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[期刊] 中国农业科学  [作者] 涂飞  李齐发  李二林  徐业芬  韦涛  谢新华  陈玲  谢庄  
【目的】研究湖羊卵巢组织COX2、HAS2、TSG6和PTX3的mRNA表达水平与湖羊繁殖性能的相关性,筛选影响湖羊高产的候选基因,为揭示湖羊高繁多胎分子遗传机理提供依据。【方法】选取16只经产湖羊母羊,分为低产组和高产组,于发情后24—36 h屠宰,应用RT-PCR技术检测COX2、HAS2、TSG6和PTX3的组织表达特征,进一步利用实时荧光定量PCR技术分析各基因mRNA在低产组和高产组湖羊卵巢组织中的表达差异。【结果】COX2、HAS2、TSG6和PTX3均在湖羊卵巢组织中表达,在卵巢组织,高产组TSG6和PTX3的mRNA表达极显著高于低产组(P<0.01),低产组HAS2的mRNA...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 徐业芬  李齐发  李二林  涂飞  胡冬利  谢庄  陈玲  
【目的】研究湖羊卵巢组织BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因mRNA表达水平与排卵数的相关性,筛选影响湖羊多胎性状的候选基因,为揭示湖羊高繁多胎分子遗传机理提供参考。【方法】选取16只经产湖羊母羊,分为产单羔组和多羔组,发情后24~36h屠宰,取卵巢,计数排卵点,记录排卵数;应用RT-PCR技术检测BMP2、BMP4、BMP6和BMP7基因的组织表达特征,进一步利用实时荧光定量PCR技术分析各基因mRNA在单羔组和多羔组卵巢组织中的表达差异。【结果】BMP2、BMP4和BMP7基因在湖羊母羊卵巢组织内表达,而且在垂体及下丘脑、子宫、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉、输卵管组织中均有表达...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 郭晶  李新宇  李隐侠  潘增祥  决肯  刘吉英  李二林  谢庄  陈玲  李齐发  
【目的】获取湖羊TGF-β1基因序列,了解TGF-β1序列特征和组织表达特征,分析卵巢组织中TGF-β1基因表达水平与排卵数之间的关系。【方法】通过PCR扩增和测序获得湖羊TGF-β1基因序列,并采用生物信息学方法分析其序列特征;采用RT-PCR分析湖羊TGF-β1基因的组织表达特征;采用Real-time qPCR方法分析多羔组与单羔组湖羊卵巢组织TGF-β1基因表达水平的差异,及其与排卵数之间的关系。【结果】湖羊TGF-β1基因编码区序列全长1 173 bp,编码蛋白含有390个氨基酸残基,包含典型的TGF-β前肽和TGF-βlike等结构域。TGF-β1基因在湖羊卵巢组织中高表达,多羔组...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 李二林  李齐发  李美丽  徐业芬  胡冬利  祝洪生  李新福  谢新华  陈玲  谢庄  
【目的】通过分析TGF-β受体(TGF-βRⅠ、TGF-βRⅡ)mRNA组织表达谱及其表达水平与湖羊排卵数的关系,研究TGF-β受体对湖羊排卵数的影响。【方法】挑选16头经产母羊,其中8只产多羔的为高产组,8只产单羔作为对照组,使用氯前列醇钠法进行同期发情,发情后48~60h内屠宰,测定排卵数;分离取高产组母羊的下丘脑、垂体等组织样进行组织表达谱分析,用实时荧光定量PCR法检测湖羊卵巢TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ基因mRNA表达水平,分析TGF-β受体表达水平与湖羊排卵数的关系。【结果】TGF-βRⅠ在生殖器官相对表达量极显著高于肺和肌肉(P<0.01),TGF-βRⅡ在生殖器官相对表达量极...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 郝称莉  李齐发  乔永  刘振山  邵丹青  李伟华  林建良  吴福荣  沈补根  谢庄  
【目的】研究湖羊不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因mRNA的发育变化规律,结合屠宰试验分析H-FABP和PPARγ基因mRNA表达水平对肌内脂肪沉积的影响。【方法】选取初生、1、2、3、4、5、6月龄湖羊公羔和12月龄的成年公湖羊各5只,屠宰后取背最长肌、腰大肌和股二头肌检测肌内脂肪含量,用荧光实时定量PCR法检测湖羊不同部位肌肉H-FABP和PPARγ基因mRNA表达水平,分析其在不同时期的变化及其与肌内脂肪含量的关系。【结果】(1)随着月龄的增加,肌内脂肪(intramuscular fat,IMF)含量持续上升;同月龄背最长肌和腰大肌IMF含量显著高于股二头肌(P<0.05)。(2...
