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[期刊] 西南农业学报  [作者] 王赛贞  林占熺  林冬梅  林树钱  林志彬  李晶  
灵芝是我国传统大型药用真菌之一,属无隔担子菌亚纲,无褶菌目,灵芝科,灵芝属,常见的有赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.karst]、紫芝[Ganoderma sinense(Zhao,Xu et Zhang)][1]。从赤芝[Ganoderma lucidum(Curtis:Fr.)P.karst]多糖肽中分离纯化具有活性成分GL-PPS,对其进行结构分析。经分离纯化得GL-PPS,通过高效液相凝胶渗透色谱法(high-performance gel-permeation chromatography,HPGPC)、气相色谱、甲基化分析和Smith降解等方法研...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄在兴  刘凌云  陈华  翁伯琦  林占熺  刘朋虎  
【目的】研究菌草灵芝多糖肽(GL-PP)对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响,为GL-PP应用于肝癌治疗提供理论依据。【方法】用低(50μg/mL)、中(100μg/mL)、高(200μg/mL)3种不同浓度的GL-PP处理肝癌细胞Huh7,分别采用CCK8、Transwell方法、流式细胞仪分析不同浓度GL-PP对肝癌细胞Huh7活性、迁移和细胞凋亡的影响。【结果】培养基添加GL-PP后肝癌细胞Huh7活力降低,且GL-PP添加浓度越高活力降低越多,但是差异均不显著(P>0.05);GL-PP的浓度为100μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移无明显影响,当浓度为200μg/mL时对肝癌细胞Huh7的迁移具有明显的抑制作用;低浓度(50μg/mL)和中浓度(100μg/mL)的GL-PP对肝癌细胞Huh7的凋亡无明显影响(P>0.05),高浓度(200μg/mL)的GL-PP能够明显(P<0.05)诱导肝癌细胞Huh7的凋亡。【结论】GL-PP对肝癌细胞Huh7细胞活性影响不显著,高浓度的GL-PP可抑制肝癌细胞Huh7的迁移,也可诱导其凋亡。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 谢晶  周童晖  孙连月  李晶  林占熺  
使用CCK-8比色法研究菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对人结肠腺癌上皮细胞(Caco-2)存活率的影响;采用PCR检测JCGLPP作用不同时间后对Caco-2细胞中P-糖蛋白的编码基因MDR1和多药耐药相关蛋白-2的编码基因MRP2表达水平的影响.结果显示:0.1~500μg·mL~(-1) JCGLPP对Caco-2细胞无毒性;10μg·mL~(-1) JCGLPP作用1~48 h能抑制MDR1基因的表达,对MRP2基因的表达呈先抑后扬的趋势.表明JCGLPP可抑制MDR1基因的表达,对MRP2基因表达的影响与其作用时间有关.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 覃娟清   杜志坚   张富   秦莉雯   郭宇康   刘庆华  
