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[期刊] 中国农业科学
[作者]
张德福 朱良成 刘东 芮荣 汤琳琳 项智峰
目的本研究试图通过比较猪卵母细胞超低温冷冻保存方法、冷冻承载工具、冷冻卵母细胞的类型,从而有效地保存猪卵母细胞;方法利用屠宰场卵巢采集的卵母细胞,以台盼蓝染色、二乙酸荧光素(FDA)染色鉴定卵母细胞冷冻后的成活率,以体外成熟和体外受精鉴定卵母细胞冷冻后的发育能力,研究了不同冷冻方法和不同冷冻保护剂对猪卵母细胞的冷冻效果。结果(1)程序化法冷冻保存中,9%乙二醇(EG),10%二甲基亚砜(DMSO),10%甘油(Gly)均对猪MII期卵母细胞有冷冻保护作用,极显著高于对照组(FDA染色成活率33.8%,25.8%,23.5%vs2.5%,P<0.01),且以9%EG的效果最好,显著高于另外两组(...
关键词：
猪 卵母细胞 冷冻保存 体外受精
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
蔡令波 王锋
比较从不同卵巢卵泡直径获得的卵母细胞体外成熟能力的差异 ,并研究其冷冻保存效果。结果表明 :在体外成熟培养液中添加 10 % (体积分数 ,下同 )ECS的成熟率 (72 86 % )显著高于添加 10 %NCS (6 2 2 1% ) (P
关键词：
猪 卵母细胞 体外成熟 冷冻保存
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
李青旺 于永生 江中良 王立强 胡建宏 常万存
采用一步法和二步法研究玻璃化冷冻保存的牛生发泡 (GV )期和体外成熟 (IVM)卵母细胞的发育潜力。结果表明 ,冷冻基础液 PBS和 TCM199在玻璃化冷冻中的效果差异不显著 (P>0 .0 5 ) ;冷冻程序和卵母细胞发育阶段对冷冻效果有明显影响 ,二步法冷冻效果显著优于一步法 (P
关键词：
牛 卵母细胞 玻璃化冷冻
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
戴建军 芮荣 武彩红 葛立军 卢庆
旨在探讨提高猪GV期卵母细胞冷冻保存效率的可能途径。将EDS、EFS40和ES冷冻保护液用作卵母细胞冻前、冻后程序的处理,但不冷冻,比较3种冷冻保护剂对猪GV期卵母细胞的毒性作用;采用ES液作玻璃化液,比较常规细管法、OPS法和电镜铜网法3种冷冻载体对猪GV期卵母细胞的冷冻效果;并以ES液作玻璃化液,OPS管为冷冻载体,将猪GV期卵母细胞分5组,即对照组、CB+离心处理组、直接冷冻组、CB+冷冻组、CB+离心+冷冻组进行对比处理,比较各处理卵母细胞的冻后存活率与发育率。结果表明,在不同冷冻保护液中,以ES液组合作为玻璃化冷冻液时的毒性作用最低,与对照组间无明显差异(P>0.05);在3种冷冻载...
关键词：
猪 卵母细胞 玻璃化冷冻
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
武彩红 芮荣 戴建军 谢冰 剧世强 卢晓 侯加法
为研究猪未成熟期(GV期)和体外成熟期(MⅡ期)卵母细胞玻璃化冷冻后的超微结构变化,随机取新鲜与冷冻-解冻后的GV期和MⅡ期卵母细胞制备电镜标本。GV期和MⅡ卵母细胞分3组进行处理:Ⅰ组为对照组,Ⅱ组为GV期卵母细胞冷冻组,Ⅲ组为MⅡ期卵母细胞冷冻组。结果表明,所用玻璃化冷冻程序更适用于猪GV期卵母细胞的冷冻保存,GV期冷冻组卵母细胞的二乙酸荧光素(FDA)染色存活率、卵裂率均明显高于MⅡ期卵母细胞冷冻组。透射电镜观察结果发现,猪GV期卵母细胞经玻璃化冷冻后,主要表现为部分卵丘-卵母细胞复合体(COC)发生卵丘细胞脱落,透明带破损,卵丘细胞碎裂,卵丘细胞与卵母细胞间的连接受到破坏,卵母细胞微绒...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
黄德宝 胡建宏 李青旺 冯涛 丁海荣 杨智青 董文素
将132个猪卵巢按重量分为A、B和C3个级别,用抽吸法结合切剖法采集卵母细胞,研究卵巢重量与3个级别卵母细胞质量的相关性。结果表明:当卵巢重量>4.000g时,A级卵母细胞的数量与卵巢重量呈负相关(rA=-0.2770);当卵巢重量在2.000~4.000g时,A级卵母细胞的数量与卵巢重量呈正相关(rA=0.3827),且差异极显著(P<0.01),无论单个卵巢获得的卵母细胞总数,还是A级卵母细胞的比例,均明显高于其他重量的卵巢;当卵巢重量≤2.000g时,A级卵母细胞的数量与卵巢重量有一定的正相关性。研究结果表明,在采集猪卵巢卵母细胞时,建议采集重量在2.000~4.000g的卵巢,以获得较...
