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[期刊] 中国农业科学
[作者]
朱扬 刘永峰 魏燕超 申倩 王一凡
【目的】建立牛肉及中式加工品中猪肉成分的定性、定量检测方法,保障牛肉产品的纯正性。【方法】提取猪肉及不同加工猪肉制品中的猪基因组DNA,通过DNA质量检测,PCR扩增,灵敏度试验,分析加工方式对猪DNA质量、灵敏度和检测限的影响;制备生牛肉和经干、蒸、煮、炖、煎、炸、烤制处理的牛肉制品中掺入不同比例(10%、5%、1%、0.1%)猪肉的二元混合肉,进行普通PCR和荧光定量PCR定性定量检测,探索DNA在掺假鉴别中的应用。【结果】不同加工方式下猪DNA质量检测结果显示,不同加工方式显著影响DNA纯度(P0.99,斜率为-3.1—-3.6,各曲线均具有良好的线性关系,可以实现牛肉中猪肉成分的定量检测;对比生肉与肉制品的定量结果,混合生肉与混合肉制品的标准曲线的截距之间存在约0.01—0.6个循环数的差异。【结论】不同加工处理能够显著影响肉中DNA的含量、纯度和完整性,但不影响肉制品中DNA的检测限和灵敏度,普通PCR和定量PCR均可以检测到极微含量的掺假肉成分。可见,基于PCR技术的检测方法灵敏度高、速度快、特异性强,定量检测标准曲线有较高的线性相关性和扩增效率,可为肉类行业质量控制和检验计划以及验证标签声明提供可靠的依据,可应用于一些商业样品,以保证肉制品的纯正性。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
何玮玲 胡序建 程欣 黄明 周光宏
【目的】建立含有扩增内标(IAC,Internal amplification control)的用于食品中猪肉和鸡肉成分鉴别的Taqman探针实时荧光PCR检测方法。【方法】分别基于猪的beta actin基因和鸡的transforming growth factor基因设计引物和探针;考察引物和探针的特异性与灵敏度;设计并构建扩增内标,优化体系中扩增内标浓度,建立内标实时荧光PCR体系;使用该检测体系对鲜肉和熟肉来源的DNA模板进行检测评价;应用该体系对市售38份样本进行盲样检测。【结果】含有扩增内标的Taqman探针实时荧光PCR体系能有效地进行食品中猪肉和鸡肉成分的快速检测,非目标物种...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
翟晓虎 李翎旭 陈小竹 蒋怀德 贺卫华 姚大伟
【目的】建立一种快速、准确的肉中猪源性成分定量检测方法。【方法】首先从GenBank数据库中筛选猪特异性的微卫星DNA，根据微卫星DNA核酸序列设计引物，对常见10种动物基因组DNA进行PCR扩增，通过有无扩增产物判断筛选的微卫星DNA对猪源性成分的特异性。然后根据微卫星DNA核酸序列，设计特异性引物和探针，建立猪源性成分Real-time PCR检测方法，采用双标准曲线分别对猪源性成分和总动物源性成分进行定量，计算猪源性成分的百分含量。【结果】筛选到猪特异性微卫星DNA(Accession EF172428)，根据其序列设计的引物SEQ-sus2-F/R只能从猪基因组DNA中扩增出目的条带，其他动物的基因组均无目的条带扩增。建立的Real-time PCR检测方法灵敏度为0.02 ng/25μL反应体系。该方法能够准确检测出混合DNA样品中猪源性成分和混合肉样品中猪源性成分，百分误差分别约为1.32%和1.06%—7.12%。【结论】本研究利用Real-time PCR技术建立的定量猪源性成分的检测方法可以用来检测猪源性成分在混合样品中的百分含量。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王敏 王玮 吕青骎 徐幸莲 周光宏 李春保