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 李永洙  CUI Yong-quan  
为探讨热应激对我国地方鸡种与国外培育蛋鸡品种繁殖性能、血液生殖激素及相关基因mRNA表达量的影响,试验选择体况相近的112日龄济宁百日鸡和海兰褐鸡各96只,随机分为适温组((25±0.26)℃)和高温组((38±0.26)℃)2个处理,在人工环境气候舱中饲养,每个处理各设8个重复,每个重复6只,试验持续28d。测定112、119、126和140日龄时的卵巢重量、卵泡总数和血液生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量。结果表明:1)适温条件下海兰褐鸡的卵巢、总卵泡发育好于济宁百日鸡,而热应激第7天济宁百日鸡和海兰褐鸡只出现明显的卵巢发育受阻、总卵泡数量增生缓慢(P<0.05)。2)在整个热...
[期刊] 草业科学  [作者] 刘佳美  路婷婷  姚婷  要荣宇  李发弟  乐祥鹏  李万宏  
为深入了解不同阴囊围度的湖羊公羔类固醇激素生成和曲细精管生精环境差异,本研究选择137只165日龄湖羊公羔作为试验对象,根据阴囊围度大小分成小围度组[S组,(18.53±0.42) cm]和大围度组[L组,(27.29±1.13)cm],每组9只,共18只。结果表明:1) L组的睾丸重量、睾丸体积、睾丸系数、附睾重量、曲细精管直径、附睾尾部精子数量均极显著高于S组(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 刘吉英  郝称莉  李伟华  林建良  吴福荣  沈补根  谢庄  李齐发  
选取了初生、1~6月龄湖羊公羔和12月龄的周岁公羊各5只,采用real-time PCR检测湖羊不同部位肌肉黑素皮质激素受体4基因(MC4R)mRNA表达水平,分析MC4R mRNA表达的发育性变化及其与肌肉肌内脂肪含量的关系。结果发现:湖羊不同肌肉部位MC4R基因表达的发育性变化模式均为先上升后下降。其中3月龄背最长肌、后腿股二头肌和前腿肱二头肌的MC4R mRNA表达水平达到最大,与其余各月龄相比差异显著,而2月龄腰大肌的MC4R mRNA表达水平达到最大,5月龄MC4R mRNA表达水平在湖羊不同部位肌肉间表现有明显差异,但无明显规律,其后各月龄间均无显著差异。结论:湖羊背最长肌、腰大肌...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 张艳丽  郭佳禾  姚晓磊  王锋  
繁殖力是影响养羊业经济效益的重要指标之一,而繁殖性状遗传力低、周期长、选育进展慢。湖羊作为我国著名的绵羊品种,以“全年发情、多胎”而著称,是当前国内绵羊杂交育种和肉羊生产最重要的母本品种,也是研究家畜高繁机制的理想模型。繁殖性状是一个极其复杂的性状,受遗传、表观修饰、激素和营养等多因素调控,本文主要从下丘脑-垂体-性腺轴及子宫的分子调控和卵泡、子宫及胎盘发育的营养调控2个层面综述了湖羊繁殖性状调控机制的研究进展;同时指出了当前以湖羊作为多胎种质资源研究存在的问题并就未来研究方向进行了展望。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李英奇  梁雅旭  高霄霄  万珍  张国敏  王锋  