关键词：
猪 卵巢重量 卵母细胞质量 相关性
[期刊] 中国科学技术大学学报
[作者]
赵世玉 赵刚
近年来由于肿瘤和非肿瘤因素的影响，对女性生育力保存的需求越来越高，满足这些需求将会是未来几年的一个热门话题。卵母细胞的冷冻保存是实现女性生育力保存的一个可行的选择，在哺乳动物基因库和人类卵母细胞库方面已经取得了重大进展。本文系统介绍卵母细胞低温保存的研究历史和玻璃化保存技术，重点介绍保存中使用的玻璃化载体。此外，我们还总结了卵母细胞玻璃化保存的基本原理，讨论了玻璃化对于卵母细胞质量的影响，并且提出了改善卵母细胞低温保存效率的一些策略。最后，我们对卵母细胞低温保存技术进行了总结，并对其发展前景进行了展望。
关键词：
生育力保存 卵母细胞 低温保存 玻璃化
[期刊] 中国农业科学
[作者]
朱桂玉 冯书堂 李吉涛 牟玉莲 潘登科 郭炳冉
【目的】研究探讨卵丘细胞的完整性在支持和促进猪卵母细胞成熟过程中发挥的重要作用以及卵丘与卵母细胞互作的分子机理。【方法】对具有完整致密卵丘细胞包裹的和无卵丘细胞包裹的猪卵母细胞进行了体外成熟培养试验,应用mRNA差异显示(DDRT-PCR)和半定量反转录PCR技术(RT-PCR),对这2类猪卵母细胞中mRNA的差异表达进行研究,得到了14条差异表达条带,经过回收、克隆、测序后,再运用半定量(RT-PCR)进行检测。【结果】体外培养的裸卵细胞的各项成熟指标均低于卵丘-卵母细胞复合体。3个基因(PELP1,Myo5b and CAST)和一条新EST序列在有卵丘和无卵丘的猪卵母细胞中表现出差异表达...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
华再东 郑新民 魏庆信 许厚强 刘西梅 李莉
通过采集屠宰场废弃猪卵巢,体外分离和培养猪卵母细胞,探讨基础培养基、激素、卵泡直径大小及卵丘细胞层数对猪卵母细胞体外成熟的影响。结果表明:改良TCM199(mTCM199)较NCSU-23培养猪卵母细胞成熟率显著提高(P
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
霍道坦 陶勇 王勇 权青 田宁宁 成志军 章孝荣
为研究猪卵母细胞发生早期卵巢上细胞的凋亡情况,制作妊娠33、40、46、54、61 d母猪胎儿卵巢的石蜡切片,并进行荧光染色。结果发现,母猪妊娠到33 d时,胎猪卵巢上即可见原始生殖细胞和卵原细胞的凋亡,随着妊娠时间的延长,凋亡也逐渐增加,妊娠33、40、46、54和61 d母猪胎儿卵巢上卵原细胞的凋亡率分别为3.13%、4.32%、5.50%、9.43%和11.10%,同时,颗粒细胞的凋亡率则分别为8.89%、12.45%、14.74%、17.96%和22.81%。结果说明,在猪胎儿卵母细胞发生早期,即开始发生了卵原细胞和颗粒细胞的凋亡,且有逐渐增加的趋势。
关键词：
胎儿 猪 卵巢 卵原细胞 凋亡
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
陈晓宇 李青旺 胡建宏 王立强 张德福 卜书海 韩增胜
以TCM-199成熟培养猪卵巢表面直径2～3mm,3～5mm和5～8mm卵泡内的卵母细胞,比较了成熟培养液中添加以上各组卵泡液(pFF)对猪卵母细胞体外成熟(IVM)的影响,以成熟培养48h后排出第一极体为成熟标准对猪卵母细胞进行成熟鉴定。结果表明,2～3mm,5～8mm和3～5mm3组卵泡内卵母细胞的体外成熟(IVM)率依次升高,分别为12.7%,31.3%和46.0%,各组间差异显著(P<0.05);添加3～5mm卵泡液的卵母细胞体外成熟率(42.0%)也显著高于5～8mm组(11.0%)和2～3mm组(12.7%)(P<0.05)。试验同时观察记录了不同直径卵泡内卵母细胞的等级,结果发...
