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[期刊] 西南农业学报
[作者]
孙年喜 李隆云 崔广林
本试验对灰毡毛忍冬开花进程和昆虫访花特性进行了观察,采用离体培养法测定了花粉活力,用联苯胺-过氧化氢法和套袋测定柱头可授性,运用杂交指数、花粉-胚珠比、套袋实验对灰毡毛忍冬繁育系统进行研究。结果表明,灰毡毛忍冬群体花期约30 d,单株花期约16 d,单花花期2～3 d。灰毡毛忍冬开花前12 h至开花后36 h柱头可授性强,而花粉活力以开花当天正午时最高。灰毡毛忍冬传粉昆虫以膜翅目和鳞翅目昆虫为主,它们的活动对灰毡毛忍冬的传粉起到了重要的作用。杂交指数OCI=4,判断繁育系统为异交,部分自交亲和,需要传粉者;花粉-胚珠比P/O约为664.4,繁育系统为兼性异交;套袋实验测定自交结实率3.03%,...
关键词：
灰毡毛忍冬 开花特性 繁育系统
[期刊] 西南农业学报
[作者]
蒋娜 李群
将灰毡毛忍冬茎段和叶片接种在MS培养基中,并在培养基中添加不同浓度的生长素2,4-D,6-BA,NAA,以此探讨茎段和叶片2种外植体在不同浓度的生长素组合中愈伤组织的诱导和增殖情况。结果表明:叶片诱导愈伤组织的效果比茎段好,并且叶片和茎段诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS+2,4-D 1.0 mg/L+6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L。
关键词：
灰毡毛忍冬 愈伤组织 诱导 增殖
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄艳花 崔忠吉 欧善生 黄远光 蒙成 李杨秀
【目的】鉴定西番莲顶枯病病原菌种类，明确其分类地位，为西番莲顶枯病的科学防控及西番莲产业的持续快速发展提供理论依据。【方法】采用植物组织分离法对首次在广西南宁市发现为害西番莲的新病害——西番莲顶枯病进行病原菌分离，测定其致病性，观察其形态特征，分析其核糖体转录间隔区（ITS）、钙调蛋白（CAL）和交配型基因（ApMat）的基因序列，鉴定引起西番莲顶枯病的病原菌。【结果】从具有典型西番莲顶枯病症状植株中分离到同一形态真菌，命名为TK2A2CLA6菌株，其孢子与自然发病西番莲枝条上切片观察到的病原菌孢子形态一致，进行顶芽接种致病性测定均能发病，且发病症状与自然发病症状一致，再分离得到的病原菌与原接种病原菌相同。TK2A2CLA6菌株菌落圆形或近圆形，正面产生发达且较致密的灰白色气生菌丝；菌落背面初期为浅黄色，后期中央浅墨色、周围浅黄色，在PDA培养基上培养7 d后偶有橙色孢子堆产生；菌丝平均生长速率为18.89 mm/d；分生孢子无色，近圆柱状钝圆，另一端钝圆或略细，一般具1～2个油球，大小为(13.03～17.75)μm×(3.75～5.25)μm。对TK2A2CLA6菌株的ITS V1～V4区、CAL和ApMat基因序列进行PCR扩增，将基因序列在NCBI中进行BLAST比对分析，发现其与暹罗炭疽菌（Colletotrichum siamense）多个序列的同源性达100%。以ITS、CAL和ApMat基因序列进行多基因系统发育进化树分析，TK2A2CLA6菌株与C. siamense LF177和C. siamense JH-Coll001以100%的自展支持率聚为独立的1支，确定引起西番莲顶枯病的致病菌为暹罗炭疽菌。【结论】使用形态学方法结合多基因系统进化树分析，明确危害广西南宁西番莲顶枯病的病原菌为暹罗炭疽菌。
[期刊] 华北农学报
[作者]
李淑斌 张颢
采用温室接种致病性测定、形态学观察和分子鉴定方法对柏木枯萎病病原进行了研究。从云南省昆明市、石林县及玉溪市采集柏木枯萎病病样13份,分离获得来自柏木树根部、茎干及枝的18个真菌分离物。经过致病性试验证实,分离物CWC1-CWC10均为柏木枯萎病病原菌。经形态学鉴定,CWC1-CWC10均为Neofusicoccum parvum。利用rDNA internal transcribed spacer region(ITSI-5.8S-ITS2)进行PCR扩增,并将测序结果在GenBank中进行同源性比对分析显示,其rDNA ITS序列分析结果表明该菌与N.parvum的同源性为99%,分子鉴定与...
