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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张书霞 华荣虹 鲍恩东
18只AA肉鸡于 2 2℃饲养。 30日龄时 ,随机分成 3组 ,分别进行 0 ,5和 10h的 4 1℃高温应激处理。用流式细胞仪检测胸腺细胞DNA含量、细胞凋亡率以及细胞caspase 3和Bcl 2的表达。结果 :应激处理 0 ,5和 10h时 ,(1)DNA合成期 (S期 )细胞比例分别是 2 77% ,3 2 8%和 2 31% ;(2 )胸腺细胞凋亡率分别是 3 99% ,11 15 %和3 31% ;(3)caspase 3表达阳性细胞率分别为 14 2 4 % ,2 7 0 1%和 10 84 % ,Bcl 2表达阳性细胞率分别是 2 0 5 9% ,15 13%和...
[期刊] 海洋水产研究
[作者]
车勇良 孙谧 欧阳五庆 姚如永 王跃军 王春波 张琇
观察扇贝多肽 (PolypeptidefromChlamysferreri) (PCF)对实验性氧化所致小鼠胸腺细胞凋亡的影响。采用台盼蓝 (TrypanBlue)活细胞拒染法在普通光学显微镜下观察细胞的存活率 ;以四甲基氮唑盐 (MTT)法测定细胞的增殖活性 ;以生化检测 (DNAladder)法观察PCF对细胞DNA片断化的影响 ;用透射电镜观察细胞的超微形态结构变化。台盼蓝染色法证实PCF能增强细胞的活性并与PCF浓度成正比 ;MTT法表明PCF不仅能保护细胞免受损伤 ,而且还能促进细胞的增殖 ,并有PCF依赖性 ;生化检测显示PCF能减少细胞凋亡的DNA片断化数目 ;细胞的超微结构还表...
关键词：
栉孔扇贝 过氧化氢 胸腺细胞 凋亡
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
杨敏 杨彩霞 李亚南 雷智琦 王根林 李莲
[目的]本试验旨在揭示胆碱对热应激诱导的奶牛乳腺上皮细胞凋亡的抑制作用。[方法]奶牛乳腺上皮细胞系(MAC-T细胞)于含10%胎牛血清的DMEM培养基中进行体外培养,将细胞分为对照组、胆碱组(100μmol·L~(-1))、热应激组(42℃,2 h)、热应激+胆碱组。采用CCK-8法分析添加胆碱对MAC-T细胞的药物毒性及细胞增殖活性的影响,采用Western blot分析蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)磷酸化水平及激活转录因子4(ATF-4)、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)和Bcl-2关联X(Bax)蛋白表达水平,RT-qPCR检测GRP78、CHOP、ATF-4、Bax、Bcl-2、Caspase-3(胱氨酸蛋白3基因)mRNA水平。[结果]与对照组相比,热应激组MAC-T细胞的相对存活率极显著降低(P<0.01),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量极显著升高(P<0.01),Bcl-2表达量极显著下降(P<0.05),p-PERK、ATF-4、CHOP、GRP78和Bax蛋白表达量均极显著下降(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量升高(P
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谭成明 房慧伶 胡庭俊
为探讨山豆根多糖对地塞米松诱导的小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡的影响,通过腹腔注射地塞米松建立小鼠胸腺和脾脏淋巴细胞凋亡模型,并采用琼脂糖凝胶电泳、透射电子显微镜和流式细胞术进行观察和检测。结果表明,除空白对照组外,其余各组的琼脂糖凝胶电泳图均出现梯状条带,而且透射电子显微镜观察凋亡对照组和不同剂量山豆根多糖组均可见典型的凋亡特征,胸腺和脾脏淋巴细胞的胞核染色质凝聚呈半月形、C形及凋亡小体,可见巨噬细胞吞噬凋亡小体。流式细胞仪分析显示,不同剂量山豆根多糖组凋亡率与凋亡对照组凋亡率比较有显著性差异(P
关键词：
山豆根多糖 小鼠 淋巴细胞 细胞凋亡
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
廖艳鹏 曾宇航 经岱昀 任超
