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[期刊] 华北农学报
[作者]
史宏志 于建军 刘国顺 Bush L P 江凯
以白肋烟为材料研究了采用乙烯利处理对烟碱转化株进行早期鉴定的有效性以及取样时间和部位对鉴定效果的影响。结果表明,乙烯利处理早期鉴定的转化株包括了所有调制后自然形成的转化株,还可以鉴别出一些在正常晾制条件下不能有效鉴别的低转化株;早期测定的烟碱转化率一般高于烟叶自然晾制后的烟碱转化率,有利于提高鉴定的准确性和有效性。根据鉴定结果将非转化株、低转化株和高转化株分别自交留种,后代群体分别有8.6%,59.8%和100%的转化株,表明鉴定方法是有效的,且通过转化株的鉴别和清除可以对品种进行有效改良。对转化株的鉴定从苗期到开花前都可以进行,移栽后4~6周取样测定更利于大批量处理和检测。不同部位叶片都可用...
关键词：
烟草 烟碱 降烟碱 转化株 乙烯利 鉴定
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
苏丹 林智慧 王雪仁 封磊 宋萍 韩晓刚 李航 游凯 刘洁 黄楠
为了解决烟草上部烟叶中烟碱含量偏高的行业问题以及应对烟碱污染的环境治理,从福建三明烟区的烟草植株中筛选得到1株具有高效降烟碱特性的内生菌Y5,对其生长、降烟碱特性以及代谢途径进行研究。结果表明:该菌株能够以烟碱为唯一碳源、氮源。经菌株形态和16S rDNA序列分析,菌株属于假单胞菌属(Pseudomonas sp.)。利用Slogistic模型对菌株生长情况拟合得到菌株Y5的生长延迟期为7.5h,最大比生长速率μ_(max)为0.0396 h~(-1)。烟碱浓度为0.5～2.0g·L~(-1)时菌株生长良好;pH为5.0～8.0时菌株具有较高的降解活性;接种量对菌株最终的降解率无显著影响。该菌株在烟碱浓度为0.5g·L~(-1)的无机盐培养基中,15 h内能够基本完全降解烟碱。菌株Y5降解烟碱的中间产物主要为尼古提林、脱甲基尼古丁、可铁宁、3-丙酰基吡啶和5-pyridin-3-yloxolan-2-one等物质,与已报道的假单胞菌属的吡咯烷途径不同。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李鑫 吴元华 顾晶晶 李立梅
采用病情指数调查、DAS-ELISA和生理生化指标测定的方法,研究了铁元素对烟草抗马铃薯Y病毒脉坏死株系(PVYN)的室内效果及对植株抗病性的诱导作用。结果表明:当烟草叶面喷施铁元素浓度为33.60 mg·L-1时,烟株显症时间要迟于对照,使病毒含量降低至7.31mg·mL-1,仅为对照的45%。单独喷施铁元素和喷施铁元素后再接种PVYN处理,均能提高烟株体内过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)和多酚氧化酶(PPO)活性,并且在短时间内使活性氧的生成速率提高1.6倍,叶绿素a的含量提高1.4倍,表明铁元素能诱导烟株防御反应的应答,但对苯丙氨酸解氨酶(PAL)影响不大。此外,铁元素处理后再...
关键词：
烟草 铁 马铃薯Y病毒 诱导抗性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
刘伟 王金信 杨广玲 隋标峰 鲁梅
【目的】以烟草(NC-82)为试验对象,运用组织培养方法,通过对苯磺隆对烟草愈伤组织抗性发展的影响、对愈伤组织生长的影响、对愈伤组织分化率的影响、对愈伤组织乙酰乳酸合成酶活性的影响和抗性筛选再生烟草苗抗性潜势进行较系统的研究,以期对ALS抑制剂类除草剂的抗性研究和科学合理使用以延缓抗药性的发生,以及对作物的抗性育种提供一定的理论依据。【方法】将烟草诱导产生的胚性愈伤组织在含有不同剂量磺酰脲类除草剂苯磺隆的MS培养基上继代培养进行抗性诱导,并对愈伤组织的生长情况及其ALS对苯磺隆敏感性进行跟踪检测;对抗性筛选再生烟草苗进行抗性检测。【结果】随着培养代数的增加,愈伤组织对苯磺隆的抗药性逐渐增强,经...