【目的】研究日粮中添加菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对闽西南黑兔生长性能、血液生化指标及免疫功能的影响,为JCGLPP在肉兔中的应用提供依据。【方法】选取(33±2) d、初始体质量(655.65±25.90)g、健康状况良好的断奶闽西南黑兔公兔100只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加50,100和150 mg/kg JCGLPP的日粮,56 d后统计腹泻率和死亡率,测算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)以及料重比(F/G);屠宰后取背腰最长肌,测定pH值、滴水损失率和剪切力;采集血清,测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)质量浓度,尿素氮(UN)、丙二醛(MDA)浓度,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及IgG、IgA、IgM和IL-6质量浓度;计算心脏、肝脏、肾脏、圆小囊、脾脏、胸腺和蚓突器官指数;测定十二指肠、空肠、回肠黏膜炎性因子IL-1α、IL-2和分泌型免疫球蛋白(sIgA)质量浓度及肠道淀粉酶、纤维素酶和胰蛋白酶活性。【结果】(1)各组间兔的终末体质量、平均日增重、平均采食量和料重比均无显著差异(P>0.05);对照组兔的腹泻率和死亡率最高,Ⅱ组兔的腹泻率显著低于对照(P<0.05)。(2)试验组兔肌肉的pH、滴水损失和剪切力均与对照无显著差异(P>0.05)。(3)Ⅱ组兔血液中的TP、ALB质量浓度及SOD、GSH-Px活性显著高于对照(P<0.05),而UN和MDA浓度显著低于对照(P<0.05)。(4)Ⅱ组兔血液中的IgG、IgA、IgM质量浓度均显著高于对照(P<0.05),而IL-6质量浓度各组差异不显著(P>0.05)。(5)各组兔免疫器官指数差异均不显著(P>0.05);试验组兔十二指肠、空肠、回肠IL-1α、IL-2和sIgA质量浓度大多显著高于对照(P<0.05),肠道淀粉酶活性均显著低于对照(P<0.05),Ⅰ组兔的肠道纤维素酶和胰蛋白酶活性、Ⅱ组兔的肠道胰蛋白酶活性显著高于对照(P<0.05)。【结论】JCGLPP对闽西南黑兔的促生长作用不明显,但能提高机体的抗氧化和免疫能力,降低腹泻率和死亡率,添加量以100 mg/kg为宜。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 袁保京  张日俊  
为寻找适合灵芝胞外糖肽(EPSP)液体深层发酵工艺商业化生产的经济高效的培养基原料,在摇瓶水平上比较研究了不同类型的碳源和氮源(各6种)对灵芝胞外糖肽(EPSP)产量的影响。试验表明:玉米粉是最适合灵芝EPSP生产((2.664±0.801)g/L)和菌丝生长((4.559±0.150)g/L)的碳源;尿素是最适合灵芝EPSP生产((0.636±0.040)g/L)的氮源,豆粕粉则是最适合灵芝菌丝生长的氮源((2.222±0.256)g/L);玉米粉与豆粕粉组合是最适合灵芝EPSP生产((4.366±0.434)g/L)的碳氮源组合。本研究结果可为灵芝EPSP液体深层发酵工艺的工业化生产提供科...
[期刊] 华北农学报  [作者] 白丹  常迺滔  李大海  刘继霞  尤雪颜  
通过热水提取法提取灵芝多糖,得到灵芝粗多糖,并以3种植物病原菌(胡萝卜欧氏菌、指状青霉、灰葡萄孢)和5种食品有害菌(蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠杆菌、黑曲霉和黑根霉)为供试菌,采用纸片琼脂法来测定灵芝粗多糖对供试菌的抑菌强度。结果表明,灵芝粗多糖对植物病原菌中的胡萝卜欧氏菌有较强的抑制作用;对指状青霉菌有一定的抑制作用,但抑制作用较弱;对灰葡萄孢几乎没有抑制作用;对食品有害菌中的枯草芽孢杆和蜡状芽孢杆菌有很强的抑制作用;对大肠杆菌和黑曲霉抑制作用相对较弱;对黑根霉几乎没有抑制作用。总体来看,灵芝多糖对细菌的抑菌活性强于真菌。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 张宗源  蒋咏梅  章文贤  