[目的]本研究旨在建立一种简单、快速检测猪肉中氯丙嗪(CPZ)残留量的方法。[方法]以CPZ-牛血清白蛋白(BSA)为包被抗原,自制鼠抗CPZ单克隆抗体,在此基础上建立可用于定量检测猪肉中CPZ含量的间接竞争酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA),同时优化检测条件并对该方法进行评价。[结果]采用自行制备的特异性鼠抗CPZ单克隆抗体,建立间接竞争ELISA检测方法,优化得到最佳反应条件:抗原包被稀释倍数为1∶10 000,单克隆抗体浓度为1μg·mL~(-1),酶标二抗稀释倍数为1∶1 000,最低检测限为0.51 ng·mL~(-1),线性检测范围为1.37～111.11 ng·mL~(-1)。线性回归直线方程为y=-1.252 6x+2.853 2,相关系数(R~2)为0.986 6,总变异系数(CV)为6.97%,空白猪肉添加回收率为96.90%～118.79%。[结论]建立的间接竞争ELISA方法特异性强,灵敏度、精密度、准确度和重现性良好,可用于猪肉组织中CPZ残留的快速检测。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘凯丽 赵岳 张素霞 程林丽 王莹
建立检测牛肉、牛奶中氮氨菲啶残留量的高效液相色谱法。用乙腈-甲醇(含0.125 mol/L甲酸铵)溶液(体积比50∶50)提取试样中的氮氨菲啶。提取物经40℃下蒸干、甲醇溶解和正己烷除脂后,采用ODS-3 C18色谱柱,以甲醇-0.1%(体积分数)甲酸水为流动相,梯度洗脱程序分离药物与样品基质,在380 nm的紫外检测波长下进行高效液相色谱检测。试验结果表明,氮氨菲啶在0.005~1.000μg/mL质量浓度范围内呈良好的线性关系(r>0.99)。对空白牛肉、牛奶进行20~500μg/kg的药物添加回收试验,平均回收率范围为80.3%~93.0%,日内变异系数为2.8%~5.3%,日间变异系数...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
范盛先 袁宗辉 孔科 王大菊
以表皮葡萄球菌 2 6 0 6 9型 (Staphylococcusepidermidis,ATCC12 2 2 8)为测试菌 ,用微生物学杯碟法定量测定庆大霉素在猪肉和鸡肉组织中的残留。庆大霉素在磷酸盐缓冲液、鸡和猪的肌肉组织中的最低检测限分别为 0 .0 2 5 μg/ml、0 .0 5 μg/g和 0 .0 5 μg/ g ,在磷酸盐缓冲液中标准曲线的线性范围为 2 .5× 10-2 ～ 0 .8μg/ml。庆大霉素浓度为 0 .0 5、0 .10、0 .2 0 μg/g时 ,鸡肉组织中的回收率分别为 (85 .8± 4 .5 ) %、(90 .1± 5 .9) %和 (88.8± 5 ...
关键词：
庆大霉素 微生物学杯碟法 残留 检测
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
李林霞 崔耀文 沈建忠 冯培生 吴海霞 程林丽 张素霞
