以火龙果优良品种‘紫红龙’组培苗为试材，利用ＭＳＡＰ分子标记，探讨了棱数变异现象与ＤＮＡ甲基化可能存在的联系，分析了培养时间及继代次数对组培苗ＤＮＡ甲基化的影响；通过在培养基中添加０（对照）、１．５、３．０、４．５及６．０Ｍｇ／Ｌ ｇＡ，处理５Ｄ后，检测ＤＮＡ甲基化变化，阐述赤霉素对ＤＮＡ甲基化变化的影响。结果显示：棱数变异与ＤＮＡ甲基化水平变化并不存在相关性，而与少数位点的甲基化状态有关；随培养时间的延长和继代次数的增加，组培苗ＤＮＡ甲基化水平呈现出升高的趋势；随ｇＡ质量浓度的增加，外胞嘧啶半甲基化水平呈先升高后降低的趋势，与内源ｇＡ含量变化趋势一致，而内胞嘧啶全甲基化水平呈先降低后升高的趋．．．

以火龙果茎段为材料,研究了不同外植体类型、激素配比和活性炭对火龙果组培快繁的影响。结果表明,保留小刺和绒毛的茎段更易于诱导不定芽,不定芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA 2~4 mg/L+NAA 0.1 mg/L和MS+TDZ 0.4~0.6 mg/L+NAA0.1 mg/L,诱导率可达80%,火龙果不定芽增殖的优选培养基为MS+6-BA 2 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增殖系数可达6.4,生根的优选培养基为MS+NAA 0.3 mg/L+活性炭1 g/L,生根率可达100%,茎段在MS+6-BA 2~8 mg/L+NAA 0.1 mg/L+活性炭1mg/L培养基中增殖系数最高可达3....

The effects of oxytetracycline on the morphology of the seedling with witches' broom and global DNA methylation level of Paulownia tomentosa ? Paulownia fortunei were investigated.The results indicated that the infected seedlings by phytoplasma recovered to normal morphology of the healthy seedlings...

以经过连续多代抗寒选育获得的尼罗罗非鱼耐寒品系为实验材料,采用DNA甲基化敏感扩增多态性(methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)分析方法从全基因组水平上探讨了低温适应对罗非鱼DNA序列中CCGG位点的甲基化水平的影响。结果显示,选用的18对选择性扩增引物共检测到849个位点。耐寒品系检测到的位点数为411个,对照组为438个,其中发生甲基化的位点数分别为72和104个,总甲基化率分别为17.52%和23.74%;全甲基化位点分别为37个和65个,全甲基化率分别为9.00%和14.84%;半甲基化位点分别为35个和39个,半甲基化率分...

为探讨干露胁迫对海产贝类基因组DNA甲基化的影响,应用荧光标记甲基化敏感扩增多态性(fluorescencelabeled methylation sensitive amplified polymorphism,F-MSAP)技术,比较了不同干露条件下(0 d、0.5 d、1 d、3 d、5 d、7 d、9 d和11 d)长牡蛎(Crassostrea gigas)基因组DNA甲基化的变化。结果表明,对照组(干露处理0 d)闭壳肌与鳃组织的总体甲基化水平分别为29.76%和29.82%;干露处理0.5

【目的】探讨荣昌猪基因组DNA甲基化水平随生长发育阶段和组织类型不同而变异的规律。【方法】采用HPLC法分别检测了荣昌猪阉公猪心脏、肝脏、半膜肌3种组织在10,20,35,50,80和100 kg体质量阶段基因组DNA的甲基化水平,分别以体质量和组织类型为影响因素进行单因素方差分析。【结果】与10 kg体质量阶段的基因组DNA甲基化水平相比,3种组织基因组DNA甲基化水平均随个体体质量的增加而呈下降趋势,但不同组织下降的幅度不同:心脏基因组DNA甲基化水平在35 kg时开始明显下降(P<0...