[目的]本试验旨在探讨高能饲粮对湖羊肝脏组织细胞增殖、能量代谢和脂代谢相关基因表达的影响。[方法]选取36只体况良好、体质量相近的3月龄湖羊公羔,随机分为正常日粮组(CON)和高能日粮组(HE),每组3个重复,每个重复6只。CON组和HE组个体饲喂日粮的能量水平分别为10和11 MJ·kg~(-1)。预饲14 d后正式饲喂60 d,试验结束后屠宰并采集肝脏组织,用于H&E染色、免疫组化检测和荧光定量PCR(qPCR)、Western blot检测。[结果]H&E染色显示HE组湖羊肝脏组织中出现轻度空泡样变性;免疫组化发现PCNA蛋白主要表达于肝细胞核中,mTOR和LXRα蛋白主要定位在肝细胞质中。高能饲粮饲喂显著提高肝脏组织PCNA和SREBP-1c的mRNA与蛋白表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织LKB1和AMPK的mRNA与蛋白的表达水平(P<0.05),显著降低肝脏组织PGC-1α和SIRT1的蛋白表达水平(P0.05)。[结论]提高湖羊的日粮能量水平能增强湖羊肝脏组织的细胞增殖及脂肪合成能力。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 乔娜  徐旭俊  刘思国  王学斌  俞慧清  童永星  陈建泉  成国祥  
【目的】分析转基因对人乳铁蛋白(human Lactoferrin,hLF)转基因羊繁殖性能的影响,及转基因在不同世代中的遗传与表达稳定性。【方法】应用自主研发的原代hLF转基因山羊(G0代公羊)建系,与普通奶山羊常规交配获得F1代;F1代公羊与F1、F2代母羊或普通奶山羊(N)交配获得F2代;F2代公羊与F2代母羊交配获得F3代。分别采用PCR和ELISA方法对其后代个体进行整合与表达鉴定;统计各世代不同配种方式所获得的后代数量、转基因整合率、母羊受胎率、羔羊异常率等繁殖性能数据。【结果】经过多个繁殖周期,各世代转基因羊受胎率、产羔率等繁殖性状均正常。获得F1代hLF羊19只,转基因整合率为...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 孙伟  倪蓉  殷金凤  丁家桐  张有法  陈玲  吴文忠  周洪  
【目的】旨在了解中国特有的白色羔皮羊品种—湖羊不同花纹及其毛囊形成的分子遗传学机理。【方法】利用安捷伦基因芯片技术筛选初生湖羊大花和小花皮肤组织差异表达基因。【结果】差异表达分析显示,3对大花和小花组分别筛选出1 069、2 071和3 879个差异表达基因,共有137个共同基因;差异基因经GO分类显示,主要参与细胞分化、增殖、凋亡、发育、免疫应答、离子转运等生物学过程;另外,所验证的4个差异表达基因的荧光定量PCR结果与芯片结果基本一致。【结论】筛选出了BMP7、MMP2、SNAI1、SFXN1、CDKNIC、MT3、POU1F1等对湖羊大花、小花性状形成可能具有重要影响的候选基因。
[期刊] 草业科学  [作者] 杨兴林   邢宇佳   李思琪   郭志伟   陈佳佳   朱海鲸   李陇平   屈雷  
(目的)本试验旨在研究N-氨甲酰谷氨酸(NCG,N-carbamylglutamate)对初产湖羊母羊妊娠期血液生化、生殖激素及产羔性状的影响,为提高湖羊母羊繁殖效率奠定基础。(方法)选择300只年龄(8月龄)和体重(31.81±1.2kg)相近、健康的湖羊初产母羊,随机分为4组,每组75只,对照组母羊饲喂基础日粮,试验组母羊饲喂在基础日粮中分别添加1.0 g/(只·d)(I组)、1.5 g/(只·d)(II组)和2.0 g/(只·d)(III组)的NCG。配种采用本交方式,公羊放母羊圈中20天,公羊出圈一个月后,通过B超检测每组选择40只妊娠母羊继续试验。整个试验从母羊配种前1个月开始至所有母羊产羔完成后结束。分别在妊娠前期(公羊配种结束后28天)和妊娠后期(预产期前15天)采集母羊血液,通过对母羊血液生化、生殖激素和产羔性状的测定,分析NCG对初产湖羊母羊的繁殖性能影响。(结果)结果表明:1)妊娠前期,Ⅲ组母羊血浆孕酮极显著高于对照组(P<0.01)。