关键词：
枯萎病 形态学观察 分子鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
靳增军 刘春琴 甄文超 曹克强 王庆雷 杜凤华
近年在河北省、山东省等地的冬枣果实上发现一种新病害—冬枣黑疔病,又称黑斑病或果实黑点病。经2004-2005年在河北省和山东省7市县调查,从18批次219个冬枣病果样品中分离得到653个分离物,经筛选、纯化和回接试验,依照柯赫氏法则对冬枣黑疔病病原菌进行了研究,根据病原菌的形态特征,病原菌鉴定为毁灭茎点霉Phoma destructivaPlowr.和细交链孢Alternaria alternata(Fr.)Keissler。
关键词：
冬枣 黑疔病 病原菌鉴定
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
龙丽君 马英姿 曾慧杰 李昌珠 张岗 刘思思 李依民
【目的】克隆灰毡毛忍冬MADS-box家族基因SOC1(SUPPRESSOR OF OVEREXPRESSION OF CO 1)，对其进行生物信息学和表达模式分析，为探究灰毡毛忍冬花冠不开放机制奠定理论基础。【方法】基于花蕾型灰毡毛忍冬转录组数据，筛选到开花调控基因LmSOC1的Unigene序列并克隆全长cDNA序列，通过生物信息学分析和实时荧光定量PCR技术分析编码蛋白特性和不同品种中LmSOC1基因的表达特异性，最后将LmSOC1基因插入到原核表达质粒载体pTOPO-D1中，并在表达宿主BL21(DE3)中进行蛋白表达。【结果】LmSOC1基因包含645 bp的ORF区，LmSOC1蛋白不含信号肽、无跨膜区，为稳定的亲水性蛋白。系统进化树分析表明，LmSOC1蛋白与黄花蒿、榴莲、可可等的SOC1蛋白亲缘关系更近。实时荧光定量PCR分析表明，在2个花蕾型灰毡毛忍冬品种的花蕾和叶片中均检测到LmSOC1基因的表达，而叶片中表达量明显高于花蕾。同时，在早期花蕾中LmSOC1基因的表达量高于晚期花蕾，在‘金翠蕾’品种中这一表达差异极显著（P <0.01）。最后成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达出重组蛋白。【结论】通过对LmSOC1基因的克隆和表达分析发现，该基因可能在灰毡毛忍冬花器官发育过程中发挥重要作用，为进一步研究该基因在植物花发育中的生物学功能奠定了基础。
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
严雪瑞 胡梦琼 王旭 赵志慧 代汉萍 傅俊范 李天来
在江西蓝莓产区的病害调查过程中，发现一种由镰孢菌侵染的叶部新病害，主要引起叶片枯萎，进行病原菌的分类鉴定将为病原学及该病害综合防控提供前期基础。病原菌的分离采用二步分离法，组织分离之后采取单孢分离。致病菌的确定依据柯赫氏法则。病原菌的鉴定方法依靠表型特征鉴定，同时辅助ＩＴＳ和ＴＥＦ－１α序列进行分子鉴定。引致江西地区蓝莓叶枯病的致病菌为ＪＸ０３ＡＡ，经表型鉴定与分子鉴定表明该病菌为亚细亚镰孢菌（ＦｕＳＡｒＩｕｍ ＡＳＩＡＴＩｃｕｍ）。江西地区发生的蓝莓叶枯病由亚细亚镰孢菌侵染所致，蓝莓是亚细亚镰孢菌的新记录寄主。
关键词：
蓝莓 叶枯病 亚细亚镰孢菌
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王小秋 葛礼姣 仇亮 翟彩娇 王广达 宋益民 程玉静
从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。
关键词：
蘘荷 病原菌 尖孢镰刀菌 生物学特性
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
范绍斌 苏济钰 樊改丽 阮志平 张华峰 胡艳萍 贾悦 梁欣妤 王宗华 胡红莉
近年来，福建省厦门市园林植物园内的酒瓶椰子频发叶枯病，影响了植株的正常生长，降低了酒瓶椰子的观赏价值。从厦门市园林植物园收集了12份感病的酒瓶椰子叶片样品，通过分离和纯化，得到5个类拟盘多毛孢属真菌菌株。结合其形态特征和基于3个基因（ITS、TUB2和TEF1）的系统发育分析结果，这5个菌株被鉴定为Neopestalotiopsis cubana、Pestalotiopsis diploclisiae、P. humicola、P. neolitseae和Pseudopestalotiopsis theae。柯赫氏法则验证结果显示，N. cubana、P. diploclisiae、P. humicola和Ps. theae可以引起酒瓶椰子的叶片发病，而P. neolitseae不能侵染酒瓶椰子的叶片，表明N. cubana、P. diploclisiae、P. humicola和Ps. theae是引起酒瓶椰子叶枯病的病原菌。这是新拟盘多毛孢属真菌和假拟盘多毛孢属真菌在酒瓶椰子上的首次报道。其中，N. cubana为我国首次发现。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
