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[期刊] 西南农业学报
[作者]
梁明山 杨晓娟 侯留计
烟草种子细小，１克种子约有１００００～１１０００粒，色泽一致，形态上难以辩别。对优良品种的鉴别，通常需要经过播种、管理等繁杂的培育工作，费力费时且不经济，给假劣种子以可乘之机。近年来，国内外已成功地用电泳技术鉴别小麦、水稻、大麦、玉米、大豆和蔬菜等品...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
翟旭光 潘志芬 商闯 邓光兵 余懋群
为了研究燕麦麦谷蛋白亚基组成及遗传多样性,本研究采用SDS-PAGE电泳方法对71份不同染色体组型的燕麦材料的麦谷蛋白,进行了电泳分析,并以中国春为参照,按条带迁移距离大小命名,分析条带多态性并以燕麦麦谷蛋白点泳图谱为依据对供试材料进行聚类分析。电泳结果显示燕麦麦谷蛋白主要集中在分子量较低的C区,高分子量麦谷蛋白没有检测到条带。71份燕麦材料共产生20种不同条带,条带g和条带i比较保守,出现的频率分别为64.8%和85.9%。各种条带组合形成62种不同的组合带型,多态性为87.3%。聚类结果显示燕麦麦谷蛋白的电泳谱型与材料的染色体组有很大关系,具有相同染色体组型的同种属的燕麦材料一般先聚为一类...
关键词：
燕麦 麦谷蛋白 SDS-PAGE 聚类
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
杨亚 朱列书 彭细桥 朱静娴 冯连军 刘伟
以烤烟品种K326为试验材料,研究Na2SeO3质量浓度(0.0、0.1、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0 mg/L)对烟草种子萌发的影响。结果表明:随硒质量浓度的提高,烟草种子集中萌发期提前,萌发速率加快,发芽势增强,发芽率提高;硒质量浓度在1.0 mg/L以上时,发芽势与发芽率均极显著高于对照,叶绿素含量呈降低趋势;硒质量浓度小于2.0 mg/L时,幼苗干重差异不显著,大于2.0 mg/L后幼苗干重减小趋势明显;发芽种子根系长度随硒质量浓度增加呈减小趋势;各处理综合评分以2.0 mg/L硒质量浓度处理最高,1.0 mg/L次之,20.0 mg/L最低;在漂浮育苗过程中,保...
关键词：
硒 烟草种子 萌发 发芽率 发芽势
[期刊] 林业科学研究
[作者]
薛建杰 曲良建 王玉珠 张永安 唐明 杨唯一
Hyphantria cuea nucleopolyhedrovirus(HcNPV) and several other nucleopolyhedrosis was extracted by differential centrifugation,and purified with sucrose gradient centrifugation method.Polyhedrin was gotten and analysed by SDS-PAGE.It indicated that most of those proteins had 32 KD protein band,and wi...
[期刊] 华北农学报
[作者]
杨延兵 王海莲 秦岭 张华文 管延安
醇溶蛋白是谷子籽粒主要的贮藏蛋白,研究谷子醇溶蛋白的差异对于谷子品种选育及种质鉴定评价有重要的意义。本研究利用SDS-PAGE方法对来自不同省份的46份谷子材料进行醇溶蛋白谱带分析,结果表明,单个品种可分离出14~24条醇溶蛋白谱带,平均每个品种18.74条带,46份品种共分离出32条醇溶蛋白谱带,其中7条为共有带,25条为多态性带,多态性带数占分离出总带数的78.1%。根据迁移率大小将醇溶蛋白谱带分为A、B、C、D四个区段,四个区段内分别有6、16、15、4种带型。在B、C区段醇溶蛋白有较丰富的多态性,A、B区段弱带较多,C、D区段强带较多。醇溶蛋白分子量在13.0~55.0 kDa之间,在...
关键词：
谷子 籽粒醇溶蛋白 遗传差异
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
包怡红 赵楠
以脱脂松仁粕为原料，采用ＯｓｂＯｒｎｅ法提取松仁粕中的球蛋白，设ｎａＣｌ质量分数（０．５％、１．０％、１．５％、２．０％、２．５％、３．０％）、料（质量，ｇ）液（体积，ｍ ｌ）比（１∶１０、１∶１５、１∶２０、１∶２５、１∶３０、１∶３５）、提取时间（３０、６０、９０、１２０、１５０、１８０ ｍｉｎ）和提取温度（４０、４５、５０、５５、６０、６５℃）４个单因素试验，再用响应面法优化松仁粕中球蛋白的提取工艺，并对其分子量进行分析。结果表明：当ｎａＣｌ质量分数为２．５％，料液比为１∶１５，提取时间为１５０ ｍｉｎ，提取温度为５６℃时，松仁粕中球蛋白的提取率较高，为１５．３２％；ｓＤｓ–Ｐａｇｅ分析．．．
[期刊] 华北农学报
[作者]
李亚青 刘彦军 傅大平 郭进考
对小麦单籽粒高分子量麦谷蛋白亚基(HMW-GS)电泳进行了研究,摸索出一套高分子量麦谷蛋白亚基组成成分分析的SDS-PAGE方法。该方法快速,准确,而且体系稳定,适合于大量检测小麦的高分子量麦谷蛋白亚基组成。
[期刊] 华北农学报
[作者]
曾广娟 李春敏 张新忠 陈东玫 赵永波 董文轩
为探索苹果叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、改良的Tris-HCl法、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法及Tris-HCl法等5种蛋白质的提取方法。制备的样品经SDS-PAGE分离采用银染显色。结果表明,改良的Tris-HCl法在加大PVPP用量和蛋白质提取缓冲液的基础上,将丙酮沉淀蛋白质的时间由30 min增加到1 h,使蛋白质的得率最高为3.243μg/μL,上样量5μL得到的蛋白质条带数量最多,条带最清晰为41条。利用这一改良方法对苹果实生树不同节位蛋白质的动态变化进行了研究,共发现6条蛋白...