Ⅰ组母羊血浆雌二醇极显著高于对照组(P<0.01);Ⅰ组母羊血浆精氨酸显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ组母羊血浆总一氧化氮合酶显著高于对照组(P<0.05);Ⅲ组母羊血浆内皮型一氧化氮合酶显著高于对照组(P<0.05)。2)妊娠后期,Ⅱ组母羊血浆葡萄糖极显著高于对照组(P<0.01);Ⅰ组母羊血浆催乳素(PRL)显著高于对照组(P<0.05)。3)与对照组相比,添加NCG的各试验组对初产湖羊的妊娠率、胎产羔数和胎产活羔数均有不同程度的提高(P﹥0.05),以II组母羊最高,分别提高了5%、0.15只、0.18只。(结论)综上所述,初产湖羊日粮中添加NCG可能通过增加血浆精氨酸和NO的含量,提高了初产湖羊的妊娠率、胎产羔数和胎产活羔数等繁殖性能,适宜剂量为1.5g/(只·d)。
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 张建春   孔杰   曹家旺   谭建   代平   孟宪红   罗坤   傅强   陈宝龙   刘东亚   邢群   隋娟   栾生  
生产中,凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)雌虾的繁殖性能表现出巨大差异。本研究以一个生产周期中雌虾产卵频次为繁殖力指标性状,以高繁殖力和低繁殖力雌虾为研究对象,对雌虾不同卵巢发育阶段(增殖期、小生长期、大生长期和成熟期)进行组织学观察。针对在前期选择清除分析中筛选到的繁殖候选基因TRX2、PARD3、PLCβ4和RERE,采用实时荧光定量PCR方法首次分析比较它们在高、低繁殖力雌虾不同卵巢发育阶段卵巢、眼柄组织中的表达规律。组织观察结果显示,低繁殖力雌虾卵巢在整个生产周期中无法发育至成熟期,高繁殖力雌虾卵巢在卵黄颗粒的形成和积累、皮质棒形成等关键过程的速度要快于低繁殖力雌虾。基因表达检测结果显示,在卵巢小生长期和大生长期,TRX2、PLCβ4和RERE基因在高繁殖力组卵巢的表达量均显著高于低繁殖力组卵巢(P<0.05),4个基因在高繁殖力组成熟期卵巢中均维持较高的表达水平;在不同时期的眼柄组织中,低繁殖力组中TRX2、PARD3、PLCβ4和RERE基因的表达量均高于高繁殖力组。研究结果表明上述4种基因可能在凡纳滨对虾卵巢发育过程中发挥重要作用。以上结果为深入研究凡纳滨对虾雌虾繁殖力产生差异的分子机制以及分子辅助育种提供重要参考。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 梁雅旭  邓凯平  张真  高霄霄  王智博  王锋  樊懿萱  
[目的]本试验旨在探究日粮中添加富含多不饱和脂肪酸的15%紫苏籽(PFS)对湖羊肝脏自噬和凋亡的影响。[方法]选取30只体重相近且健康状况良好的2月龄湖羊公羔,随机分为2组,分别饲喂含0%(对照)和15%PFS的日粮。饲养84 d后,每组随机选择5只羊屠宰,采集肝脏组织。通过qPCR和Western blot等技术检测肝脏中自噬、凋亡及LKB1-AMPK-MTOR信号通路相关基因与蛋白的表达水平。[结果]与对照组相比,15%PFS显著上调PPARGC1A、BECN1、ATG5、ATG7基因和PPARGC1A、BECN1蛋白表达水平(P0.05);15%PFS组肝脏组织中LKB1-AMPK-MTOR通路关键基因LKB1、AMPK和MTOR mRNA表达水平显著高于对照组(P<0.05)。[结论]紫苏籽可能通过调控LKB1-AMPK-MTOR信号通路和自噬相关基因与蛋白的表达水平,进而调控湖羊肝脏自噬进程。
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