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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王惠 张凤云 董金皋 商鸿生
用对峙培养法和生长速率法分别测定灰葡萄孢及其毒素对植物病原真菌的抑菌活性 ;用抑菌圈法测定毒素对植物病原细菌的抑菌活性 ;用浸渍法测定毒素的杀虫活性 ;以种子幼根幼芽生长抑制率为活性指标 ,测定毒素对杂草种子发芽力的抑制活性及对农作物种子发芽势的影响 ;在杂草出苗后喷施毒素 ,测定毒素对杂草幼苗的杀伤活性和对出苗后农作物生长的影响。结果发现 ,3d内灰葡萄孢毒素对小麦纹枯病菌、小麦根腐病菌和小麦赤霉病菌的抑制率达 5 6 %以上 ;1d内毒素对马铃薯环腐病原细菌的抑菌圈直径为 6 mm,对白菜软腐病原细菌的抑菌圈直径为 9m m;毒素原液对黏虫、小菜蛾和菜青虫的杀伤活性很小 ,对反枝苋和牵牛花...
关键词：
灰葡萄孢 毒素 抑菌活性 除草活性
[期刊] 中国农业科学
[作者]
张金林 徐扩 李川 马娟 董金皋
对灰葡萄孢BC4菌株进行紫外线诱变得到了15个诱变菌株,经测定筛选出BC4-1、BC4-2和BC4-15等3个诱变菌株中以BC4-1菌株效果最好。试验发现,用于毒素产生的PD培养基的pH值对产毒能力影响很大,以pH4.0最优。用三氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯萃取培养滤液制备BC-粗毒素,生物测定结果表明,以乙酸乙酯萃取所得粗毒素对杂草种子萌发及生长抑制作用最强。通过柱层析法和HPLC法分离和纯化除草活性组分,得到1个在271nm有最大UV吸收的化合物,该组分在100mg·L-1浓度下对马唐的生长具有强烈的抑制作用,在50mg·L-1浓度下可完全抑制马唐和反枝苋种子的萌发。
[期刊] 华北农学报
[作者]
曾琳姣 黄金海 刘莹 庄世文 薛照辉
采用原核表达系统表达、亲和纯化重组蛋白、Western-blot、MTT比色法及同源模建的方法,分析了新型葡萄球菌肠毒素SEQ的生物学活性及其与结构的关系,预测了发挥超抗原活性的功能位点。结果表明,表达纯化的可溶性重组GST-SEQ、His-SEQ蛋白表达量分别占菌体蛋白的20%和25%,且均具有良好的免疫原性以及诱导小鼠脾淋巴细胞分化增殖的能力,SEQ成熟肽中α-螺旋、β-折叠、无规则蜷曲分别约32,68,116aa;SEQ毒素潜在的与MHCⅡVβ链结合的关键位点为H169、H207、D209,而与TCR的结合域位于α3-β8环区域。2种重组SEQ肠毒素均具有超抗原活性,这与其存在于细胞MH...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
杨红玉 夏绍嫘 吴嘉 杨黎江 侯思名
以拟南芥为材料,研究外源一氧化氮供体硝普钠(SNP)对经灰葡萄孢菌分泌的大分子毒素处理后植物幼苗的生长,以及叶片中过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量的影响。结果表明,SNP能缓解大分子毒素对拟南芥幼苗的毒性作用,促进毒素处理后幼苗的生长。同时,SNP能显著提高拟南芥叶片中POD活性,而对SOD活性则影响不明显,且显著降低MDA的含量。说明SNP可能通过增强POD活性,降低MDA含量来增强植物的抗毒性。
关键词：
大分子毒素 一氧化氮 灰葡萄孢菌 拟南芥
[期刊] 华北农学报
[作者]
孙文元 翟玉柱 赵凤岩
草莓灰霉病菌(Botrytis Ciennea Persoon)在 21～25℃下 pH 3～4的霉菌生长培养基中培养产生毒素,致使草莓愈伤组织细胞的活性丧失。产生毒素的高峰期在静置培养20 d,培养滤液用氯仿萃取,所得粗提物稀释90倍后仍有毒性存在,30倍稀释的毒素溶液处理愈伤组织,用荧光法观察,1.0h细胞致死率达86％,2.5 h细胞致死率高达99.9％。
关键词：
草莓灰霉病菌 毒素 荧光
[期刊] 西南农业学报
[作者]
伍晔晖 孟庆玲 乔军 李静 蔡扩军 王登峰 才学鹏