【目的】组蛋白乙酰化修饰对真菌生长发育和次级代谢合成具有重要的调控作用。研究组蛋白乙酰化对静置培养的灵芝生长发育和主要代谢物合成的影响,为表观遗传手段提高灵芝多糖和灵芝酸生物合成提供理论依据。【方法】采用液体振荡-静置两阶段法培养灵芝。在静置培养阶段添加不同浓度(0、0.6、60、120和180μmol·L~(-1))辛二酰苯胺异羟肟酸(SAHA),采用常规方法测定或观察灵芝生物量、糖消耗、上层菌丝膜形成、菌丝体形态、灵芝孢子生成以及灵芝酸和灵芝多糖生物合成,利用蛋白免疫印迹技术测定灵芝组蛋白乙酰化水平;利用qRT-PCR技术对灵芝多糖(ugp、gls和pgm)、灵芝酸(hmgr、sqs、se和ls)生物合成关键基因以及灵芝全局调控因子相关基因(vet和LaeA)进行表达分析。【结果】SAHA处理使灵芝组蛋白H_4乙酰化水平提高,最高为对照组的1.6倍;抑制了灵芝菌丝体生长和色素产生,改变了菌丝体的形态。灵芝孢子的形成也受到抑制,且SAHA浓度越大,抑制程度越明显。SAHA处理显著增加了灵芝多糖的产量,最高增加50%;灵芝酸生物合成受到抑制,与对照相比降低13%—27%;qRT-PCR分析结果表明SAHA处理下灵芝多糖与灵芝酸合成关键酶基因表达均有不同程度上调,其中灵芝多糖合成关键酶基因提升1.5—3.5倍,灵芝酸合成关键酶基因提升1.8—12.1倍;灵芝全局性调控因子vet和LaeA的表达被抑制,仅为对照组的11.30%—62.4%。【结论】组蛋白乙酰化可通过灵芝全局调控因子调控灵芝生长发育进而影响灵芝酸生物合成,同时组蛋白乙酰化对灵芝多糖生物合也有影响。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 宁玉波  王红艳  乔康  刘秀梅  王开运  
【目的】诱导抗病剂可以诱导寄主植株产生系统抗病性,具有持效性和广谱性的特点。论文以番茄植株为模式植物,番茄灰霉菌(Botrytis cinerea)为目标菌,进行温室盆栽试验,以期明确灵芝多糖诱导剂对番茄灰霉病的诱导抗性。【方法】用一定质量浓度的灵芝多糖溶液(50、100、200和400 mg·L~(-1))喷雾处理盆栽番茄植株第1、2片真叶(正反面),每2 d喷施1次,共诱导3次,最后一次诱导2 d后全株喷雾接种供试菌孢子悬浮液((1—2)×10~6个孢子/m L),对照组施用等量清水代替灵芝多糖溶液,与各处理平行喷雾接种番茄灰霉菌孢子悬浮液。在接种孢子悬浮液之前用注射器将番茄苗茎基部刺伤,...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张丽霞  张雅君  张丽萍  
【目的】从灵芝孢子粉中提取纯化多糖,研究灵芝多糖对小鼠细胞免疫功能的影响,为灵芝开发利用提供试验依据。【方法】利用水煮醇沉法从灵芝孢子粉中提取粗多糖,经反复冻融、Sevag法脱蛋白和Sepharose CL-6B柱层析,纯化得灵芝多糖(GLP)。通过HPLC鉴定GLP的纯度,G.C.分析其单糖组成。采用MTT法、中性红试验、Griess法、比色法和ELISA法,分别检测GLP对小鼠脾淋巴细胞增殖、腹腔巨噬细胞吞噬功能、NO产量和iNOS活性以及TNF-α产量的影响。【结果】GLP为白色粉末,分子质量为51ku,HPLC分析GLP为单一狭窄对称峰,其单糖组成为葡萄糖(Glc)和半乳糖(Gal),...
[期刊] 华北农学报  [作者] 吴旋  白东清  杨广  宁博  张雪涛  孙立卓  
选取540尾黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco),连续投喂含不同水平灵芝多糖(300,600,900,1 200,1 500mg/kg)的配合饲料8周。而后采用Percoll密度梯度离心等技术,对黄颡鱼头肾巨噬细胞与外周血白细胞进行分离纯化,使用NBT还原法、Griesse试剂显色法与MTT法测定头肾巨噬细胞呼吸爆发活性与外周血白细胞的增殖能力,探讨灵芝多糖对黄颡鱼免疫细胞活性的影响。结果表明,灵芝多糖各水平组均能显著提高黄颡鱼头肾巨噬细胞的氧呼吸爆发活性和外周血白细胞的增殖能力(P
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王高学  徐翔  李素霞  
