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[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 夏汉祥  廖美德  周靖  徐汉虹  
【目的】研究淡紫拟青霉PL-HN-16对植物生长的促进作用,以期能发现一种新的类植物生长素。【方法】以菜心种子为试验材料,用乙醚萃取PL-HN-16发酵液,对发酵液和萃取液分别进行生物活性测定;同时用硫酸铵分级沉淀发酵液中的蛋白,SDS-PAGE法分析有活性的蛋白组分。【结果】淡紫拟青霉发酵液32倍稀释处理对菜心种子生长有显著促进作用;经乙醚萃取后的发酵液依然有活性,乙醚萃取液则对菜心种子生长有显著抑制作用;45%和60%硫酸铵饱和度沉淀的蛋白对菜心种子的生长具有明显的促进作用。经SDS-PAGE分析,目的蛋白分子质量在28~45 ku,推测对植物生长具有主要活性作用的蛋白分子质量约为36 k...
[期刊] 华北农学报  [作者] 杨婷  廖美德  贺玉广  刘偲嘉  
为明确淡紫拟青霉PL-HN-16促进植物生长的活性因子。采用SaLkowSki比色法、胚芽鞘法和高效液相色谱(HPLC)分析培养物中生长素(iaa);离子柱层析和生物活性跟踪法,明确其促植物生长活性因子。SaLkowSki比色、小麦胚芽鞘试验和HPLC试验结果表明:PL-HN-16不产生iaa;柱层析和活性跟踪结果表明,其促生长活性因子为分子量约14 k Da的蛋白,当蛋白浓度低于0.10μg/m L时,促生长作用呈明显剂量相关性,对菜心生长促进率达13.15%,高于0.10μg/m L抑制菜心生长。PL-HN-16促植物生长因子为分子量约14 k Da的蛋白,有关植物外源激素样功能蛋白研究鲜...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王明祖  
淡紫拟青霉菌(Paecilomyces lilacinus)在室内和室外盆土中对根结线虫卵均有较高的寄生率。采用常规方法,研究了该菌的主要培养特性。寄生菌有轮状分枝的分生孢子梗。分生孢子多数稍呈棱形,少数近椭园形或园形,单细胞,无色。生长和产孢的最适温度范围为25—30℃;适宜的培养基pII为5—9。马铃薯蔗糖琼脂培养基是生长和产孢的最佳而比较廉价的培养基;马铃薯、蛋白胨、蔗糖、硝酸钙、磷酸氢二钠组成的培养基和猪粪浸出液琼脂培养基有利于寄生菌的营养生长。寄生菌对蔗糖、果糖和阿拉伯糖有较好的利用力。全黑暗条件有利生长和产孢,半光照次之,全光照最差。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王秋影  廖美德  王刘庆  李俊彬  林志峰  陈志强  
【目的】对淡紫拟青霉PL-HN-16角蛋白酶的酶学特性进行初步研究。【方法】以鸡毛(黄色和黑色)、鹅毛、猪毛角蛋白为发酵底物,并作为培养基中的惟一氮源,观测发酵液的变化及培养液中的角蛋白酶活性,同时以鹅毛为发酵底物,对淡紫拟青霉角蛋白酶粗酶的最适作用温度和pH进行了初步研究。【结果】PL-HN-16对鸡毛、鹅毛、猪毛均能降解,PL-HN-16角蛋白粗酶最适作用温度为40℃、最适pH为8.0。【结论】在最佳作用温度与pH条件下,PL-HN-16角蛋白酶活性为41U/mL,PL-HN-16对不同发酵底物的降解活性不尽相同。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王艳娜  汪来发  朴春根  张哲峰  
研究了淡紫拟青霉的不同田间分离菌株单孢子后代的异核现象。结果表明,来源于福建、江苏、安徽的4个菌株(19,20,459,641)的单孢子培养后代,在PPDA+1%活性炭的培养基上进行配接试验,仅在19和459 2个菌株间能形成异核体,其频率为12.25%;在配接试验中,2个亲和菌落交界处长出致密的菌丝簇组成的实线,可推测为异核体。从来自菌丝簇线的每个单菌丝尖端培养物中分离出30个以上的单孢子,将其分别移接到PDA平板上,将来源于单孢子的菌落与2个亲本菌落进行比较,有3个菌丝尖端培养物(459-8×19-2,459-7×19-10,459-6×19-1)重现了两亲本类型或出现了新的菌落类型,异核...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 肖炎农  王明祖  王道本  潘志学  
