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[期刊] 华北农学报
[作者]
周人纲
大量证据证明钙-钙调素(Ca2+ CaM)信号系统参与植物的热激信号转导。用激光共聚焦扫描显微镜研究小麦胞内Ca2+浓度的变化,37℃热激可引起小麦胞内自由Ca2+浓度的迅速提高。在Ca2+存在条件下,热激也引起小麦CaM基因CaM1-2的表达及细胞内CaM蛋白含量的提高。用CaCl2处理小麦幼苗明显提高小麦热激基因hsp26和hsp70的表达和热激蛋白的合成,而Ca2+的螯合剂EGTA,Ca2+通道阻断剂异博定和LaCl3、CaM抑制剂W7、TFP和CPZ明显降低了热激基因hsp26和hsp70的表达和热激蛋白的合成。EGTA、易博定、TFP或CPZ的处理也阻止小麦耐热性的获得。小麦CaM基...
[期刊] 华北农学报
[作者]
王文雅 吕静 朱本忠 常世敏 翟百强 罗云波
为了研究CaM和Ca2+在调控乙烯生物合成和信号转导组分基因表达中的相互关系,利用272 mmol/L CaCl2及272 mmol/L CaCl2+100 μmol/L W5(或W7)处理绿熟期番茄果实圆片,然后采用无菌培养的方法在20℃的 条件下进行培养。结果表明:CaCl2处理能够抑制番茄果实圆片的乙烯生成,抑制LeACO1,NR,LeERF2基因的表达, 而CaCl2+W5(或W7)能消除Ca2+对果实圆片乙烯生成及LeACO1,NR,LeERF2基因的表达的抑制作用,但CaCl2和 CaCl2+W5(或W7)处理均对LeACS2基因表达影响不明显。以上研究结果表明外源钙处理对乙烯生物...
关键词：
钙调素 钙 乙烯 基因表达
[期刊] 华北农学报
[作者]
于亚慧 杨菊 张雨晨 张林
为了研究拟南芥CPK6基因在钙离子信号转导过程中的生理功能,进一步明确植物适应缺钙环境的分子机制,首先对CPK6基因缺失突变体(cpk6)进行纯合鉴定,获得了2种纯合突变体:cpk6-2和cpk6-3。通过分析野生型拟南芥Col-0和cpk6突变体在Ca~(2+)、Fe~(2+)、Mg~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)二价阳离子缺失培养基上的生长表型,结果发现,拟南芥cpk6突变体在缺Ca~(2+)条件下,相对野生型Col-0,表现出生长受抑制的表型。构建含有CPK6启动子驱动β-葡萄糖苷酸酶基因(GUS)的转基因材料,通过GUS组织化学染色法,发现CPK6启动子在叶片生长点部位和根上有活性,并且在缺Ca~(2+)条件下,CPK6启动子在叶片中的活性明显增强。通过原子吸收光谱法,发现拟南芥野生型Col-0和cpk6突变体之间,在对照和缺Ca~(2+)条件下,总钙含量没有显著差别,表明CPK6基因不影响植物对钙的吸收和积累。利用组织化学染色法和荧光探针,结果发现,缺Ca~(2+)条件下,cpk6突变体根和叶中H2O2的积累量明显高于Col-0,表明CPK6是介导缺Ca~(2+)诱导植物积累H2O2的负调控因子。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
赵淑清 郭剑波
植物系统获得抗性 (SAR) ,是植物受到病原菌侵染后所激发的一种防卫反应。这种反应由植物抗病基因 (R)与病原菌无毒基因 (avr)的相互识别开始 ,由R基因下游的一些基因整合不同的抗病信号 ,通过水杨酸 (SA)将抗病信号传递下去。这一信号途径在SA下游受非诱导免疫 (NIM/NPR)基因的调控 ,激活NPR1可诱导病程相关蛋白 (PR)基因的表达 ,最终建立具有广谱抗性的SAR。SAR信号途径也可由模拟自然信号的化学物质激活 ,这些激活剂的应用是发展绿色化学农药的新思路。
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙琪 丛霞 索佳佳 曹荣峰 姜忠玲 崔凯 高善颂 田文儒
为证实热休克小鼠胎儿成纤维细胞中钙/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinaseⅡ,CaMKⅡ)对热休克蛋白70(Heat shock protein70,HSP70)基因表达的影响及其作用机理,将体外培养的小鼠胎儿成纤维细胞(Mouse Embryonic Fibroblasts,MEF)随机分为39℃和41℃热处理组(分别处理0.5,1,1.5,2 h)和常温对照组(37℃),测定各组细胞CaMKⅡ和HSF1 mRNA的量。此外,将培养的细胞分为37℃和39℃CaMKⅡ特异性抑制剂(myr-AIP)处理组和相应的空白对照组,分别测...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