关键词：
烟草 苯磺隆 抗性诱导 组织培养
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
李鑫 吴元华 顾晶晶 赵秀香
通过气相色谱(GC)、高效液相色谱(HPLC)及生理生化指标的测定,研究了铜(Cu)元素诱导感染PVYN的烟株信号物质的积累及对系统抗性的影响。结果表明:喷施Cu元素能延迟烟株显症和叶脉出现褐色坏死时间,降低发病程度,病毒增殖受到抑制,烟株体内的与抗性相关物质如脯氨酸及可溶性糖含量升高,电解质的外渗减少。此外,Cu元素处理能诱导信号物质水杨酸和乙烯的积累,水杨酸含量在接种后15d达到最大量3.93μg·g-1,为接种对照的1.3倍;而乙烯释放量在3～9d内均高于接种对照,在12d时乙烯释放量显著低于接种对照,分析认为前期Cu元素处理后诱导了乙烯释放的增强,进行抗性信号的传递。因此,喷施Cu元素...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
商文静 吴云锋 赵小明 杜昱光 商鸿生
采用ELISA-DSM法和半叶枯斑法,研究了壳寡糖诱导对普通烟(Nicotiana tabacum)体内TMV 增殖的影响。结果表明,普通烟经50μg/mL壳寡糖溶液诱导处理后,其对TMV的侵染表达了高水平的系统抗病性,显症推迟4～7 d,平均严重度降低了82．9％。ELISA-DSM法检测结果表明,壳寡糖诱导处理的普通烟植株体内病毒浓度明显降低;在接种后10 d,接种叶片OD值仅为0．400,相当于同期不诱导对照的23．0%;新生叶片OD 值为0．190,相当于同期不诱导对照的38．7％。以发病普通烟叶片为接种体,利用半叶法接种心叶烟(Nicotiana glutinosa),结果表明,壳寡...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
史宏志 谢子发 李超 刘国顺 王涛 陈志华 马琳 李广永 鲁喜梅
采用气相色谱仪对我国不同产区白肋烟及四川不同品种调制后烟叶的生物碱组成和含量、烟碱转化株比例和烟碱转化率进行了测定分析。结果表明,四川白肋烟烟碱转化率显著高于其它产区,四川主栽品种宣汉-5存在严重的烟碱转化问题,其中种植面积较大的窄叶型品种的转化株比例高达96.0%,平均烟碱转化率为34.8%,宽叶型品种也较高。达白1号烟碱转化问题相对较小,3个地点的转化株比例分别为18.0%、18.0%和52.0%,平均烟碱转化率分别为3.5%、3.1%和14.3%,在经过改良后,有较高利用价值。鄂烟1号和TN90群体中也不同程度存在转化株。新配制的杂交种达白3号和达所24烟碱转化问题突出,转化株比例达10...
[期刊] 华北农学报
[作者]
李超 谢子发 史宏志 刘国顺 王涛 陈志华 马琳 杨兴有 鲁喜梅
采用气相色谱仪对我国不同产区白肋烟及四川省不同白肋烟品种调制后烟叶的生物碱组成和含量、烟碱转化株和烟碱转化率进行了测定分析。结果表明,四川白肋烟烟碱转化率显著高于其他产区,四川主栽品种宣汉-5存在严重的烟碱转化问题,其中种植面积较大的窄叶类型的转化株率高达96.0%,平均烟碱转化率为34.8%。达白1号烟碱转化问题相对较小,3个地点的转化株率分别为18.0%,18.0%和52.0%,平均烟碱转化率分别为3.5%,3.1%和14.3%,在经过改良后,有较高利用价值。鄂烟1号和TN90群体中也不同程度存在转化株。新配制的杂交种达白3号和达所24烟碱转化问题突出,转化株率达100%,需要进行系统选择...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄子彧 钟军 宋浩 黄德文 戴彬 戴林建
【目的】为了烟草胚状体诱导培养体系能得到优化。【方法】以2个烟草杂交品种的花药与叶片分别作为试验材料,对影响胚状体诱导的因子:基因型、外源激素浓度及比例、培养条件、接种密度等进行对比研究。【结果】所有的供试材料均可被诱导出烟草胚状体,但不同基因型间诱导率差异显著,且花药被诱导出胚状体的能力要强于叶片;在IAA与6-BA浓度不超过0.5 mg/L时,胚状体诱导率较不加激素能得到显著提升,超过该浓度后,随着激素浓度的提升反而会使胚状体诱导率下降,愈伤组织诱导率上升;进行10 d的暗处理能显著提升胚状体的诱导率。【结论】诱导胚状体产生的最佳培养条件为采用叶片为诱导材料,每培养皿接种35颗,使用1/2 MS+0.125 mg/L IAA+0.5 mg/L 6-BA培养基,在黑暗条件下诱导10 d后,再转移至光照下培养。
关键词：
烟草 体外培养 胚状体
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王荣 梁元存 王丹丹 刘爱新 孟庆伟
