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[期刊] 中国农业科学
[作者]
郑玉才 赵兴波 周静 朴影 金素钰 贺庆华 洪键 李宁 吴常信
【目的】从乳酸脱氢酶(LDH)水平上探索牦牛(Bos grunniens)低氧适应性分子机制。【方法】利用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析牦牛组织中LDH同工酶谱;用比色法测定牦牛、黄牛和水牛心脏、肝脏和肌肉组织中LDH总活力;采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析从牦牛心肌组织中纯化LDH1(由4个H亚基组成)的2种遗传变异体,进行酶学性质的比较。【结果】电泳方法检测发现牦牛LDH1存在2种遗传变异体,根据电泳迁移率分别命名为快型和慢型(LDH1-F和LDH1-S)。获得纯化的牦牛LDH1-F和LDH1-S,比活力分别为21.4U·mg-1蛋白和17.8U·mg-1蛋白,在SDS-P...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
郑玉才 司晓辉 贺庆华 金素钰 洪键
【目的】分离纯化牦牛骨骼肌中的乳酸脱氢酶-A(LDH-A),并克隆其cDNA。通过比较牦牛与普通牛的LDH-A的酶学性质和cDNA序列,为研究牦牛适应高海拔、低氧环境,在分子水平上找到一些线索。【方法】采用染料亲和层析和DEAE-Sephadex离子交换层析等方法,分别从牦牛和普通牛骨骼肌中纯化LDH-A,并对其酶学性质进行比较;通过RT-PCR方法克隆牦牛LDH-A的cDNA序列,并与GenBank登录的普通牛LDH-A的cDNA序列进行比对。【结果】纯化的牦牛LDH-A比活力为103.9U·mg-1蛋白,纯化倍数为18.2。SDS-PAGE和PAGE分析均显示一条带。酶动力学参数测定显示,...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
许雪芬 高杰 蒋忠荣 刘曦 赵永华 彭海云 泽丹多吉 郑玉才
本研究分析了昌台牦牛(Bos grunniens)乳酸脱氢酶-1(LDH1)的遗传多态性。实验提取了80头昌台牦牛基因组DNA,采用PCR-RFLP和新建立的等位基因特异PCR技术,分别对LDH1的H亚基编码基因ldhb的2个突变点进行检测。结果表明,昌台牦牛中检测到2种ldhb G896A基因型(AA、AG),未检测到GG型,其中形成LDH1快带的G等位基因频率为0.1125,且均为杂合型(AG);首次从基因水平上分析牦牛ldhb A689C基因型,观察到AA和AC共2种基因型,其中仅1头牦牛携带LDH1慢带相关的C等位基因,且为AC杂合型。试验结果表明,昌台牦牛ldhb存在与其他牦牛品种类...
关键词：
牦牛 乳酸脱氢酶 遗传多态性
[期刊] 华北农学报
[作者]
张涛 陈建武 何力
为了了解尖裸鲤的生化遗传特性,丰富尖裸鲤种质资源研究的内容,通过配制不连续浓度聚丙烯酰胺凝胶,采用聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对尖裸鲤5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳。结果表明:所测样本鱼心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏中的LDH酶带数分别为:12～16条,17～18条,6～13条,6～10条和12～17条; MDH酶带数分别为3条,4条,3～5条,2条和4～7条。LDH在尖裸鲤厌氧器官(骨骼肌和肝脏)中表达的酶带数总体少于非厌氧器官(心脏和肾脏)。尖裸鲤的MDH分为上清液型(s-MDH)和线粒体型(mMDH)。尖裸鲤的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性,尖裸鲤相对较多的LDH酶带数可能与其独特的栖息环境和A亚基与B亚基的变异共同作用有关。本研究可从生化遗传角度为尖裸鲤的资源保护和利用提供一定理论依据。
[期刊] 水产学报
[作者]
吴婷婷 张燕生 薛国雄 夏德全
哺乳类动物各种组织和器官的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶较稳定,酶带分布非常有规律,同源组织的LDH同工酶酶谱通常相似和稳定。鱼类LDH同工酶复杂得多,有三分之二品种中,其LDH同工酶类似哺乳类动物的酶谱;但在其余三分之一种类中,两个亚基随机结合受到限制,出现了不规则酶谱,有的只有2—3条酶带,有的超过5条酶带。即使具有5条酶带的鱼中,其骨骼肌和心肌LDH在电泳酶谱上迁移快慢正好与哺乳类动物相反。此外鱼类C基因产物并不特定在某一组织或器官中,一些鱼的
关键词：
鳜鱼 奥利亚罗非鱼 乳酸脱氢酶 酶谱
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
詹新贵 金宏 刘艳卉 谭超 傅童生
为了探讨猪各组织器官中乳酸脱氢酶同工酶酶谱特征 ,采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法比较分析了 12头三元杂交猪的心、肝、脾、肺等组织中乳酸脱氢酶同工酶酶谱的分布特征 .结果表明 ,肺、脾两组织中乳酸脱氢酶有 5条酶带 ,分别为 L DH1 ,L DH2 ,L DH3,L DH4 ,L DH5,其中 L DH3最宽 ,着色最明显 ;肝组织中只有 4条酶带 ,分别为L DH1 ,L DH2 ,L DH3,L DH5;心肌组织中只含 3条酶带 ,分别为 L DH1 ,L DH2 ,L DH3.