【目的】检测奶牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)新疆分离株生物被膜、肠毒素基因分布与毒力,分析其内在联系。【方法】采用微量滴定板测定法(MPA)、PCR方法和寇氏改良法分别测定164株S.aureus新疆分离株生物被膜(BF)形成能力、肠毒素基因分布、小鼠半数致死量(LD_(50))和脏器载菌量,观察其病理组织学变化。【结果】164株S.aureus BF阳性率为83.4%,以弱BF(BF~+)菌株为主;肠毒素基因检出率为96.3%,传统肠毒素see和新型肠毒素seg检出率最高,分别为57.3%和81.1%;强BF菌株(BF~(3+))LD_(50)要高于弱BF菌株(BF~+)和阴性菌株(BF~-),但其脏器载菌量低于BF~-菌株(P<0.05)。【结论】奶牛源S.aureus新疆分离株BF阳性菌株所占比例较高,其肠毒素基因携带率也较高。毒力研究表明,S.aureus分离株BF~(3+)菌株脏器载菌量低于BF~-菌株(P<0.05),且随着BF形成能力的增强毒力相应减弱。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
袁月 周如军 傅俊范 卢占慧 史晓琪 李自博
为了探究人参灰霉病新流行成因，对来源不同寄主和地区的１６株灰葡萄孢（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ ｃｉｎｅｒｅａ）菌株的生物学特性及致病力进行比较。结果表明：供试菌株在ＰＤａ和Ｐｓａ培养基上生长较好，ＰＪａｒ１、ＰＪａＬ３、ＰｙｃＬ１和ＰＪＬＬ１最适培养基为Ｐｓａ，ＦｓｙＬ１、ＰＪａＬ１、ＰＪａＬ２、ＰｙＬＬ１、ＰＢＬＬ１、ＰＱａＬ１、ＰＨＬＬ１和ＬｓｙＦ１最适培养基为ＰＤａ，其余菌株最适培养基为查氏培养基；菌丝生长温度范围均为５～２５℃，ＦｓｙＬ１、ＰＪＬＬ２、ＰｒＨＬ１、ＰＨＬＬ１和ＬｓｙＦ２最适生长温度为２５℃，其余菌株在２０℃时生长最快；供试菌株在Ｐ Ｈ值３～１１的范围内均能生长，ＰｙｃＬ１和Ｌｓ．．．
关键词：
人参 灰霉病 生物学 致病性
[期刊] 华北农学报
[作者]
鄢洪海 张茹琴 迟玉成 林海洋 许曼琳 夏淑春
为了明确花生黑斑病菌的致病因子及致病机制，对该病菌分泌的毒素进行了提取和生物学特性测定。通过对花生黑斑病菌毒素产生条件筛选和优化，采用氯仿提取、硫酸铵和柱层析分离纯化病菌产生毒素。结果表明：花生黑斑病菌在Ｖ８培养液、光／暗交替、静止条件下培养２０ ｄ产毒活性最强，用等量的氯仿提取，再经过８０％饱和度的硫酸铵沉淀透析和柱层析纯化，可以获得较高活性的花生黑斑病菌毒素。初步分析显示，毒素由Ａ和Ｂ ２种成分构成，但仅Ａ成分对花生有致病性，Ｂ成分没有，Ａ成分是毒素的主要成分；另外，病菌毒素具有一定的热稳定性和较强的极性。
关键词：
花生黑斑病菌 毒素 培养条件 生物学特性
[期刊] 华北农学报
[作者]
闫芝芬 张红心 崔四平 王立安 魏建昆
稻瘟病菌９０－２菌株系是从大田水稻雄性不育细胞质（ＣＭＳ）上分离的对野败型（Ｗ）ＣＭＳ专化致病的生理小种。研究表明，该菌株产生的毒素在致病过程中起着一定作用。本试验测定了此菌株在不同ｐＨ培养基中培养对毒素产生的影响、毒素的热稳定性及ｐＨ值变化对毒素活性的影响等。离体叶片法测定毒素活性发现毒素使离体叶段褪绿和细胞坏死，珍汕９７Ａ褪绿程度大于珍汕９７Ｂ，进一步测定了毒素对Ｗ珍汕９７Ａ、９７Ｂ叶绿素总含量的影响和对Ｗ珍汕９７Ａ、９７Ｂ呼吸作用的影响，初步测定了粗毒素的致病作用。用根冠细胞法测定了９０－２菌株毒素对一套４种同核异质ＣＭＳ材料的致病力，表明稻瘟病菌９０－２菌株是ＣＭＳ野败型的专化生理小种...
关键词：
水稻,稻瘟病菌,毒素,雄性不育细胞质
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王桂清 孙华
以辽细辛精油为材料,以黄瓜灰霉病致病菌灰葡萄孢菌为靶标,利用紫外可见分光光度计,采用比色法在离体条件下测定了辽细辛精油对灰葡萄孢菌细胞壁降解酶活性的影响。结果表明:辽细辛精油对果胶甲基半乳糖醛酸酶(pectin methylgalactuionase,PMG)、胞内果胶甲基反式消除酶(pectin methyltrans-eliminase,PMTE)、果胶总酶、胞内1,2-β-D葡聚糖酶(C1酶)、胞外羧甲基纤维素酶(Cx酶)和蛋白酶均主要表现为激活作用;对胞外PMTE酶和胞内C1酶表现为抑制作用;激活/抑制作用与精油浓度之间不成比例关系。这说明辽细辛精油对灰葡萄孢菌细胞壁降解酶活性的影响不...
