLR5多克隆抗体,能够用于TLR5的检测。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 华利忠  张书霞  孙运  代蕾  陈耿  吕春子  
为探讨猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)感染仔猪的淋巴结和脾脏淋巴细胞内钙信号变化在细胞凋亡中的作用,选取19头PCV2抗原和抗体均为阴性的5周龄健康断奶仔猪,随机分成对照组(4头)和试验组(15头),试验组仔猪通过滴鼻接种PCV2,并于接种后14、21和35 d分别扑杀5头,对照组仔猪滴鼻同量PBS后当天扑杀。所有仔猪扑杀时均取腹股沟淋巴结及脾脏,流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光分光光度法检测细胞内Ca2+浓度,孔雀绿比色测定法检测Ca2+-ATP酶的活性,荧光定量RT-PCR检测钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKⅡ)mRNA转录水平。结果表明:所有接种病毒仔猪腹股沟淋巴结及脾脏细胞凋亡率均极显著高...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 肖传斌  梁宏德  张书松  高春生  张玉龙  
26例仔猪肺经肺实质和肺胸膜下注射 30 %普鲁士蓝氯仿溶液、剖查其器官内淋巴管及淋巴流向。结果表明猪肺的器官内淋巴管有浅淋巴管和深淋巴管 2种。左肺前叶淋巴管分别注入左支气管肺淋巴结和气管支气管左淋巴结 ,左肺后叶淋巴管注入气管支气管中淋巴结和纵隔后淋巴结 ;右肺前叶淋巴管注入右支气管肺淋巴结和气管支气管前淋巴结 ,右肺中叶淋巴管注入右支气管肺淋巴结和气管支气管右淋巴结 ,右肺后叶淋巴管注入气管支气管右淋巴结、气管支气管中淋巴结和纵隔后淋巴结 ,右肺副叶淋巴管注入右支气管肺淋巴结和气管支气管中淋巴结。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 范毛毛  常藕琴  石存斌  王斌  吴淑勤  
采用组织学和电镜技术,应用HE常规染色方法、AB-PAS黏液细胞染色方法、免疫组织化学方法,对鳜(Siniperca chuats)黏膜淋巴组织的基本结构以及免疫相关细胞的形态、类型及其在黏膜淋巴组织中的分布情况进行了研究。结果表明,鳜的鳃弓、鳃小片基部、皮肤的表皮以及肠上皮中存在大量的黏液细胞,用AB-PAS染色方法将鳜黏液细胞分为6种类型;免疫组化方法可在鳃的血窦腔、皮肤的基底层以及肠黏膜层中检测到抗体分泌细胞的存在;透射电镜观察显示,黏膜淋巴组织中存在着黏液细胞、淋巴细胞、浆细胞、吞噬细胞、肥大细胞、朗罕氏细胞、嗜中性粒细胞等免疫相关细胞。结论认为,鳜黏膜淋巴组织具有完成免疫应答的细胞基...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 王军萍  
采用解剖、石蜡切片和电镜制片方法,对中华鳖淋巴心的解剖部位、大小、显微结构和内容物的超微结构进行了观察。结果表明,中华鳖有3对淋巴心,位于肺部两侧的体腔外,通过结缔组织与背甲相连。测量和统计检验结果显示,其长径和短径均与背甲长呈直线正相关,性别间无显著差异。淋巴心呈椭球形,中央有1个腔,由淋巴心壁向内突出数条环形嵴状瓣膜。淋巴心壁的组织结构可分为4层,由内向外依次为立方上皮层、致密结缔组织层、横纹肌层和结缔组织外膜。腔内除液体基质外,还可见细胞及许多裸核(不见细胞膜和细胞质)等。电镜下裸核有明显核仁,核周围有溶酶体等散落的细胞器。
[期刊] 水产学报  [作者] 绳秀珍   王锦诚   唐小千   邢婧   迟恒   战文斌  
鱼类黏膜相关淋巴组织是抵御病原入侵的第一道防线。其中,鱼类鼻黏膜相关淋巴组织(Nasal-associated lymphoid tissue,NALT)近年来被国内外学者所关注,并被证明是嗅觉器官中抗原识别和启动黏膜免疫应答的重要场所,在细菌、病毒和寄生虫感染后可发挥快速的局部免疫响应。以NALT为靶点,对鱼类开展疫苗鼻内接种可起到良好的免疫保护效果。但目前,对NALT中复杂的免疫细胞与分子网络及其互作机制知之甚少。本文对鱼类嗅觉器官结构与功能、NALT的细胞与分子网络及免疫应答、鼻内接种的应答及免疫保护效果等方面的最新研究进展进行综述,旨在阐明鱼类NALT在黏膜局部发挥的免疫防御机制,以期为新型黏膜疫苗的设计与研发提供参考。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李乙江  杨晶晶  牛自兵  创向辉  杨倩  
[目的]IgA在呼吸道抵抗外来病原微生物的黏膜免疫中发挥着至关重要的作用,了解黄牛呼吸道IgA分泌细胞和淋巴组织的分布尤为重要。[方法]本试验运用免疫组织化学技术和组织学技术对5头7岁健康婆罗门黄牛的鼻黏膜、气管、肺内支气管、肺组织的IgA分泌细胞和淋巴组织的分布进行了详细研究。[结果]黄牛的鼻黏膜、气管、肺内支气管、肺中均分布有IgA分泌细胞,且主要分布于黏膜上皮下以及腺体周围。其数量在鼻黏膜中最多,气管次之,肺内支气管和肺组织中IgA分泌细胞较少。此外,从鼻黏膜到肺内支气管黏膜下均分布有较多的淋巴组织
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 金凤  嵇保中  唐进根  
选用柠檬酸钠等8种药剂进行了对桑天牛AprionA germAri成虫血淋巴凝结的抑制试验。冷藏血淋巴溶解时按V(血淋巴)∶V(抑制剂)∶V(苯基硫脲)=1∶1∶1和1∶2∶2的用量加入抑制剂,4℃下静置2 min和6 h,各药剂抑制血淋巴凝结结果为:按V(血淋巴)∶V(抑制剂)∶V(苯基硫脲)=1∶2∶2的用量加入质量分数为10 g·kg-1柠檬酸钠,凝结抑制效果最好,柠檬酸-磷酸二氢钠溶液、草酸钾、秋水仙碱、任氏液、磷酸缓冲液也有一定的抑制作用,而噻孢霉素和硫酸新霉素的抑制作用很小。按1∶2∶2的用量加入10 g·kg-1柠檬酸钠,可更有效抑制冷藏血淋巴解冻时的凝结。新鲜血淋巴采集时按V(...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 祁保民  尚迎辉  包汉勋  
应用组织学技术对半番鸭肠道相关淋巴组织(GALT)M细胞的来源进行了研究;应用台盼蓝、辣根过氧化物酶(HRP)作为示踪物对GALT上皮细胞的功能进行了研究.结果表明:半番鸭GALT黏膜上皮最初为柱状上皮,柱状上皮逐渐脱离基底膜,基底膜部位的成纤维细胞转变为扁平上皮;鸭灌服台盼蓝后,在淋巴组织表面的扁平上皮细胞和肝脏的枯否氏细胞均出现了台盼蓝颗粒;肠腔内注入HRP后,HRP的阳性产物出现在扁平上皮和淋巴组织中;在柱状上皮内2种示踪物均未出现.可见,半番鸭GALT表面的M细胞来源于成纤维细胞.
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