关键词：
苹果 SDS-PAGE 蛋白质提取
[期刊] 西南农业学报
[作者]
潘威 马文广 郑昀晔 耿世兵
为更好判断烟草种子成熟度以指导采收，研究利用ＭＳ云烟８７和云烟９９种皮叶绿素荧光（ＣＦ）的变化来指示其成熟度。随着种子成熟度逐渐升高，２类种子种皮中叶绿素荧光在７～２０ ｄ逐渐增大，２０ ｄ左右达到最高，２０～３５ ｄ逐渐减弱。不同成熟阶段信号峰对应区间区分明显，指示清晰。ＣＦ越低，种子发芽率越高。相比传统方法，叶绿素荧光对种子成熟度指示更敏感、高效、稳定、准确，优势明显。
关键词：
叶绿素荧光 烟草种子 成熟度 发芽率
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王建平 王晓丽 王昌军 冀志霞 陈守文 喻子牛
用不同浓度聚-γ-谷氨酸(γ-PGA)溶液对烟草种子进行不同时间浸种处理,通过种子发芽率、种子活力与种子酶活性的变化,筛选出γ-PGA浸种的最佳浓度和时间;还研究了不同浓度γ-PGA溶液灌根对烟草苗期生长的影响。结果表明,用0.10~0.30 g/L的γ-PGA溶液浸种1~3 d可以提高烟草种子的发芽率、种子活力,缩短出苗时间。处理后的种子淀粉酶、过氧化物酶和过氧化氢酶的活性与对照相比均有不同程度的提高,以0.20g/L的γ-PGA溶液处理种子1 d效果最好。灌根试验表明,烟草苗期生长的最适γ-PGA浓度也为0.20 g/L。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
黄晓璪 陈青 薛朝阳 周雪平
从提纯病毒抽提基因组RNA ,并通过RT PCR扩增番茄花叶病毒 (ToMV)移动蛋白 (MP)基因。经克隆测序后插入植物表达载体PBI12 1的 35S启动子下游 ,通过PCR及酶切筛选分别获取正、反向插入的克隆 ,通过三亲交配导入农杆菌 ,叶盘转化法转化普通烟草。卡那霉素筛选获得一系列抗性小苗 ,对其进行PCR检测 ,Southern、Northern点杂交 ,Western blot检测 ,获得能正义、反义表达ToMVMP基因的转基因植株。
关键词：
番茄花叶病毒 移动蛋白 转基因 表达
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
商明清 梁元存 刘爱新 胡雪光 董汉松
用来自赤星病菌弱毒株的糖蛋白激发子处理烟草 ,能明显抑制烟草体内过氧化氢酶 (CAT)的活性 ,增加组织中H2 O2 的含量。诱导后 1dCAT活性就已开始下降 ,至第 6天下降到最低 ,以后又逐渐恢复。而H2 O2 含量的变化趋势与CAT活性的变化相反 ,随CAT活性的降低 ,组织中H2 O2 含量逐渐增加 ,在诱导后第 10天达到最大值。激发子处理烟草还可以诱导碱性PR蛋白基因PR 1b的表达 ;同时 ,烟草对赤星病强毒株的抗性逐渐增强 ,以诱导后第 10天接种抗性最强 ,且这种抗性是系统性的。水杨酸 (SA)处理后CAT及H2 O2 的变化与上述趋势类似。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙现超 李勇 周常勇 青玲
【目的】构建普通烟草铁氧还蛋白I(ferredoxin I,Fdn-Ⅰ)原核表达载体,表达可溶性Fdn-Ⅰ蛋白,并制备其多克隆抗体,分析Fdn-Ⅰ在ToMV侵染烟草叶片内的表达情况。【方法】以Fdn-Ⅰ全长cDNA为模板,用PCR扩增Fdn-Ⅰ,克隆至原核表达载体pEGX-6p-1,构建Fdn-Ⅰ与GST融合表达载体pEGX-Fdn-Ⅰ,重组质粒转化原核表达菌株BL21,优化GST-Fdn-Ⅰ可溶性表达条件后大量表达蛋白,用GST亲和层析法纯化获得可溶性GST-Fdn-Ⅰ蛋白,免疫家兔制备多克隆抗体。ELISA测定抗体效价,Western印迹法检测抗体的特异性和ToMV侵染前后烟草叶片内Fdn...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
乔艳艳 杨翠云 于翠 曹洁 马青 张丽莉
根据烟草环斑病毒外壳蛋白(TRSV-CP)基因的保守序列设计引物,采用RT-PCR方法,获得烟草环斑病毒基因组中编码外壳蛋白部分基因片段,将其插入原核表达载体pET28a中,获得重组表达质粒pET-CP,转化大肠杆菌BL21(DE3)后,利用IPTG诱导蛋白大量表达。重组蛋白经过Ni+-NTA纯化后,SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,TRSV-CP基因在大肠杆菌中获得了高效表达,产生的融合蛋白分子质量约为34 ku,并具有免疫学活性。以纯化的表达蛋白免疫新西兰大白兔,多抗血清效价达1∶409 600,可以与重组蛋白发生抗原抗体反应。
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