采用摇瓶试验,研究了淡紫拟青霉几丁质酶的形成条件。在马铃薯煎汁、玉米粉、黄豆粉3种天然基质中,以马铃薯煎汁的产酶效果最好。蔗糖、果糖、山梨糖和可溶性淀粉等碳源的添加能增加酶的产量。在氮源方面,酵母膏、蛋白胨、尿素、精氨酸等能促进酶的形成。几丁质酶可为外源几丁质所诱导,当培养液中含有0.2%的粉状几丁质时,酶的产量显著上升。淡紫拟青霉形成几丁质酶的适宜培养基初始pH为6.0~6.5,培养时间以6~8d为佳。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 胡晓云  周思  贺玉广  廖美德  陈永明  陈泽鹏  
【目的】研究含该功能蛋白的菌剂对烟草生长的影响及其在生产中的应用技术。【方法】采用育苗、盆栽及大田试验研究不同浓度淡紫拟青霉菌剂对烟草生长的影响。【结果】苗期试验表明:0.5%菌剂与1.5%菌剂处理后均能促进烟草生长,最大叶叶面积促进率能达到23.13%;2.5%菌剂处理后抑制烟草生长,最大叶叶面积抑制率达到21.68%。盆栽试验表明:0.5%、1.0%与1.5%菌剂处理烟草后均能促进烟草生长,最大叶叶面积促进率能达到20.33%。大田试验结果表明:每株(穴)施用5或10g菌剂的2种处理组与对照组相比,第3片叶及最大叶叶面积促进率分别为32.95%、50.31%和9.95%、14.72%,株高增长率分别为12.13%和15.23%;打顶后前3片叶叶面积促进率能达26.06%,2种处理均能提高烤烟的烟叶品质和产量,烟叶每666.7m~2增加分别为3.51和14.01 kg,上等烟比例分别增加12.61%和16.25%,均价分别增加了1.80和2.20元/kg,每666.7 m~2产值分别增加了285.99和589.34元。【结论】淡紫拟青霉菌剂能够促进不同时期烟叶的生长,增加烟叶产量和经济价值。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王波  李红梅  王碧  付鹏  林茂松  
对淡紫拟青霉和放线菌的拮抗特性及其复配菌剂对南方根结线虫的防治进行了研究。采用杯碟法和平板对峙法测定了淡紫拟青霉菌株PL1和PL2与放线菌菌株LH117和LH121的拮抗性,结果表明两种生防菌4个菌株之间没有明显的拮抗作用;效价法测定结果显示,LH121的发酵上清液对PL2的菌丝生长有轻微抑制作用,抑制率为14.5%。室内生物测定表明,按等体积比例配成的淡紫拟青霉孢子液和放线菌发酵上清液组合的4种复配菌剂处理对根结线虫的卵孵化抑制率和二龄幼虫杀死率分别可达到66.6%和78.0%,明显高于各单菌株处理;温室盆钵试验结果表明,PL1孢子液和LH117发酵上清液的复配菌剂对番茄的根结形成和根结线虫...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 司马晓娇  郑炳松  
Aux/IAA基因家族能够在生长素诱导的早期做出响应,是生长素早期应答的3类基因家族之一。ARF则是一类调控生长素响应基因表达的转录因子,Aux/IAA就是通过其响应元件与ARF特异性结合,从而调节生长素早期应答基因的转录功能。介绍了Aux/IAA的结构特征、调控机制以及生物学功能。植物Aux/IAA基因是由4个保守结构域组成的:结构域Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ和Ⅳ。结构域Ⅰ主要负责Aux/IAA蛋白的阻遏作用,结构域Ⅱ因为含有一段亮氨酸基序,负责Aux/IAA蛋白的快速降解,而结构域Ⅲ和Ⅳ则介导Aux/IAA蛋白与ARF蛋白形成同源或异源二聚体。在生长素信号转导过程中,Aux/IAA主要通过与生长素响应因子...