彭抒昂 罗充 章文才
以梨为试材 ,对成花过程中CaM和核酸的含量进行了分析测定 ,结果表明 :短枝芽的CaM含量在成花的发端期成倍增加形成高峰 ,而新梢芽却一直保持较低的水平 ;短果枝叶的CaM与新梢叶有着相近的变化趋势 ,但在成花前后 ,短果枝叶的CaM含量要明显高于新梢叶的 ;短枝芽所含核酸、尤其是RNA开始回升时与CaM的峰值相吻合 ,并且在整个成花期间都呈上升的趋势。就成花过程中的CaM与核酸的关系及作用进行了讨论
关键词：
钙调素 核酸 梨 花芽分化
[期刊] 中国农业科学
[作者]
岳海林 邓秀新 彭抒昂
【目的】通过研究钙调素mRNA在梨(Pyrus pyrifolia NaKai)子房和幼果中的表达特性,探讨其在盛花后子房和幼果发育中的生理作用。【方法】以10年生黄花梨盛花前后子房和幼果为试材。Northern杂交检测钙调素基因表达水平。mRNA原位杂交进一步检测钙调素mRNA在梨子房和幼果发育过程中组织特异性表达。【结果】Northern杂交结果表明,钙调素基因在梨子房和幼果中的表达水平,花前逐渐上升,至盛花时最高,花后又下降。mRNA原位杂交结果表明,钙调素mRNA在梨果中的表达多集中于果皮、果肉、胚珠和果肉微管组织,而在果心的表达较少,且表达水平为果皮>果肉>果心,珠心>胚囊>珠被。在...
关键词：
钙调素mRNA 原位杂交 子房/幼果 梨
[期刊] 中国农业科学
[作者]
郑明学 古少鹏 王丽霞 韩克光 李宝钧
【目的】探讨柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)入侵细胞与钙信号转导之间的关系,揭示鸡柔嫩艾美耳球虫病的发生机制。【方法】采用体外狗肾细胞(madin-darby canine kidney cell,MDCK细胞)培养技术,检测了细胞外缺钙、Ca2+内流阻断剂(硝苯地平)和钙调蛋白抑制剂(三氟拉嗪)对E.tenella子孢子入侵率的影响,并测定了培养细胞上清液中乳酸脱氢酶(LDH)和细胞活性。【结果】E.tenella子孢子入侵细胞的抑制率随着细胞外Ca2+浓度的降低而升高。钙离子浓度降低到600μmol.L-1时,入侵率(23.33%)均极显著低于对照组(P<0.01);细胞外...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李晓芝 周人纲 樊志和 白娟
研究了小麦悬浮培养细胞及小麦幼苗高温锻炼过程中钙调素含量的变化规律。结果表明 ,小麦悬浮培养细胞或幼苗经 34℃锻炼均可引起钙调素的积累 ,Ca2 + 螯合剂EGTA对钙调素的积累具有抑制作用
关键词：
小麦 钙调素 高温锻炼
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
呼荣媚 孟冬 白松龄 胡建芳 李天忠
通过酵母双杂交的方法寻找苹果‘国光’花柱中与S-RNase互作的非S因子。以苹果‘国光’花柱为试材,构建了酵母cDNA文库,检测插入片段大小在300～2 000bp之间,符合库容要求。将S1-RNase成熟区cDNA序列S1-mat构建到pGBKT7载体上作为诱饵,筛选‘国光’花柱酵母cDNA文库。经文库筛选,获得一个大小为371bp的片段,与苹果全基因组序列比对后发现,该片段位于第9号染色体,其全长序列为552bp。NCBI BLAST比对及蛋白结构域分析显示其与拟南芥钙调素结合蛋白的同源性最高,且具有钙调素结合蛋白特有的磷酸二酯酶结构域。同时,酵母互作实验显示其与‘国光’花柱钙调素(CaM...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张红艳 彭抒昂
