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[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 孔广红  余文才  贺熙勇  郑诚  吴超  柳觐  
【目的】探索荧光显微观察澳洲坚果花粉管原位生长的最佳制片方法,为澳洲坚果品种间杂交(不)亲和性及生殖生物学研究提供技术支撑。【方法】以品种‘HAES842’为母本、‘HAES863’为父本,异花授粉5 d后,采集雌蕊为试验材料,经过固定、软化、染色、镜检等步骤,比较分析不同制片方法下澳洲坚果花粉管的荧光显微观察效果。【结果】1)28℃下,NaOH溶液软化、徒手切片法中,选择1、2 mol·L~(-1) NaOH溶液对雌蕊软化,徒手切片容易获得雌蕊的完整组织;浓度为4、6 mol·L~(-1)时,雌蕊细胞反应剧烈,迅速失水后缓慢复水,切片时花柄易脱离,子房和柱头易破裂。2)100℃高温高压整体软化透明法中,NaOH溶液和Na_2SO_3溶液对澳洲坚果雌蕊均具有很好的软化效果,虽然镜检时花粉管被花柱其他组织遮挡,但此方法为整体观察澳洲坚果花粉管提出了新方向。3)未调节pH值和pH值7.0的染色液对澳洲坚果雌蕊进行染色,均未能明显区分花粉管和花柱其他组织;染色液pH值10.0时,花柱其他组织仅发微弱荧光,花粉管发黄绿色荧光,花粉管清晰明了,根根分明。【结论】28℃下,2 mol·L~(-1) NaOH溶液软化待检材料3 h,徒手切片,然后使用强碱性染液染色,能够很好地激发花粉管的黄绿色荧光信号,是澳洲坚果花粉管荧光显微观察的最佳制片方法,此方法能快速、清晰地观察澳洲坚果花粉管在花柱内的生长行为。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 陈娟  王森  邵凤侠  
【目的】探究适合观察枣花授粉荧光显微观察效果的最佳制片方法,为枣树授粉受精研究提供方法依据。【方法】以4年生、生长发育良好的‘中秋酥脆枣’枣花作为试验材料,经过固定、水洗等步骤,采用不同软化和染色方法对枣花进行处理,压片后在荧光显微镜下拍照,比较不同处理下枣花授粉的荧光显微观察效果。采用NaOH溶液对枣花柱进行软化,设置1、2、3、4和8 mol/L 5个浓度梯度,分别软化0.5 h和1 h,软化后用水溶性苯胺蓝溶液对枣花进行染色,设置0.01%、0.05%和0.10%3个浓度梯度,分别染色0.5、1和4 h。【结果】相同处理时间,NaOH溶液浓度越高,枣花花柱软化程度也越高;而NaOH溶液浓度越高,所需要的软化处理时间也越短。选择1、2和3 mol/L NaOH溶液对枣花进行软化,都能取得良好的压片效果,但当NaOH溶液浓度超过4 mol/L后,枣花花柱组织明显变软,压片时组织也容易破碎。在相同软化方法处理的条件下,同一浓度水溶性苯胺蓝溶液的染色时间增加,对花粉管的染色效果并没有产生明显的增强作用;而在相同染色时间内,用高浓度的水溶性苯胺蓝溶液对枣花进行染色,染色效果较低浓度的要好。【结论】1)选择1 mol/L或2 mol/L NaOH溶液来处理枣花花柱,都能取得较好的制片效果。2)在软化时间的选择上,软化0.5 h就能取得较好的压片效果,这能缩短试验需要的时间;在相同染色时间内,用高浓度的水溶性苯胺蓝溶液对枣花进行染色,染色效果较低浓度的要好。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 廖婷  袁德义  彭邵锋  邹锋  
以普通油茶‘华硕’为试材,运用荧光显微观察法,研究了其自交和异交授粉后花粉在花柱上萌发和花粉管生长变化情况。结果表明:自交和异交授粉后,花粉均能在柱头上正常萌发,且花粉管均能生长到花柱基部,但生长速度不一样,异交的生长速度略快于自交;自交授粉72 h后花粉管到达花柱基部,异交60 h到达花柱基部,自交192 h后花粉管到达胚囊;自交与异交授粉花粉管白天生长速度均显著高于晚上。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王尧  王玖瑞  刘孟军  刘平  
以冬枣和雄性不育3号为母本,大叶无核枣等品种为父本进行品种间授粉,在荧光显微镜下观察人工授粉后柱头上花粉的黏附、萌发和花粉管生长情况。结果表明,不同授粉组合之间有花粉黏附柱头比率、单柱头平均花粉数、有萌发花粉的柱头比率和单柱头平均花粉萌发率差异显著。经不同品种授粉后,冬枣有花粉黏附柱头比率和有萌发花粉的柱头比率之间,及单柱头平均花粉数和单柱头平均花粉萌发率之间无相关性。冬枣×大叶无核枣、冬枣×无核小枣和冬枣×苹果枣三个组合的花粉萌发率高且花粉管更容易深入花柱,是较为理想的杂交组合。
[期刊] 水产学报  [作者] 杨泽琴  李荣华  母昌考  宋微微  王春琳  