许恬 黄大明 李蓉 黄怡婷 李杏蔚 张磊 覃茜
【目的】明确造成南宁植物园青秀山苏铁园内苏铁叶片干枯的病因，研究防治手段，为有效保护苏铁种质资源提供理论基础。【方法】采集不同发病苏铁植株上的枯萎叶片样本113个，使用平板培养及稀释分离法将病原真菌进行分离纯化，通过柯赫氏法则测定分离菌株致病力，依据形态学及分子生物学鉴定等手段对所获得分离株进行物种鉴定，选取代森锰锌、啶氧菌酯、苯甲·丙环唑、苯甲·嘧菌酯、氟菌·肟菌酯、氯氟醚·吡唑酯和百菌清等7种杀菌剂对病原菌进行室内药效试验。【结果】通过对枯萎组织的微生物分离纯化，共获得72株分离菌株，经ITS序列分析发现分别来自炭疽菌属、镰刀菌属、链格孢菌属、拟盘多毛孢属、叶点霉属、黑孢霉属、枝孢菌属、球毛壳菌属、炭团菌属、炭角菌属、葡萄座腔菌属、曲霉属及小新壳梭孢属等13个不同属。对其中的真菌进行致病力测定发现，镰刀菌属的GX2210菌株经针刺接种到苏铁羽片会产生枯萎病斑；进一步采用CaM、bTUB、RPB2和TEF1a基因序列分析，确定该菌株为变红镰孢菌（Fusarium incarnatum）；药效试验显示，代森锰锌是抑制该菌株的最有效药物，抑制中量（ID_(50)）为0.3577 mg/L。【结论】造成南宁植物园苏铁叶枯病的病原菌为变红镰孢菌。代森锰锌对变红镰孢菌具有较好的抑制作用，可考虑用于苏铁叶枯病防治。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
王小慧 朱震 马雪莲 卢颖林 李奇伟 冉炜 沈其荣
采用室内分离和盆栽致病性试验相结合的方法,分别从田间大棚西瓜枯萎病病株的根部、茎部和叶片分离纯化获得34株疑似病原菌的菌株,并从中挑选出6株形态差异明显的菌株用于盆栽回接试验。结果表明:菌株LD和LB回接7 d后植株开始出现轻微萎焉症状,到第14天时发病率分别达到100%和72%,病情指数分别为2.00和1.14;菌株LA、LC和XB在回接30 d后西瓜植株发病率和病情指数均为14%和0.29;而菌株XA在回接30 d后植株未出现发病症状。对西瓜植株的生物量统计表明,在接种病原菌30 d后,接种菌株XA和XB的处理植株的株高和地上部干质量与对照差异不显著。接种菌株LA和LC的处理西瓜植株的株高...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
王小秋 葛礼姣 仇亮 翟彩娇 王广达 宋益民 程玉静
从发病严重田块采集蘘荷叶枯病病叶，采用组织分离法进行病原菌分离、纯化，获得代表性致病菌株RH–1，对RH–1进行鉴定，并测定其生物学特性。结合病原菌形态学特征和分子生物学鉴定，构建真菌内转录间隔区(ITS)、β–微管蛋白基因(β–Tubulin)和TEF–1α系统发育树，鉴定该菌为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)。分别在温度(5、10、15、20、25、30、35℃)、pH(4、5、6、7、8、9、10)和光照时间(连续光照、连续黑暗、12h光照/12 h黑暗、24 h光照/24 h黑暗)条件下用PDA培养基培养RH–1，结果在30℃、pH 9和连续光照下菌丝生长较快。分别用葡萄糖、α–乳糖和麦芽糖以及酵母膏、牛肉膏、(NH4)_2SO_4、NH_4Cl、蛋白胨和NH_2CH_2COOH等量替代Czapek基础培养基中的碳源和氮源，发现菌丝生长的较适碳源为葡萄糖或麦芽糖，最适氮源为牛肉膏或蛋白胨。将RH–1分别接种于红蘘荷和绿蘘荷，发现绿蘘荷的抗病性强于红蘘荷的。
关键词：
蘘荷 病原菌 尖孢镰刀菌 生物学特性
[期刊] 西南农业学报
[作者]
廖旺姣 邹东霞 吴耀军 邓艳 黄乃秀
２０１３年广西百色市田林县利周乡油茶苗圃岑软２３号油茶苗出现严重的叶枯病。对叶枯病的病原菌采用组织分离培养、致病性测定、形态特征观察及核糖体内转录间隔区（ｒ ＤＮＡ－ＩＴＳ）基因序列测定。结果表明：引起岑软２３号油茶苗叶枯病的病原菌为茶拟盘多毛孢ＰｅＳＴＡｌｏＴＩｏＰＳＩＳ ＴｈｅＡｅ（ＳＡｗＡＤＡ）ＳＴｅｙＡｅｒＴ。这是广西对油茶叶枯病的首次报道。
关键词：
油茶 叶枯病,病原菌鉴定,茶拟盘多毛孢
[期刊] 林业科学研究
[作者]
耿显胜 张威 仲建平 张守科 舒金平
[目的]对早竹丛枝病进行调查及病原菌分子鉴定,为早竹丛枝病的病害诊断和防治提供科学依据。[方法]采用单株水平和单枝盘水平的2种病害分级标准对早竹丛枝病进行调查。使用植原体16S rDNA和真菌rDNA-ITS序列的特异性PCR引物,对早竹丛枝病的病原菌进行分子鉴定。[结果]调查的6块样地早竹丛枝病的平均发病率为18.59%,平均病情指数为6.67。感病的早竹DNA样品能够扩增出真菌的rDNA-ITS序列,而不能够扩增出植原体的16S rDNA序列;扩增出的序列与报道的竹针孢座囊菌的序列同源性达到99.00
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