关键词：
辽细辛精油 灰葡萄孢菌 细胞壁降解酶
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
王桂清 孙华
以辽细辛精油为材料,以黄瓜灰霉病菌即灰葡萄孢菌为靶标,在活体条件下,利用紫外可见分光光度计,采用比色法,研究了辽细辛精油对灰葡萄孢菌细胞壁降解酶活性的影响。结果表明:辽细辛精油对胞外PMTE酶、果胶总酶、胞外C1酶和蛋白酶表现为激活作用,对PMG酶和胞内C1酶则表现为先激活后抑制再激活作用,对胞内PMTE酶主要表现为抑制作用;对Cx酶表现为完全的抑制作用,且酶活抑制率与精油浓度成正比。说明Cx酶可能是辽细辛精油的作用位点之一,对Cx酶的抑制作用可能是辽细辛精油对灰葡萄孢菌的抑菌机制之一。
关键词：
辽细辛精油 灰葡萄孢菌 细胞壁降解酶
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
彭文文 张海江 张建 王惠
以灰葡萄孢培养滤液对反枝苋种子根芽生长的抑制率为活性指标,测定了培养滤液的除草活性,并探索了不同碳源和培养条件对培养滤液除草活性的影响。结果表明,蔗糖+葡萄糖(质量比3∶2)是较好的碳源组成;光照条件和温度是灰葡萄孢培养滤液除草活性的主效因素,在25℃和避光条件下培养得到的培养滤液活性最高;在培养液中添加8g/L乙酸钠可使培养滤液除草活性达到91.2%。
关键词：
灰葡萄孢 除草活性 主效因素
[期刊] 华北农学报
[作者]
王敏 刘媛媛 周帆 姜婷婷 郑旭 张靖 时翠平 邢继红 董金皋
为构建灰葡萄孢犬尿氨酸单加氧酶(Bc KMO)基因的原核表达载体并进行高效表达,获得纯化的Bc KMO蛋白。以灰葡萄孢野生型BC22为试材,通过反转录PCR扩增Bc KMO基因,回收Bc KMO基因片段克隆到p MD19-T载体中,测序正确后,酶切p MD19-T-Bc KMO和带有GST标签蛋白的p GEX4T-1质粒,将目的片段进行连接,构建Bc KMO基因的原核表达载体p GEX4T-1-Bc KMO-GST。经酶切和测序鉴定正确后,将构建好的原核载体转化大肠杆菌BL21。经IPTG诱导,在大肠杆菌
[期刊] 中国农业科学
[作者]
黄燕 朱振东 段灿星 武小菲 东方阳
【目的】灰葡萄孢是引起蚕豆赤斑病、花腐病和荚腐病的重要病原菌,其为包含两个称作类群I和类群II的复合种,具有高度的遗传变异。然而,危害蚕豆的灰葡萄孢复合种地位及遗传特征尚未被研究。论文旨在对中国6个不同地理来源蚕豆灰葡萄孢复合种的地位进行鉴定,研究其遗传多样性及群体间的遗传分化,为探明病害流行规律及制定防治策略提供依据。【方法】在PDA培养基上观察分离物形态特征。用Flipper和Boty特异性引物检测分离物的转座子基因型。葡萄孢复合种所属类群通过Bc-hch基因的PCR扩增酶切多态性鉴定,SSR标记分析解析其遗传多样性和遗传分化。【结果】100个灰葡萄孢分离物均为灰葡萄孢类群II,共产生菌核...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
杨静 杨军 黄继超 何玮玲 张驰 黄明
【目的】研究食源性金黄色葡萄球菌各血清型肠毒素基因的分布,并进一步分析其时序性表达规律。【方法】针对51株各类食品中分离的金黄色葡萄球菌菌株,应用PCR技术对11种葡萄球菌肠毒素进行基因分型;提取细菌总RNA,以ftsZ和ropB作为内标基因,使用反转录荧光定量PCR研究各肠毒素基因在细菌生长周期中的表达水平变化。【结果】除see、ses和set外,其余8种肠毒素基因在51株食源性金黄色葡萄球菌菌株中均有检出,且sei和seg的检出率最高(27.45%)。各肠毒素基因在mRNA水平的时序性表达规律基本一致,均在对数后期达到峰值,随后快速下降。以内标基因为参照,同一菌株中不同肠毒素基因的相对表达...
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