为了研究管角螺受精卵在受精和早期卵裂过程中的核相变化以及保育卵的形成,实验通过HoecHst 33258染色、荧光显微观察方法,对管角螺受精和早期卵裂过程中核行为的细胞学变化进行了详细观察,并对其胚胎发育过程中的数量变化进行统计分析。结果显示,管角螺的成熟未受精卵呈卵圆形,平均卵径(0.33±0.03)mm,核相处于第一次成熟分裂中期,在水温为(26±2)°c条件下,1 H精子入卵,2~3 H受精卵先后排出第1、第2极体,完成第一次和第二次成熟分裂,6 H雌、雄性原核形成,靠近融合,第一次卵裂形成2细胞,12~24 H时2细胞继续分裂生成4细胞。研究表明,管角螺受精卵在成熟分裂和卵裂过程中表现...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 肖晓凤  周兰英  
【目的】确定欧李花粉粒萌发时间,观察花粉管的动态变化过程,从微观角度了解欧李的授粉受精特性。【方法】对欧李进行人工授粉,取授粉后1-10d的雌蕊,采用荧光显微镜技术观察花粉粒的萌发生长情况以及子房受精过程。【结果】欧李柱头开裂时间为11:00-13:00,有粘液分泌;授粉后2h,少量花粉粒在柱头上萌发;授粉后8h,花粉管初步形成且主要集中在花柱上部;授粉后24h,花粉管成束状形式进一步伸长;授粉后3d,子房中胚珠完成受精;授粉后5d,花粉管呈现断裂、不连续状态,并开始解体;授粉后8d,花粉管完全解体,柱头
[期刊] 西南农业学报  [作者] 薛忠  郭向明  黄正明  王刚  宋德庆  朱德明  黄小红  
为澳洲坚果破壳机的研制提供参数依据,进行了澳洲坚果的多因素压缩试验。结果表明:①坚果直径、加载速度和载荷方向都对最大破坏力和压缩量有显著影响;②坚果数量最多的直径分布带,在加载速度为45 mm/min,载荷方向沿种脐线压缩时可使指标值最小,最小破壳力的均值为1662.97 N,压缩量均值为1.395 mm;③破壳机械产生的破坏力应不小于5895.611 N,挤压式破壳机械对坚果最大压缩位移应不大于4.026 mm;④从破壳取仁角度考虑坚果分级,只需要大中小三级即可满足生产需要。
[期刊] 林业科学  [作者] 郭凌飞  邹明宏  曾辉  杜丽清  陆超忠  
An one factor test was used to optimize ISSR-PCR amplification system on macadamia in four levels of five factors(Taq DNA polymerase,template DNA,dNTPs,primer and Mg 2+,respectively) in this study.The results showed that the 25 μL reaction system consisted of 1×PCR buffer,1 U Taq DNA polymerase,20 n...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 李映志  余庆  李洪波  吴钿  叶春海  
为了解菠萝蜜(Artocarpus heterophyllus Lam.)受精及胚发育过程,采用荧光显微、整染透明及石蜡切片法观察菠萝蜜的花粉萌发和胚发育过程。结果表明:1)菠萝蜜授粉6 h后,花粉粒开始萌发;授粉12 h后,花粉管开始进入花柱;授粉72 h后,花粉管通过花柱进入子房;2)谢花后第9天,胚乳先于合子分裂;谢花后第16、18和21天,胚依次发育至球形胚、心形胚和子叶胚,胚乳为细胞型胚乳;3)菠萝蜜不形成种子的主要原因有胚囊败育、胚珠败育及胚囊未受精。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 岳海  陈丽兰  陈国云  梁国平  李国华  
澳洲坚果新品种的不断引进、培育及引进品种命名的标准不统一,对澳洲坚果种植户鉴认或引进澳洲坚果品种造成了一定困难。本研究以云南省热带作物科学研究所设在瑞丽、普洱、景洪等地的澳洲坚果品比点中的40个澳洲坚果品种为试验材料,以国际植物新品种保护联盟(UPOV)推荐的品种特征及澳洲坚果种质资源描述规范为指南,对40个澳洲坚果品种叶片和果实的相关特征性状(叶片轮生情况、新梢颜色、叶片形状、叶尖形状、叶基形状、叶形指数、叶柄长度、叶缘波形数、叶缘刺、果颈特性、果顶尖突起特性、壳果形状、果皮质地、腹缝线、果斑纹分布、壳果白点分布)进行了鉴别分类,结果表明:在兼顾植物品种特异性、一致性和稳定性(DUS)条件下...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 孔广红  岳海  陈丽兰  李国华  梁国平  