[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 方佳  何勇清  余敏芬  郑炳松  
生长素响应因子(ARF)是一类调控生长素响应基因表达的转录因子,在生长素的信号传导过程中处于中心位置,它可与生长素响应元件特异结合,促进或抑制基因的表达。介绍了ARF结构特征,生物学功能以及调控机制。植物ARF由3个结构域组成:氨基端的DNA结合结构域(DBD),中间结构域(MR)以及羟基末端的二聚结构域(CTD)。中间结构域包括激活结构域(AD)和抑制结构域(RD)。在生长素信号转导过程中,ARF主要通过与生长素响应元件结合,促进早期基因转录,从而调节下游基因的表达。不同的ARF在不同的组织和器官中都有特异表达,同时通过ARF突变体的研究表明:不同的ARF具有各自独特的功能。这些功能特异性的...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)  [作者] 肖顺  刘国坤  张绍升  
分别比较了菌草+麸皮培养基、麦粒培养基、谷壳+麸皮+虾壳粉培养基、营养珍珠岩培养基和菌草+麸皮+虾壳粉培养基培养食线虫真菌淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)的产孢能力.培养14 d后,淡紫拟青霉在菌草+麸皮培养基上的产孢量达86.80亿个.g-1,明显优于供试的其他培养基.菌草+麸皮培养基具有疏松、通气、比表面积大、菌丝生长迅速、产孢量大等优点,具有良好的应用前景.
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 付艳平  王明祖  姜道宏  
用孢子紫外照射、菌丝原生质体紫外照射和孢子60Coγ射线辐射3种方法对淡紫拟青霉361菌株进行了诱变育种。结果表明,3种方法都能产生对Rhizoctoniasolani具高度拮抗活性的菌株,其中尤以孢子紫外线照射为佳。获得的2123、2245、4414等菌株的拮抗活性比361菌株提高了100%以上。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 郭萌萌  陈明  刘荣榜  马有志  李连成  徐兆师  张小红  
【目的】鉴定生长素胁迫条件下纯合突变体vps25的表型,获得拟南芥液泡分选蛋白AtVPS25的互作蛋白,并分析AtVPS25和其互作蛋白在生长素响应过程中的功能及其分子机制。【方法】根据"三引物法"鉴定突变体;通过观察拟南芥vps25突变体在外加生长素的培养基上的表型,鉴定AtVPS25的功能;以AtVPS25为诱饵蛋白,采用泛素分离系统筛选在拟南芥中与其互作的蛋白;利用酵母互作试验和双分子荧光互补试验(BiFC)验证AtVPS25与AtAIR12(for Auxin-Induced in Root cultures)的互作关系;鉴定AtVPS25和AtAIR12蛋白在植物细胞中的定位情况;采...
[期刊] 林业科学研究  [作者] 王曦茁  汪来发  孟繁丽  郭民伟  朴春根  王源  
[目的]为筛选对南方根结线虫具有高致病力的淡紫拟青霉航天诱变菌株,通过淡紫拟青霉山东寿光菌株搭载神舟八号获得10个淡紫拟青霉航天诱变菌株。[方法]以这10个航天诱变菌株对南方根结线虫卵进行寄生试实验,观察了其发酵液对南方根结线虫卵及二龄幼虫的作用,并对与毒力相关的胞外酶几丁质酶和蛋白酶活性进行了测定。在此基础上,通过盆钵试验方法,检验菌株Sd-m-9、Sd-m-16和Sd-m-26对花椒南方根结线虫的防治效果。[结果]结果表明:10个诱变菌株对南方根结线虫卵的寄生率与原始菌株存在分化,其中有3个诱变菌株的寄生率增强,即Sd-m-9、Sd-m-16和Sd-m-26;这10个诱变菌株的几丁质酶和蛋...
[期刊] 林业科学  [作者] 王曦茁  朴春根  李虹  汪来发  郭民伟  李永  刘晓莉  
基于根癌农杆菌介导的遗传转化方法,选择植物线虫生防真菌淡紫拟青霉的分生孢子为受体,建立以G418为筛选标记遗传转化体系。通过优化遗传转化条件,达到较高的转化效率:1000~2400个转化子·10-6分生孢子。对转化子进行PCR验证,表明T-DNA已整合到淡紫拟青霉的基因组中,表型测定发现转化子的遗传表现稳定。农杆菌介导淡紫拟青霉突变体库的建立,为进一步筛选对植物线虫致病性高的突变体、了解淡紫拟青霉的侵染过程和侵染机制提供基础,对培育更优良的植物线虫生防菌株,开发高效生防制剂等具有重要的意义。
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