关键词：
猪 卵泡 卵母细胞 体外成熟
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张莉 冯书堂
卵母细胞是胚胎工程和发育生物学的重要组成部分,它是体外受精、性别控制、克隆及转基因等技术成功与否的前提和关键。影响猪卵母细胞体外成熟的因素很多,本文将从物理因素和化学因素两方面作简要综述。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈长超 王令怡 孙嘉豪 靳莎莎 芮荣 剧世强
［目的］本试验旨在研究猪卵母细胞成熟过程中细胞骨架的动态变化以及秋水仙碱对卵母细胞成熟及ＭⅠ期纺锤体的影响。［方法］采用间接免疫荧光结合激光共聚焦显微成像技术，检测微管蛋白（α－ｔｕｂｕｌｉｎ）等细胞骨架蛋白的表达与亚细胞定位，之后采用秋水仙碱处理猪卵母细胞，研究秋水仙碱对卵母细胞成熟及ＭⅠ期纺锤体结构的影响。［结果］猪卵母细胞α－ｔｕｂｕｌｉｎ在生发泡破裂（ＧＶｂＤ）之后开始组装，第一次减数分裂中期（ＭⅠ）形成典型的纺锤体结构，第一次减数分裂后期至末期（ＡｔⅠ）则分布于两组染色体之间，第二次减数分裂中期（ＭⅡ）在染色体附近重新组装形成典型的纺锤体；微丝蛋白（Ｆ－Ａｃｔｉｎ）在ＧＶｂＤ之后富集．．．
关键词：
猪 卵母细胞 减数分裂 纺锤体 秋水仙碱
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王锋
利用屠宰牛的卵巢 ,研究了卵巢内 (IO)卵母细胞体外成熟、受精及发育能力。结果表明 ,成熟培养液中添加FSH (10 μg·mL-1)、hCG (2 0 μg·mL-1)和E2 (1μg·mL-1)等激素对IO卵母细胞受精发育能力有极显著促进作用(P
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
练青平 姚子亮 王雨辰 宓国强
采用常规生物学调查方法和组织切片技术,对瓯江光唇鱼(Acrossocheilus fasciatus)各期卵巢和卵母细胞的组织学结构特征及繁殖期进行了系统的研究。结果表明:瓯江光唇鱼卵母细胞发育可分为5个时相,其卵巢发育可分为6个时期。Ⅰ期卵巢透明,呈细线状;Ⅱ期卵巢以第Ⅱ时相卵母细胞为主;Ⅲ期卵巢以第Ⅲ时相卵母细胞为主,只有少量第Ⅰ和Ⅱ时相卵母细胞,此期伴有液泡和卵黄颗粒的出现;Ⅳ期卵巢呈长囊状,卵巢中卵粒清晰可见,以第Ⅳ时相卵母细胞为主,此期卵黄颗粒增多,核移位;V期卵巢为成熟期的卵巢,卵细胞游离。Ⅵ期卵巢处于衰退期,此时卵巢松弛,体积缩小。瓯江光唇鱼的繁殖期为每年5-8月。进入繁殖期的5...
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光唇鱼 卵巢 卵母细胞 发育
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