以2年生澳洲坚果A4品种盆栽幼苗为试材,研究了低温胁迫对幼苗叶片丙二醛(MDA)含量、游离脯氨酸(Pro)含量、可溶性蛋白含量和可溶性糖含量的影响。结果表明,低温胁迫1 d,澳洲坚果幼苗叶片丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量均显著升高;随着低温胁迫时间的延长(2~3 d),丙二醛(MDA)含量呈下降趋势,可溶性蛋白含量和可溶性糖含量呈升高趋势,而脯氨酸(Pro)含量则是处理2 d继续升高,处理3 d后下降;胁迫解除后,各生理指标趋向于处理前水平。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 孔广红  马静  柳觐  倪书邦  贺熙勇  李玉宏  张海文  陶丽  陈丽兰  陶亮  宫丽丹  
【目的】为探明乙烯利对澳洲坚果落果的影响,解决澳洲坚果的采收难题,以主栽品种‘O.C’为材料,进行激素促脱高效采收技术研究。【方法】果实采收期对澳洲坚果树体喷施乙烯利混合溶液诱使其落果,对落果情况、最佳喷施时期进行了研究,并对试验树体翌年开花、结果及产量进行了跟踪观测调查分析。开展了2个批次的试验,第1批次试验设置3个乙烯利浓度梯度,分别为0.4、0.65、0.9 g/L,分3个日期进行喷施(7月25日、8月1日、8月7日)。第2批次试验设置4个乙烯利浓度梯度,分别为1.4、1.6、1.8、2.0 g/L
[期刊] 林业科学研究  [作者] 王伟  田荣荣  那立妍  杨颖  许新桥  
[目的]对澳洲坚果在中国的潜在分布区进行预测,并对其适生区进行分析和划分。[方法]通过收集澳洲坚果的地理信息数据,利用最大熵模型(MaxEnt)与地理信息系统(ArcGIS),综合相关19项气候因子,预测划定澳洲坚果在世界以及我国的潜在地理分布区。[结果]该物种生长区域狭窄,对环境要求苛刻。世界范围内,澳洲坚果的较适宜生长区在澳洲东部、南美洲东南部和马达加斯加岛东部以及亚洲地区23°26'30°N,73°122°E范围内。在我国,澳洲坚果适宜分布区主要集中在西藏、台湾、广西、广东和云南等地,其高适宜区面积
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 周春衡   谭秋锦   王文林   覃振师   郑树芳   黄锡云  
【目的】明确果园生草模式对澳洲坚果果园土壤理化性质及果实品质的影响,为今后澳洲坚果高效生态经营管理提供参考依据。【方法】选取3种果园常见生草草种,以清耕为对照,研究不同处理间果园土壤含水量、温度、容重、养分及果实品质差异,并分析土壤理化性质与果实品质的相关性。【结果】3种生草模式条件下的果园土壤含水量均显著高于清耕,表现为草木樨(0.25)>紫花苜蓿(0.22)>多年生黑麦草(0.21)>清耕(0.17)。土壤容重则表现出相反特征,3种生草模式条件下的果园土壤容重均显著低于清耕。清耕区土壤温度较生草区高,变化幅度大,变异系数高。不同生草模式下果园地表土壤温度日均变化均呈现先增加后降低的趋势,在14:00土壤温度达到最高值,草木樨、紫花苜蓿、多年生黑麦草生草模式下土壤温度最高值分别比清耕区低10.39%、11.87%、14.84%。与清耕相比,果园生草能显著提升土壤有机质、全钾、碱解氮、速效磷、速效钾含量,而土壤全磷含量均显著低于清耕区。3种生草模式条件下的澳洲坚果株产量均显著高于清耕,表现为草木樨(20.67 kg)>多年生黑麦草(19.60 kg)>紫花苜蓿(14.73 kg)>清耕(4.33 kg)。在果实品质方面,生草区均显著高于清耕。相关分析表明,土壤理化性质与澳洲坚果产量及果实品质的相关性较大,产量与土壤含水量、碱解氮、有机质、全钾等呈显著或极显著正相关关系。PCA分析表明除了土壤全磷、温度和容重,其他土壤性状均与澳洲坚果产量和品质指标呈正相关关系。【结论】果园生草能有效增加澳洲坚果果园土壤含水量和养分含量,降低了土壤容重和温度,同时显著提高了果树产量和果实品质。产量和果实品质与土壤理化性质相关性较好,紫花苜蓿生草模式更适合澳洲坚果果园。
[期刊] 水产学报  [作者] 孙慧玲  方建光  王清印  张继红  梁兴明  燕敬平  孔杰  杨爱国  姜明  
采用荧光染色剂DAPI己固定的泥蚶成熟卵和受精卵进行染色的方法 ,在显微镜下观察泥蚶受精细胞学过程。通过DAPI的染色 ,在荧光显微镜下可清楚观察到 ,泥蚶的成熟未受精卵处于第一次成熟分裂的中期 ,精子入卵后成熟分裂再次启动 ,释放出第一和第二极体 ,完成成熟分裂。部分受精卵的第一极体有极明显的分裂现象。精子入卵的部位是随机的 ,且自精子入卵至成熟分裂完成 ,入卵的精子在形态等方面将发生一系列变化 ,形成雄性原核。雌雄原核形成后均具有极明显的膨大现象。并且在系列的样品中可观察到 ,在雌雄原核联合的过程中具有雄性原核向雌性原核移动的趋势
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