为方便检测猪肉中莫西克汀残留量,建立了高效液相色谱-荧光检测方法(HPLC-FLD)。样品采用乙腈提取,加水稀释,用三乙胺调节pH,C18固相萃取柱净化,加三氟乙酸酐和N-甲基咪唑衍生化。以乙腈/水为流动相,高效液相色谱-荧光检测法测定,选择激发波长为365nm,发射波长为475nm。在0.01～1.00μg/mL质量浓度范围内,莫西克汀的色谱峰面积与浓度呈线性相关,相关系数大于0.99;添加量为5、50和250ng/g时,平均添加回收率为92.16%～99.39%;日内变异系数为2.8%～4.1%(n=5),日间变异系数为6.4%～8.5%(n=3)。本方法的检测限为2ng/g,定量限为5n...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
谢翌冬 肖卫民 康大成 周光宏 徐幸莲 张万刚
［目的］建立一种基于生物阻抗技术的冷鲜猪肉新鲜度检测方法。［方法］选取２０块经过排酸的新鲜猪后腿肉，真空包装后在４℃贮藏１０ ｄ，检测猪肉挥发性盐基氮（ＴＶＢ－Ｎ）含量以及生物阻抗的阻抗幅值和相位角的变化。在０．０１～３００ｋ Ｈｚ的频率范围内选取４６个频率点，沿着肌肉纤维方向和垂直肌肉纤维方向测定，进行生物阻抗特性的分析。［结果］随着贮藏时间的增加，猪后腿肉的ＴＶＢ－Ｎ含量逐渐增加，阻抗幅值逐渐减小，相位角基本不变；沿着肌肉纤维方向的阻抗幅值均小于垂直于肌肉纤维方向的幅值，相位角基本相同；随着频率的上升，阻抗幅值和相位角在０．０１～５ ｋ Ｈｚ的范围变化最为明显，猪后腿肉的阻抗幅值显著下降，．．．
关键词：
猪肉新鲜度 生物阻抗 频率 挥发性盐基氮
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
谢翌冬 肖卫民 康大成 周光宏 徐幸莲 张万刚
［目的］建立一种基于生物阻抗技术的冷鲜猪肉新鲜度检测方法。［方法］选取２０块经过排酸的新鲜猪后腿肉，真空包装后在４℃贮藏１０ ｄ，检测猪肉挥发性盐基氮（ＴＶＢ－Ｎ）含量以及生物阻抗的阻抗幅值和相位角的变化。在０．０１～３００ｋ Ｈｚ的频率范围内选取４６个频率点，沿着肌肉纤维方向和垂直肌肉纤维方向测定，进行生物阻抗特性的分析。［结果］随着贮藏时间的增加，猪后腿肉的ＴＶＢ－Ｎ含量逐渐增加，阻抗幅值逐渐减小，相位角基本不变；沿着肌肉纤维方向的阻抗幅值均小于垂直于肌肉纤维方向的幅值，相位角基本相同；随着频率的上升，阻抗幅值和相位角在０．０１～５ ｋ Ｈｚ的范围变化最为明显，猪后腿肉的阻抗幅值显著下降，．．．
关键词：
猪肉新鲜度 生物阻抗 频率 挥发性盐基氮
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
于连富 姜艳春 金宁 由轩 王虹 张子群 许辉 张俊育 李维刚 滕玉生
为建立检测冷冻猪内中旋毛虫的快速检验方法,分别改变消化法的绞碎方法、消化液浓度、消化液温度、消化时间、沉淀时间、漂洗方法等因素,观察其对旋毛虫检出率的影响.认为最佳方法是:纹碎8000r·min~(-1),3s,反复三次;浓度1:40;温度(40±0.5)℃;时间30min;沉淀20min;离心深洗,反复漂洗至液体澄清.用此改进消化法检测—21℃90d 冷冻猪肉中旋毛虫与镜检法对照,检出率最高可达100%.改进消化法适用于冷冻猪内中旋毛虫检测.
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
蒋隽 马海明 柳小春 黄生强 何俊 张细权
以1个丹麦家猪家系为试验材料,对猪全基因组单核苷酸多态性(SNP)标记筛选与猪肉pHI和pHU值有关的QTL.结果发现在6号染色体上存在一个显著影响pHI和pHU值的QTL,与pHI显著相关的QTL的效应为2.6%~8.5%,其中单倍型FLJ30670的贡献率最高,为8.5%,与pHU显著相关的QTL中效应为2.1%~4.3%,都低于pHI有关的效应,其中效应最大的单倍型为FUT1,贡献率为4.3%,估计是猪肉24h酸度变化受外界其他因素的影响更多.