为研究非复制型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫（Nonreplicating Toxoplasma uracil auxotrophs,NRTUAs）在转录组水平对雏鸡胸腺的免疫调节作用，本研究以接种NRTUAs虫株3 d的雏鸡为试验对象，利用RNA-seq技术对其胸腺组织进行转录组测序以挖掘其中的差异表达基因（DEGs），进而对得到的DEGs进行GO功能注释、KEGG信号通路富集分析和蛋白互作网络分析。结果表明：1）筛选出964个DEGs，其中517个基因表达上调，447个表达下调。2）通过GO功能注释发现差异基因在生物过程、细胞组分和分子功能三大类别显著富集在免疫应答、防御反应、对外界刺激反应、对刺激反应、细胞外区域、细胞表面等条目。3)KEGG信号通路富集分析发现DEGs显著集中在细胞因子及其受体相互作用、IgA产生的肠道免疫网络、细胞粘附分子、Toll样受体信号通路等通路上。4）通过蛋白互作网络分析发现9个重要的关键分子，其中IL-6和IL-18具有调节细胞分化促进干扰素产生的功能，IRF1和IRF7能够调节巨噬细胞等细胞的活化以及抗原递呈能力，SOCS1能够防止STAT1信号通路异常活跃而导致的过度炎症反应，CCL4、CCR5和CCL20作为趋化因子能够诱导多种免疫细胞浸润炎症区域，CD40能够增强抗原递呈进而调节机体的免疫功能。综上，NRTUAs虫株刺激雏鸡胸腺后，胸腺细胞的增殖活动减弱，T细胞活化以及细胞因子分泌等活动增强，并且IL-6、IL-18、IRF1、IRF7、SOCS1、CCL4、CCR5、CCL20和CD40是NRTUAs虫株调节雏鸡胸腺细胞的重要分子，本研究为深入探讨NRTUAs虫株调节家禽胸腺的先天性免疫反应的分子机制提供了理论依据。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
郭亮 杜娟 狄和双 李忠浩 王根林
用细胞流式、台盼蓝染色、免疫组织化学等方法研究单一高温(40℃1 h)或连续高温(40℃1 h.d-1)3~7 d对乳腺上皮细胞细胞周期、凋亡及热休克蛋白(HSP70)表达的影响。结果表明:40℃1 h单一高温处理乳腺上皮细胞后24 h,G2比例极显著高于对照组(37℃)(P<0.05)。结果提示:高温诱...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
蔡亚非 李莲 刘庆华 杜娟 徐世永 刘红林 王根林
用流式细胞记录仪检测分析奶牛在夏季 (日平均气温为 37 5℃)、夏末 (日平均气温 26 5℃) 和冬季 (日平均气温 5 5℃) 时奶牛外周血淋巴细胞DNA含量, 统计细胞所处的分裂时期及淋巴细胞的凋亡率, 并通过荧光定量PCR分析上述时期外周血淋巴细胞bax α基因mRNA表达量。结果显示: (1) G2 /M期细胞和淋巴细胞增殖指数随温度降低而呈明显的下降趋势, 5 5℃时比例最低, 相对于其他两个温度条件差异显著 (P
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王霞 邬静
以原代分离培养仔猪睾丸支持细胞为模型,经含不同浓度(0、2.5、5、10、20、40、80、160μmol/L)乙酸棉酚或40μmol/L乙酸棉酚加800μmol/L的乙酰半胱氨酸(NAC)的培养基培养24 h后,检测细胞增殖率、细胞内活性氧(ROS)水平和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性、培养基中乳酸脱氢酶(LDH)活性及细胞凋亡情况,研究棉酚对仔猪睾丸支持细胞的氧化应激及细胞凋亡的影响。结果显示:棉酚呈浓度依赖性抑制仔猪睾丸支持细胞增殖率,棉酚浓度大于等于10μmol/L时,细胞增殖率极显著降低;棉酚造成细胞内ROS水平显著升高、SOD活性显著降低、MDA含量升高及培养基中LDH活性升高;NAC显著抑制棉酚诱导的细胞内ROS水平升高、细胞增殖抑制及细胞凋亡。表明棉酚能诱导仔猪睾丸支持细胞凋亡,这可能与过量ROS生成而造成细胞氧化应激有关。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈秀霞 邓益锋 周振雷 朱捷 李晓兰 陈金丽 陶庆树 侯加法
为探讨雌激素和雄激素对鸡胚额骨成骨细胞(OB)增殖、凋亡、细胞周期及其受体mRNA转录的影响,用雌激素(17β雌二醇)和雄激素(十一酸睾酮)单独以及联合处理鸡胚额骨成骨细胞,MTT法测定细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期的变化,荧光定量PCR检测成骨细胞中雌激素受体(ER)及雄激素受体(AR)mRNA的转录。结果显示:一定浓度的雌激素或雄激素在24h内均能促进成骨细胞的增殖,促进成骨细胞的细胞周期进程,但对细胞凋亡无明显作用。雌激素单独或联合雄激素作用能上调ERmRNA的转录,对ARmRNA的转录无明显作用。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
汪纪仓 刘学忠 袁燕 裔传卉 卞建春 刘宗平
【目的】探讨氧化应激在镉诱导大鼠肝细胞凋亡中的作用。【方法】采用两步灌流法获得大鼠肝细胞,经过24 h培养,用醋酸镉处理细胞,或者Z-VAD-fmk、NAC和镉共同处理细胞。应用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率、细胞内ROS水平和线粒体膜电位,分光光度法检测caspase-3活性、GSH和MDA含量。【结果】结果表明,肝细胞暴露于浓度为2.5、5、10μmol.L-1的镉后,细胞相对存活率显著下降(P<0.01),凋亡率显著或极显著升高(P<0.05或P<0.0...