以‘中宁强’核桃品种成熟叶片为材料,采用优化的MSAP反应体系,在全基因组水平对核DNA进行甲基化修饰位点分析,结果表明:选用20对引物组合,共扩增出1 060条清晰、重复性好的谱带,平均每对引物扩增出53条谱带,其中,甲基化位点241个,甲基化修饰比例为22.73%。对部分核桃DNA甲基化修饰位点进行回收测序,得到10条存在DNA甲基化修饰的DNA序列,BLASTn分析表明,核桃基因组中多种类型的DNA序列存在甲基化修饰现象。

研究单一低温胁迫和低温干旱双重胁迫对不同耐寒性玉米品种的籽粒萌发特性和苗期生理生化性能的影响,并比较不同浓度赤霉素溶液浸种的抗逆效果。以抗寒性较强的郑单958和抗寒性较弱的CB15098为供试品种,设置低温单一胁迫和低温干旱双重胁迫2种逆境,研究10,50,100 mg/L的赤霉素浸种对玉米籽粒萌发和苗期生长的影响。结果表明,赤霉素浸种效果表现为在单一胁迫下增加不同耐寒性玉米的地上部干、鲜质量,在双重胁迫下减少两玉米品种浸种后的地上部干、鲜质量。对抗寒性较强的郑单958,赤霉素浸种可增加其低温和低温干旱胁迫下的地上部高度;对抗寒性较差的CB15098,浸种显著提升其低温和低温干旱胁迫下的发芽势,浸种在低温胁迫下抑制CB15098地上部高度和根系长度,在低温干旱胁迫下促进CB15098地上部高度。抗寒性较强的郑单958发芽率、地上部干、鲜质量和高度对不同浓度赤霉素浸种的响应幅度均高于抗寒性较弱的CB15098。低温干旱胁迫下建议采用低浓度赤霉素浸种。单一低温胁迫下建议采用高浓度赤霉素浸种,低温干旱复合胁迫下采用低浓度赤霉素浸种抗逆效果更佳。

【目的】明确DELLA蛋白基因在葡萄基因组数据库中的数量、结构和组织表达差异,探究DELLA蛋白在葡萄赤霉素(GA)信号传导及葡萄无核果实发育机理中的作用机制。【方法】基于拟南芥、水稻等植物中的DELLA蛋白基因,利用HMMER程序和NCBI的CDD程序鉴定葡萄基因组中的DELLA蛋白基因;以‘白罗莎里奥’葡萄品种为试材,采用PCR技术克隆3个DELLA蛋白基因的c DNA全长序列;通过启动子作用元件分析预测其潜在功能;利用生物信息学软件对其染色体定位、基因结构、系统进化、理化特性、亚细胞定位及蛋白互作等进行分析;利用农杆菌介导的烟草瞬时表达技术分析DELLA蛋白的亚细胞定位情况;采用q RT-PCR方法检测葡萄DELLA蛋白基因应答GA在果皮、果肉、种子(或种子区)的时空表达特征。【结果】鉴定得到3个葡萄DELLA蛋白基因,克隆并验证其精确序列,分别命名为Vv GAI1(VIT_201s0011g05260)、Vv RGA(VIT_214s0006g00640)及Vv SLR1(VIT_211s0016g04630),其染色体定位、开放阅读框(ORF)大小、编码氨基酸数量分别为:Chr1、1 773 bp、590个;Chr14、1 710 bp、569个;Chr11、1 599 bp、532个。基因结构分析表明其DNA序列均无内含子,只有1个外显子,基因结构高度保守。进化分析显示Vv GAI1与Vv RGA亲缘关系较近,被聚类为一组,而Vv SLR1为另一组。3个基因的启动子均含有响应赤霉素和胚乳发育相关的作用元件,表明它们可能参与响应GA信号传导和胚乳发育过程。亚细胞定位结果显示3个DELLA蛋白均定位于细胞核。q RT-PCR结果显示除果皮中Vv SLR1在近成熟期具有表达高峰外,其余均在幼果期高表达,且外源GA处理均不同程度降低了3个DELLA蛋白基因在葡萄果皮、果肉和种子区的表达,尤以种子区下调水平最为显著。蛋白互作分析表明3个DELLA蛋白均为葡萄GA信号传导的核心作用元件,均可能与GIDI1和SLY1互作参与葡萄GA信号传导。【结论】葡萄基因组中含有3个DELLA蛋白基因家族成员;不同物种间DELLA蛋白结构高度保守;GA可能通过负调控这3个成员参与葡萄果皮、果肉和种子区的发育,且3个成员均可能通过应答GA信号调控葡萄无核果实的发育。

为了探索栽培稻与药用野生稻种间杂种体内异源基因组重组引起的DNA甲基化变异规律,及其生物学效应,利用甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术对辽粳944、药用野生稻及其杂种F_1不同发育时期的叶片和小穗基因组DNA甲基化水平和模式的遗传变异特点进行了分析。结果表明,辽粳944、药用野生稻及其杂种F_1的叶片和小穗DNA的甲基化水平表现出相同的变化趋势,即随着生长发育的进行,DNA甲基化水平呈下降趋势,各组织的全甲基化率均显著高于半甲基化率(P=0.000);杂种在分蘖期、减数分裂期及开花期叶片DNA平均总甲基