关键词：
猪 组织 乳酸脱氢酶 同工酶
[期刊] 淡水渔业
[作者]
魏玉众 张桂蓉 霍斌 谢从新 陈生熬
采用不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对雅鲁藏布江中游6种裂腹鱼(尖裸鲤Oxygymnocypris stewartii、拉萨裸裂尻鱼Schizopygopsis younghusbandi、巨须裂腹鱼Schizothorax macropogon、拉萨裂腹鱼S.waltoni、双须叶须鱼Ptychobarbus dipogon和异齿裂腹鱼S.o'connori)的心肌、肌肉、肝脏、肾脏和晶状体5种组织的LDH(乳酸脱氢酶)同工酶进行比较分析。结果表明LDH同工酶的表达具有明显的组织和种间差异性。尖裸鲤、拉萨裸
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蒋晓华 昝瑞光 谷
采用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳技术，对云南滇池高背鲫鱼的成熟卵和胚胎不同发育时期的乳酸脱氢酶（Ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＥＣ．１．１．１．２７，ＬＤＨ）同工酶的表达情况进行了分析，结果如下：１．在所研究的整个发育过程中，ＬＤＨ持续表达了４条酶带。这些持续表达的酶带，在发育过程中可能执行最基本的代谢功能。２．随着胚胎发育的进展，从心搏期起，尤其到肝形成期，ＬＤＨ新酶带逐渐增加，这可能是胚胎细胞核中相应基因开始表达的结果，有些也可能是转录后或翻译后有关调节机制开始作用的结果。３．云南滇池高背鲫鱼胚胎发育过程中ＬＤＨ同工酶的表达有一明显的特点，即与近缘的四倍体鲫鱼和鲤鱼相比，ＬＤＨ的酶带...
关键词：
LDH,发育遗传学,电泳,滇池高背鲫
[期刊] 西南农业学报
[作者]
胡廷章 黄小云 杨俊年 陈再刚
在大肠杆菌DL21中表达胚胎发育后期丰富蛋白基因Os LEA2,用Hi TrapTMchelating HP层析柱纯化得到了Os LEA2蛋白。研究表明,高温会使乳酸脱氢酶的活性降低,高温处理时间的延长会增加对乳酸脱氢酶的损害;干燥脱水5 h后,乳酸脱氢酶活性几乎全部失活,其活性仅仅是未处理的3.06%;反复冻融也会降低乳酸脱氢酶的活性。在高温、脱水和冻融胁迫下,Os LEA2的加入能保护乳酸脱氢酶;随着Os LEA2的增加,乳酸脱氢酶的活性增加。因此,Os LEA2蛋白对乳酸脱氢酶具有保护作用,能减少高温、脱水和冻融对乳酸脱氢酶的损伤。
[期刊] 华北农学报
[作者]
张涛 张林 周剑光 甘金华 何力
为了了解巨须裂腹鱼的生化遗传特性,丰富巨须裂腹鱼种质资源研究的内容,通过聚丙烯胺凝胶垂直板电泳对巨须裂腹鱼5种组织(心脏、眼睛晶状体、肌肉、肝脏和肾脏)中的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)进行了电泳分析。结果表明:所测样本鱼心脏LDH酶带数为6～7条、眼睛晶状体LDH酶带数为6～10条、肌肉LDH酶带数为5～7条、肝脏LDH酶带数为8～11条和肾脏中的LDH酶带数为8～10条;LDH-C基因只在肝脏中特异性表达。心脏MDH酶带数为4～8条、眼睛晶状体MDH酶带数为2～4条、肌肉MDH酶带数为3～4条、肝脏MDH酶带数为4～5条和肾脏MDH酶带数为4～7条。5种组织中LDH在肝脏中表达的酶带数最多,肝脏MDH酶带着色最深,表达活性程度最强。巨须裂腹鱼的LDH和MDH同工酶系统具有组织特异性和个体差异性。组织特异性主要体现在LDH和MDH酶带数目和表达活性程度不同两方面,与各组织执行特定生理功能密切相关。巨须裂腹鱼同工酶个体差异性可能是其漫长的进化过程中为了能适应特殊生境的需要。研究结果可从生化遗传角度为巨须裂腹鱼制定种质标准和资源保护利用提供一定理论依据。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
李达 杨春 张力 徐光龙