以贮藏性有明显差异的黄花梨和湘南梨为试材 ,研究果实发育过程中钙调素 (CaM )含量的变化。结果表明 :梨果实生长曲线为非典型的S型 ,湘南梨果肉CaM在果实发育前期含量较高 ,果实迅速膨大期CaM降至果实发育的波谷 ,果实采收前CaM出现峰值 ,采收时又下降。在果实迅速膨大期前 ,黄花梨果肉整体水平低于湘南梨 ,果实膨大期降到波谷 ,成熟前迅速升到峰值。梨种子发育曲线为典型的S型 ,盛花后 5 0d左右 ,种子即将进入迅速生长期 ,CaM含量出现峰值 ,2个品种峰值差异大。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
赵佳明 刘娇娇 王爱德 袁晖
南果梨是典型的呼吸跃变型果实,在室温贮藏条件下果实软化较快,其成熟过程主要受乙烯调控。EIN3(Ethylene Insensitive3)是乙烯信号转导途径中的重要转录因子,接受乙烯信号刺激后与下游基因的启动子结合,激活乙烯信号通路,进而引发乙烯反应并启动果实成熟。EIN3的蛋白水平主要受泛素化途径调控,负责调控EIN3泛素化降解的E3泛素连接酶是一类SCF(SKP1-CUL1-F-box-Rbx1)复合体,其中负责与EIN3识别的是EBF1和EBF2蛋白。但在梨中仍无关于EIN3受泛素化途径调控的相关报道。克隆南果梨中的EIN3基因及泛素化组分EBF1和EBF2,分别命名为PuEIN3,PuEBF1和PuEBF2;并对它们的互作关系进行验证。研究结果表明:PuEIN3全长1824 bp,编码607个氨基酸,含有5个基本结构域,符合EIN3的结构特征。PuEIN3的表达水平在贮藏过程中基本不发生变化;在乙烯和1-MCP处理的情况下,其表达水平也无明显的变化规律;PuEBF1的表达水平在南果梨贮藏过程中呈现先上升后下降的趋势;并且PuEBF1的表达受到乙烯的诱导,其中采后第10天最明显,乙烯处理之后的表达量约为对照的1.5倍;而1-MCP处理之后,几乎检测不到PuEBF1的表达。PuEBF2的表达水平没有明显的变化规律。酵母双杂交和Pull down试验结果显示PuEIN3能够与PuEBF1和PuEBF2互作。研究结果将有助于更加深入了解南果梨果实成熟软化过程,为从分子水平调控果实软化提供理论依据。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李恒 李锐 马景球
为研究仙人掌多糖(ODPs)对Toll样受体4(TLR4)及其转导的MyD88依赖性信号途径中下游重要元件髓样分化因子88(MyD88)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)、IκB激酶β(IKKβ) mRNA和蛋白表达的影响,体外培养小鼠腹腔单核巨噬细胞(RAW264.7),用ODPs干预24h,收集细胞,分别采用RT–PCR法和蛋白质印迹Western blot法检测TLR4、MyD88、TRAF6、IKKβmRNA及蛋白表达。结果显示:中、高剂量(100、200μg/mL)ODPs显著增强TLR4、TRAF6及IKKβ的基因表达及TLR4、MyD88、TRAF6的蛋白表达(P<0.05),且具有良好的量效关系;ODPs也显著降低了MyD88的基因表达(P<0.05),对IKKβ的蛋白表达量增强效果不显著。说明非炎性条件下ODPs可促使TLR4高表达,同时激活TLR4胞内信号转导的MyD88依赖性途径。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
崔伟康 杨鹏 廉法卓 夏明 徐金 尤华才 陈冬梅 宋圆圆
以过表达前系统素转基因番茄（３５Ｓ∷ｐｒｏＳｙＳ）、茉莉酸合成突变体番茄（Ｓｐｒ２）和野生型番茄（ＷＴ）为试验材料，研究了其被棉铃虫取食后叶片保护酶活性和防御反应基因表达情况，以及对棉铃虫抗性的影响．结果表明：棉铃虫取食不同基因型番茄叶片后，多酚氧化酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶和脂氧合酶活性在３５Ｓ∷ｐｒｏＳｙＳ植株中最高，在ＷＴ植株中次之，在Ｓｐｒ２植株中最低．荧光定量ｐＣｒ检测表明，棉铃虫取食不同基因型番茄叶片后，脂氧合酶基因、丙二烯氧化物环化酶基因和蛋白酶抑制剂基因的转录水平在３５Ｓ∷ｐｒｏＳｙＳ植株中最高，在ＷＴ植株中次之，而在Ｓｐｒ２植株中这些抗性基因的表达未受到虫害的诱导．生物测．．．
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番茄 棉铃虫 茉莉酸信号途径 诱导抗虫性
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