以贵州黔西百里杜鹃野生林中马缨杜鹃为研究对象,喷施不同浓度配比的赤霉素+2,4-D及赤霉素+丁酰肼,并测定其光合生理指标的日变化。结果表明:喷施不同浓度配比的外源激素下马缨杜鹃的光合速率呈双峰型,峰值分别出现在11:30和15:30,在11:30,赤霉素分别与不同浓度50、100、200mg/kg 2,4-D混和对应光合速率分别为8.39,8.08,8.14,8.29μmol.m-2s-1;喷施赤霉素和不同浓度的2,4-D对应的马缨杜鹃叶片蒸腾作用日变化也呈"双峰"曲线,第一个峰值均出现在9:30,表现为CK>100mg/kg+200mg/kg>100mg/kg+50mg/kg>100mg/k...

研究了温度、赤霉素和乙烯处理对采后豌豆苗 (PisumsativumL .)纤维合成和品质变化的影响。结果显示 ,采后豌豆苗在 7和 13℃低温贮藏 72h后 ,纤维素含量分别比 2 0℃贮存的对照低 5 5 .1%和 33.7% ,叶绿素和可溶性糖含量显著高于对照 ;赤霉素抑制了采后豌豆苗的纤维合成并延缓叶绿素、蛋白质及可溶性糖含量的下降 ;乙烯则促进了纤维合成、并加速叶绿素、蛋白质、可溶性糖含量的下降。测定表明 ,低温显著抑制了纤维合成相关的酶如苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、肉桂醇脱氢酶和过氧化物酶的活性 ;低温和赤霉素能延缓采后豌豆苗品质下降 ,而高温和乙烯则加速豌豆苗品质下降。

分别采用扩增片段长度多态性(AFLP)和甲基化敏感扩增多态性(MSAP)技术,研究不同浓度甲基磺酸甲酯(MMS)处理毛泡桐丛枝病幼苗后DNA碱基序列及其甲基化的变化,并对发病相关特异DNA片段对应蛋白的功能进行预测。结果表明:健康和丛枝病幼苗及MMS处理后丛枝病幼苗的DNA碱基序列在AFLP水平上相同。随着MMS浓度的升高,处理后丛枝病幼苗的总DNA甲基化水平逐渐升高,但最大浓度(100 mg·L-1)MMS处理后的DNA甲基化水平仍低于健康苗。与毛泡桐丛枝病幼苗相比,MMS处理后丛枝病幼苗的DNA去甲基化多态性皆低于DNA甲基化多态性。序列同源性功能分析结果表明特异DNA甲基化片段对应蛋白功...

为探索青霉素和赤霉素对香石竹切花保鲜的生理效应,研究了以不同浓度的青霉素和赤霉素为主要成分的保鲜剂对香石竹鲜切花离体衰老过程的调控作用.结果表明:含不同浓度青霉素和赤霉素的保鲜剂均能延长香石竹切花的瓶插寿命,增加切花鲜重,增大花朵开放度,提高花瓣POD酶的活性,改善切花体内水分状况,维持花瓣膜结构的相对稳定.其中,以2%蔗糖+300mg/L8-HQS+100mg/L赤霉素处理的保鲜期最长,以2%蔗糖+300mg/L8-HQS+300mg/L青霉素处理的保鲜品质最佳.

【目的】揭示赤霉素对桃成花的影响及其可能的作用机制。【方法】在桃花诱导期叶面喷施100mg·L-1GA3,运用解剖学、免疫组织化学及半定量RT-PCR方法,研究‘八月脆’桃花芽分化过程中顶端分生组织赤霉素的原位分布及成花关键基因表达变化。【结果】‘八月脆’桃在7月10日前处于成花诱导期(北京);成花诱导期叶面喷施100mg·L-1GA3显著抑制了桃花诱导及进一步的正常分化,处理后成花率仅为11.67%;顶端分生组织中GA1的分布随花芽分化进程而变化,6月13日-7月25日,花芽中GA1主要分布在芽基部的维管组织中,顶端分生组织中没有检测到信号。GA3处理后,GA1的分布在6月13日-7月3日与...