为研究α-甘露聚糖肽(M annatide)对鲫鱼免疫应答强度的影响,将α-甘露聚糖肽按每天每千克体重1.5 m g的剂量拌饵投喂鲫鱼,分别于7,14,21和28 d时检测各组鲫鱼吞噬细胞的杀菌活性、白细胞的吞噬活性、SOD酶活性和血清凝集抗体效价。结果表明,不同投喂周期均可增强鲫鱼的免疫应答强度;用药饵投喂7 d的试验组,7 d后免疫应答强度很快与对照组趋于一致;21 d和28 d投喂组的免疫应答强度差异不明显,但均显著(P
[期刊] 西南农业学报  [作者] 陈旭  曾茜  朱森林  杜慕云  刘璞玉  杨仁德  魏善元  
为了解灵芝南GL11菌丝的生物学特性,以菌落直径和菌丝体干重作为主要考察指标,结合菌落长势、菌丝球大小和均匀性等因素,采用固体和液体培养方法对菌丝生长曲线以及不同碳氮营养、p H和温度等条件下研究灵芝南GL11菌丝(体)的生长情况。结果表明:培养72~96 H为对数生长期,可溶性淀粉、蛋白胨可为母种培养基的优质碳氮源,初始p H 6.0和30℃为最佳条件;而在液体培养基中菌丝对于麦芽糖和蛋白胨的利用效果最好,并且当接种量为4%(v/v),在初始p H 8.0和26℃条件下有利于液体种的制备。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 何慧  谢笔钧  吕玉华  胡慰望  
研究了发酵灵芝粉中肽类化合物的分离及其生物活性。将发酵灵芝粉的水和醇提取物上离子交换树脂柱,依次用酸性、中性、碱性淋洗液洗脱分组,发现中性洗脱部分对羟基自由基抑制作用最强,抑制率最高可达81%;碱性洗脱部分亦具有抑制羟基自由基的效果;酸性洗脱部分抑制羟基自由基的作用不强,且占很少比例。经体外抗肿瘤试验,初步确定超滤膜过滤物具有较好地抑制肿瘤效果。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 王建东  唐玉林  王敏  张宝所  杨富强  高海慧  于洋  郭延生  
【目的】本试验旨在研究枸杞糖肽(LbGp)对环磷酰胺(CY)诱导雏鸡产生免疫抑制的调节作用。【方法】将200羽7日龄海兰蛋鸡随机分成5个组,每组40羽,即空白组(NC)、环磷酰胺组(CY)及LbGp高(LbGpH)、中(LbGpM)、低(LbGpL)3个剂量组,NC组肌注生理盐水,其余4组连续3 d肌注80 mg/(kg·d) CY进行造模,造模后LbGpH、LbGpM和LbGpL组连续7 d分别给予10、5、2.5 mg/(kg·d)LbGp。在首次给药后第7、14、21和28 天各随机选取5只鸡测定体重,脾脏指数,外周血淋巴细胞转化作用,并进行脾脏组织学分析。【结果】LbGpH显著提高了CY诱导免疫抑制雏鸡体重(P<0.05),LbGpM组能极显著提高CY诱导免疫抑制雏鸡体重(P<0.01);LbGpM组显著提高了CY诱导免疫抑制雏鸡脾脏指数(P<0.05);LbGpH和LbGpM组极显著提高了CY诱导免疫抑制雏鸡外周血淋巴细胞转化率(P<0.01);脾脏组织学结果显示,在首次给药后第14和21天LbGp各组生发中心个数显著高于CY组(P<0.05)。【结论】枸杞糖肽对环磷酰胺诱导的雏鸡免疫抑制有显著的拮抗作用,以中剂量组效果最佳。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 赵明文  陈明杰  王南  梁婉琪  尚晓冬  王晨光  曹哲民  张大兵  潘迎捷  
利用RAPD技术对生产中常用的灵芝属 8个菌株的亲缘关系进行了分析。根据UPGMA构建的树状图表明 :8个菌株在较低的相似水平上可以分成 3个明显不同的组 :第 1组包括黑芝 (Ganodermaatrum)、松杉灵芝 (Ganodermatsugae)、圆芝 (Ganodermarotundatum)、灵芝 0 770 (Ganodermalucidum 0 770 )和韩国灵芝 (GanodermalucidumHG) ;第 2组包括密纹灵芝 (Ganodermacrebrostriatum)和紫灵芝 (Ganodermasinense) ;第 3组为树舌灵芝 (Ganodermaappl...
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