[期刊] 水产学报
[作者]
何浩斌 叶嘉文 梁冠宇 黄燕华 周萌 梁日深
鱼粉是水产饲料重要原料之一，其昂贵的价格导致市场上存在严重的掺杂、掺假现象，尼罗罗非鱼是其中常见掺杂原料。为快速准确检测出鱼粉中尼罗罗非鱼源性成分，本研究以尼罗罗非鱼特异性基因片段为基础，设计荧光定量PCR特异性引物，建立鱼粉尼罗罗非鱼源性成分荧光定量PCR检测方法。利用不同鱼类及虾蟹类组织DNA验证引物特异性，以尼罗罗非鱼DNA梯度稀释及纯鱼粉中掺不同含量尼罗罗非鱼粉进行灵敏度测试，最后针对市售8种鱼粉样品进行检测，确定方法的适用性和检测能力。结果显示，该方法对尼罗罗非鱼源性成分检测具有较高的特异性，在其他鱼类及虾蟹类样品中均无扩增信号。方法灵敏度高，可以检出浓度0.1000 ng/μL的尼罗罗非鱼源DNA，在自制混合鱼粉样品中可检出含量为0.0100%的尼罗罗非鱼成分。研究表明，利用该方法对8种市售鱼粉样品进行检测，其中有4种鱼粉检出一定含量的尼罗罗非鱼成分。本研究可以针对鱼粉中尼罗罗非鱼源性成分进行快速有效的检测。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
胡耀华 熊来怡 刘聪 陈康乐
运用近红外光谱检测生鲜猪肉贮藏于室温(约15℃)和冷藏温(约4℃)期间的pH,用偏最小二乘法(PLS)建立适用于此2种贮藏温度的pH的近红外校正模型。对样品光谱进行聚类分析,并结合感官评价综合研究猪肉在贮藏期pH的变化,确定其在各个新鲜度下的分类阈值。结果表明:近红外光谱技术可用于建立检测生鲜猪肉pH的定量模型,其决定系数R2达到0.92;将聚类分析应用到猪肉新鲜度的定性判别中,确定了生鲜猪肉经历的尸僵、成熟、自溶、腐败4个阶段其对应的pH。通过分析肉质在不同贮藏条件下的变化情况,确定不同新鲜度下pH的分类阈值。该方法准确、灵敏,可用于生鲜猪肉pH的定量检测及其品质安全的定性判别。
关键词：
猪肉 近红外光谱 pH 新鲜度阈值
[期刊] 中国农业科学
[作者]
罗家琴 王加启 卜登攀 李旦 王丽 魏宏阳 周凌云
【目的】建立鉴定饲料中牛、羊、猪、鸡源性成分的PCR方法,进一步完善现有的动物源性饲料检测方法。【方法】根据牛、羊、猪、鸡、鱼以及马的mtDNA的16SrRNA基因序列选用了一对通用引物,初步检测出含有动物源性成分的样品;然后针对牛、羊、猪、鸡4种动物线粒体mtDNA中的保守序列,分别选用了4对特异性引物对检测出的样品进行PCR扩增,扩增的目的片段大小分别为271、274、149和266bp。【结果】通过利用通用引物、优化PCR反应体系及其条件,建立了从未知样品中简便而快速的检测出是否含有动物源性成分的PCR方法;利用所选的针对不同动物的特异性引物,建立了鉴定牛、羊、猪、鸡这4种动物源性成分的...
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
周雅婷 许童羽 陈春玲 周云成 姜美羲
为解决肉牛采食行为识别问题，利用集陀螺加速度计和蓝牙模块为一体的传感器节点采集肉牛的行为姿态数据并通过蓝牙轮询组网模式将数据无线传输到ＰＣ上位机，进行实时显示，对采集的肉牛行为数据进行分析，进而识别肉牛采食行为。选用４０头健康处于育肥期的西门塔尔肉牛样本（体重约３８５ｋｇ，舍饲，每天饲喂２次，可自由饮水），分为２组，其中３０头为试验组，用松紧带在肉牛颞窝部位佩戴传感器节点；另外１０头为对照组，不佩戴传感器，用于比较肉牛是否因佩戴节点而有异常反应。同时在肉牛限位栏的前方安装监控摄像头，记录肉牛的行为信息，以作为后期数据处理依据。试验记录的原始数据包括Ｘ、Ｙ、Ｚ三个轴的加速度、角度以及角速度的九个．．．
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