【目的】研究烟草细胞对parasiticein的反应,了解parasiticein诱导烟草细胞的PCD的发生机制。【方法】用浓度约100nmol·L-1的parasiticein处理烟草悬浮细胞,相差显微镜下观察细胞的形态变化。【结果】发现烟草细胞的细胞膜收缩,与细胞壁间形成空隙,原生质浓缩等;用trypanblue染色后观察到类似现象。对诱导处理的悬浮细胞经DAPI(4,6-diamino-2-phenylindole)染色后,通过荧光显微镜观察,发现细胞核先后表现染色质凝集、形成颗粒状等特征;对处理的悬浮细胞提取基因组DNA并进行琼脂糖凝胶电泳,可观察到梯状的DNA条带(DNA ladde...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
徐广博 李政 赵惠贤 刘香利 赵洁 刘丹 吴静
选择标记基因安全性问题是限制转基因植物商品化种植的重要因素。为了从转基因后代中诱导性剔除选择标记基因,本研究克隆了拟南芥热激蛋白Hsp18.2基因启动子,并构建了Hsp18.2启动子诱导表达的CinH/Rs位点特异性重组删除植物表达载体。结果表明,利用农杆菌介导法进行了烟草转化,转化后的烟草经过除草剂筛选和PCR检测,得到转基因阳性植株。本研究为利用位点特异性重组建立植物无标记基因转化体系奠定了基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
孔雯 先锋 李长影 王家昕 李晓华
以烟碱为唯一碳源,从湖北省襄樊烟草种植地中分离得到1株烟碱降解菌,命名为DBA5。经常规的形态观察、生理生化分析和16S rDNA序列同源性分析,初步鉴定该菌株为烟碱节杆菌属(Arthrobacter nicotianae)。当烟碱质量浓度为4.0 g/L时,培养48 h烟碱降解率为93.32%,生长旺盛。当烟碱质量浓度为5.0g/L时,培养48 h烟碱降解率为65.10%。当烟碱质量浓度高于6.0 g/L时,DBA5菌株生长和烟碱降解均呈下降趋势,烟碱降解率低于7.56%。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
程丹丹 孙学娟 高辉远 杨程 张立涛 孟庆伟
【目的】探讨赤星病菌代谢产物(metabolic products of Alternaria alternata,MP)对烟草BY-2细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)产生和ATP含量的影响以及产生这种影响的原因。【方法】用10%MP处理烟草BY-2细胞,用氧电极检测不同MP处理时间后,烟草BY-2细胞呼吸速率和呼吸途径的变化,同时分析BY-2细胞内H2O2产生和ATP含量等的变化。【结果】MP处理导致了烟草BY-2细胞H2O2爆发和ATP含量下降,此外,MP处理也导致了烟草BY-2细胞总呼吸速率、细胞色素途径(cytochrome pathway)和交替氧...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
肖田 姚廷山 于庆涛
为了探讨青枯无致病力菌株对烟草青枯病的控病作用和是否诱导烟草抗病及其控病机理。采用TTC培养基,从茄青枯病株上分离获到青枯无致病力菌株Au004-1,用喷雾法及含菌培养基法测定其对青枯致病菌的抑制作用,并进行烟草青枯病温室盆栽控病试验;用该菌伤根灌接烟草,然后用紫外分光光度计测定叶片的过氧化物酶(POD)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)和多酚氧化酶(PPO)活性,电泳分析病程相关蛋白(PRP)变化。结果发现,该菌株对青枯致病菌具有抑制作用,抑菌带宽分别1.03和0.83 cm;在温室盆栽试验中它对烟草青枯病具有较好的防效,接种致病菌30 d后相对防效可达77.5%;该菌处理的烟草苯丙氨酸解氨酶(PA...
关键词：
青枯菌 无致病力菌株 烟草 诱导抗病性
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
刘廷利 茹艳艳 刘莉 刘沛菡 窦道龙
CRN(crinkling and necrosis induced protein)蛋白是卵菌所特有的一类效应因子,在已经测序的疫霉种中,每个基因组中预测都含有上百个CRN基因,关于其功能和分子机制目前研究不多。前期研究发现,大豆疫霉效应因子PsCRN115是大豆疫霉的致病性必需因子且能抑制植物的细胞死亡。为了进一步研究PsCRN115的功能,本研究采用农杆菌渗入法介导的基因瞬时转化技术在烟草上过表达该基因,发现PsCRN115可显著提高烟草对烟草疫霉的抗性。随后采用荧光定量PCR研究了其作用机制,发现PsCRN115可诱导水杨酸(SA)通路防卫反应基因的高表达,但对乙烯(ET)和茉莉酸(J...
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大豆疫霉 效应因子 烟草抗性 防卫反应
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