采取聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳技术 ,分析了鄱阳湖鳜鱼心脏肌、骨胳肌和肝脏 3种典型组织中乳酸脱氢酶 (LDH)同工酶。结果表明 :①鳜鱼 3种组织中的LDH同工酶存在明显的组织差异 ,都是由A、B两个基因编码。②在肝脏中没有发现Ldh -c基因编码的LDH同工酶 ,这与鲈形目和鲽形目鱼类的情况相同 ,而与鲤形目和鲇形目鱼类的情况相反 ,据此 ,作者认为Ldh -c基因在肝脏中是否表达可以用来判断鱼类的进化水平。
关键词：
鄱阳湖鳜鱼 LDH同工酶 电泳
[期刊] 水产学报
[作者]
崔东遥 任丽媛 邢冬飞 孙景贤 李莹莹 常亚青 湛垚垚
为明确中间球海胆乳酸脱氢酶(LDH)基因序列及表达特征,研究其对海水酸化胁迫的响应,实验利用cDNA末端快速扩增(RACE)技术获得中间球海胆LDH基因(命名为SiLDH)的全长cDNA,并且比较了海水酸化胁迫下,中间球海胆不同组织SiLDH基因表达及总LDH活性的变化情况。结果显示:①SiLDH基因的cDNA全长为1 499 bp,包含133 bp的5′非编码区,349 bp的3′非编码区和1 017 bp编码338个氨基酸的开放阅读框(ORF)。SiLDH编码蛋白的相对分子量为36.40 ku,理论等电点为6.55,属于无信号肽的非跨膜、温和疏水蛋白。②生物信息学分析显示,SiLDH蛋白序列与紫球海胆LDH X4蛋白序列一致性最高(90.88%)。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)发现,SiLDH基因在检测的4种组织中均有表达,相对表达量从高到低为性腺>管足>肠>体腔液;总LDH活性检测显示,中间球海胆总LDH活性从高到低为性腺>管足>体腔液>肠;④海水酸化处理60 d后发现,与自然海水组(pH 8.06±0.01)相比,SiLDH基因在中间球海胆性腺、管足和肠道中呈现总体降低趋势,在体腔液中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势;总LDH活性在性腺、管足和体腔液中呈现随海水pH降低而降低的趋势,在肠道中则呈现随海水pH降低先降低后显著升高的趋势。研究表明,中间球海胆面对海水酸化时可能通过调节SiLDH基因的表达和LDH活性来缓解海水酸化带来的负面影响。
[期刊] 水产学报
[作者]
卓梅琴 谭肖英 黄超 胡伟 朱庆玲
采用Sephadex G-100凝胶过滤、DEAE Sepharose离子交换、Sephadex G-25凝胶过滤等方法对黄颡鱼肝脏胞质中NADP依赖性的异柠檬酸脱氢酶(IDPc)进行纯化,并研究其相关的酶学性质。结果显示,IDPc的比活力为7.94 U/mg,亚基分子量为36.7 ku。IDPc活性最大时的pH和温度分别为8.0和65℃,活化能为81.33 kJ/mol,底物米氏常数KmNADP和KmIC分别为0.056和0.175 mmol/L,底物最大反应速率VmNADP和VmIC分别为9.04和10.51U/mg,催化效率KcatNADP和KcatIC分别为0.16和0.06 min/...
[期刊] 华北农学报
[作者]
洪键 郑玉才 贺庆华
采用RT-PCR方法从黄牛睾丸组织中克隆睾丸特异乳酸脱氢酶-C(LDH-C)基因的cDNA序列,结果发现2种Ldhc剪接体,根据Ldhc基因在进化上的保守性,参照普通牛Ldhc基因结构分析了黄牛Ldhc基因的选择性剪接体的结构,结果显示,剪接体存在外显子缺失:其中剪接体1缺失第7个外显子,剪接体2缺失第4和第7两个外显子。因为LDH-C4酶的NAD+结合结构域由Ldhc的外显子2-4编码,酶的活性中心由外显子4编码。所以剪接体1包含完整酶的NAD+结合结构域和酶的活性中心,剪接体2失去了大部分NAD+结合结构域和酶的活性中心。对黄牛睾丸组织和精子LDH同工酶的电泳分析未检测到潜在的Ldhc剪接...
关键词：
黄牛 乳酸脱氢酶-C 睾丸
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