关键词：
镉 大鼠肝细胞 细胞凋亡 氧化应激
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张书霞 陈万芳 鲍恩东
用SPF来杭鸡复制MD肿瘤模型 ,取MD肿瘤组织和相同日龄鸡的正常组织 ,制成单个细胞悬液 ,碘化丙锭染色后 ,用流式细胞仪检测细胞DNA含量和细胞凋亡率。结果 :(1)MD肿瘤有二倍体肿瘤和异倍体肿瘤 ,31例MD肿瘤中2 6例为二倍体肿瘤 ,5例是异倍体肿瘤 ;(2 )MD肿瘤细胞动力学特点是 :DNA合成期 (S期 )细胞比例明显增加 ,肾、肝、卵巢和睾丸MD肿瘤细胞S期分别为 12 13 % ,11 30 % ,12 31%和 15 2 6 % ,相应组织细胞依次为 1 37% ,1 2 7% ,1 5 4%和 0 0 7% ,增殖指数 (proliferationindex ...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
顾有方 王珏 李升和 商常发 陈会良
将240只1日龄固始鸡随机分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组,常规饲养,分别在饮水中添加0、100、200、400 mg.L-1硼。试验期6周,每周每组取鸡10只,扑杀,取胸腺,称重,制作切片并观察。结果显示:Ⅱ组鸡胸腺重(TW)及胸腺/体重(TW/BW)1~3周低于或等于Ⅰ组(对照组),4~6周高于或显著高于对照组(P<0.05)或极显著低于对照组(P<0.01)。1~2周龄Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组鸡胸腺组织结构可见不同程度的退化现象,并与硼的添加量呈正相关,其中Ⅳ组胸腺组织结构明显萎缩,...
关键词：
硼 固始鸡 胸腺 发育 组织结构
[期刊] 华北农学报
[作者]
霍爱华 孙雪荣 于文慧 李华涛 李乐 李洪才 田文儒
拟探讨热应激诱导ＬＬＣ－ＰＫ１细胞线粒体凋亡相关因子的表达和活性情况，以及激活线粒体凋亡通路的时间。采用ｑＲＴ－ＰＣＲ方法和ＣａｓＰａｓｅ活性检测试剂盒分别检测４２℃热应激处理后０，２，４，８，１６ ｈ以及３７℃培养的ＬＬＣ－ＰＫ１细胞中ｈｓＰ７２、ＢＣＬ－２、Ｂａｘ、ａＩＦ和ＣｙＴ．Ｃ的基因表达以及ＣａｓＰａｓｅ－９和ＣａｓＰａｓｅ－３的活性。结果显示，４２℃热应激１ ｈ，ＬＬＣ－ＰＫ１细胞ＢＣＬ－２／Ｂａｘ（Ｐ＜０．０５）和ａＩＦ（Ｐ＜０．０１）基因表达以及ＣａｓＰａｓｅ－３（Ｐ＜０．０１）；ｈｓＰ７２基因表达和ＣａｓＰ．．．
关键词：
热应激 猪肾小管上皮细胞 线粒体凋亡
[期刊] 中国水产科学
[作者]
陈丹红 陈青青 田红艳 施华娟 刘文斌
本研究运用细胞生物学研究方法,探讨中草药提取物黄连素对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肝细胞(L8824)活力、氧化应激和细胞凋亡的影响。用不同浓度黄连素(0μmol/L、5μmol/L、25μmol/L、50μmol/L和100μmol/L)分别处理体外培养的草鱼肝细胞Oh、6 h、12 h和24 h,采用CCK-8法检测细胞活力。结果显示,黄连素浓度和时间对细胞活力有显著交互作用(P<0.05),且黄连素浓度对其活力影响差异显著(P<0.05),草鱼肝细胞活力随着黄连素的浓度增加先升高后降低(P
[期刊] 中国农业科学
[作者]
潘晓建 彭增起 周光宏 于纪棉 鲍恩东
【目的】研究宰前热应激对肉鸡胸肉pH、脂肪氧化和蛋白质氧化的影响,探讨热应激影响宰后肌肉蛋白质功能特性的机制。【方法】将30日龄AA肉鸡由(25±1)℃突然暴露在(40±1)℃高温中,并分别持续0、1、2、3和5h后,各处理组中随机抽取10只,宰杀后剥取的胸肌在4℃条件下成熟24h,测定鸡胸肉的pH、脂肪氧化产物MDA、蛋白羰基值和蛋白质功能特性的变化。【结果】与对照组相比,热应激处理组的鸡胸肉pH30min、pH24h呈现下降趋势(P<0.05),3h和5h处理组提高了胸肉脂肪氧化程度(P<0.01),2、3和5h处理组胸肉肌浆蛋白和肌原纤维蛋白氧化程度高于对照组(P<0.01),热应激时间...
关键词：
氧化 蛋白质 功能特性 热应激 鸡胸肉
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