【目的】海南油茶的花、果特征和生长发育习性与其他油茶存在明显差异,其倍性尚不清楚。本研究采用流式细胞术和染色体计数法,旨在阐明海南油茶的倍性,为海南油茶授粉树配置和遗传育种研究提供科学依据。【方法】首先,以二倍体大花窄叶油茶作为对照,采集60份海南油茶优株的嫩叶为试材,利用流式细胞仪检测每个样本的DNA含量的荧光强度,根据试材与对照DNA峰值的比值估算样本的倍性;其次,根据流式细胞仪鉴定的结果,以二倍体大花窄叶油茶作为对照,选取34份不同地区不同倍性的海南油茶代表材料,进行根尖染色体制片,在光学显微镜下进行染色体计数,验证对照和试材的流式细胞术检测结果。【结果】流式细胞术检测结果表明:对照二倍体大花窄叶油茶的峰值为50.39,供试的60份海南油茶中,8份峰值范围是205.50～213.42,与对照的峰值相比为八倍体,50份峰值范围是243.16～256.11,与对照的峰值相比为十倍体,另外CMZX-612和TCXYL-61峰值分别是177.09和188.02,与对照的峰值相比疑似为七倍体;同时各样品峰值的变异系数大部分都在5%以内。进一步的染色体计数结果表明:二倍体大花窄叶油茶染色体数为2n=2x=30,供试的34份海南油茶中,8份材料为八倍体(2n=8x=120),其中包括流式细胞术估测疑似为七倍体的CMZX-612和TCXYL-61,这2份材料经根尖细胞染色体计数(2n=8x=120)确认实际也为八倍体; 26份材料为十倍体(2n=10x=150),染色体计数结果与流式细胞术估测结果基本一致。【结论】流式细胞术检测和染色体计数共同表明:供试的60份海南油茶为八倍体(2n=8x=120)和十倍体(2n=10x=150) 2种倍性,其中十倍体占83.3%;海南油茶作为山茶属新发现的一个种,其倍性与其他油茶存在明显差异。海南油茶倍性的确定,可为后续海南油茶的种质资源鉴定、杂交亲本选配以及油茶多倍体的遗传进化等研究奠定基础。

In this study,tetraploid of oil camellia (Camellia oleifera) was identified from the superior clones which were treated with colchicine,and the tetraploid variation was investigated with the experimental material. Analysis of the number of chromosome showed the chromosome number of the tetraploid oi...

本研究利用溶磷圈法和钼锑抗比色法,从油茶根际分离出20株高效溶无机磷细菌,并对其溶磷能力进行定性和定量测试,结果发现,D/d与溶磷细菌的有效磷含量之间没有显著的相关性,而培养液p H与有效磷含量之间存在极显著的负相关性关系(P

【目的】探讨中国油茶苗圃炭疽病原菌种类,揭示油茶苗圃炭疽病菌抗药性,为其防治提供依据和指导。【方法】分离油茶苗圃炭疽病菌,并对分离菌株的ApMat基因进行PCR扩增和测序,通过对序列系统发育分析鉴定炭疽病原菌种类;采用区分剂量法测定所有菌株对杀菌剂多菌灵、乙霉威、戊唑醇和咪鲜胺的抗药性。【结果】湖南、江西、海南和广东4个省份分离的95株的油茶苗圃炭疽病病原菌主要是果生炭疽菌(Colletotrichum fructicola)、暹罗炭疽菌(C.siamense)、山茶炭疽菌(C.camelliae)和胶胞炭疽菌(C.gloeosporioides) 4个种,其中炭疽病菌分布范围最广、分离数量最多(83株,占总分离菌株的87.4%)。抗药性测定结果表明,对多菌灵产生抗性的菌株有31个,占总分离菌株的32.6%;对戊唑醇产生了抗性的菌株有31株,占总分离菌株的32.6%。其中对多菌灵和戊唑醇这2种杀菌剂均具有抗性的菌株有6株,占总分离菌株的6.3%;对多菌灵、乙霉威和戊唑醇3种杀菌剂均有抗性的菌株有2株,占所有分离菌株的2.1%。但所有95个菌株对咪鲜胺敏感,说明目前苗圃油茶炭疽病菌尚未对咪鲜胺产生抗药性。29个高抗多菌灵而对乙霉威敏感菌株第198位氨基酸由谷氨酸(Glu)突变为丙氨酸(Ala),2株对多菌灵和乙霉威具有双重抗药性的菌株第200位氨基酸由苯丙氨酸(Phe)突变为酪氨酸(Tyr)。【结论】我国油茶苗圃炭疽病菌已对多菌灵/乙霉威和戊唑醇产生严重的抗药性,但对咪鲜胺尚未检测到抗药性。

油茶是指种子含油率较高、且有一定栽培经营面积的山茶属(Camellia)植物的总称,目前已知全世界有280种,其中238种分布在我国(张宏达,1998)。油茶作为我国特有的木本食用油料树种,已有2 000多年的栽培历史(庄瑞林,2008),与油橄榄(Olea europaea)、油棕(Elaeis guineensis)、椰子(Cocos nucifera)并称为世界四大木本油料植物。油茶在我国主要分布于长江流域及其以南的14个省(市、区),总面积约有400万hm2,资源总量约占世

为了研究海南油茶光合效率的高低及不同无性系之间光合特性的差异,筛选高光效的海南油茶无性系,以初步筛选的5个油茶优良无性系‘海南2号’、‘海南6号’、‘海南9号’、‘海南18号’和‘海南19号’为试材,利用Li-6400xt便携式光合作用测定系统,测定了其光合作用日变化及光合-光响应曲线和光合-CO_2响应曲线,结果表明:‘海南2号’的净光合速率日变化呈单峰曲线,其它4个油茶无性系的净光合速率日变化呈双峰曲线;‘海南18号’的蒸腾速率呈单峰曲线,其它4个油茶无性系的蒸腾速率呈双峰曲线,峰值分别出现在9:00

应用典型抽样法,调查海南省五指山市油茶资源,观察和比较其生物学性状和经济性状,初步确定了该市的油茶品种结构类型,初步筛选获得2个优良单株.

［目的］选育自交亲和无性系，以探明油茶自交亲和状况。［方法］采用自花套袋、人工自交及自由授粉３种处理，对５０份油茶无性系材料的结实率、人工自交亲和指数（ＣＩ）、相对亲和指数及果实性状进行统计分析。［结果］表明油茶存在高度自交不亲和性，属于自交少孕植物。自花套袋结实率最低，人工自交次之，自由授粉结实率最高。油茶无性系间自交亲和性存在广泛差异，参试材料自交亲和指数介于０ １．３５５ ５之间，其中无性系０５３１号（ＣＩ＝１．３５５ ５）、０５０４号（ＣＩ＝１．０４４ ４）为自交亲和无性系，其它无性系均自交不亲和。参试材料分为３种类型，分别为自交亲和型（２％）、自交不亲和型（８４％）和高度自交不亲和型．．．

从油茶根际土壤中分离筛选出７株溶磷细菌，根据透明圈法和钼锑抗比色法综合分析，最终得出菌株４－Ｙ－０６溶磷活性最强。通过菌落形态特征、生理生化特征、１６Ｓ ｒ ＤＮＡ序列和系统发育分析等研究，初步鉴定菌株４－Ｙ－０６为嗜气芽孢杆菌。同时，研究了不同碳源、氮源、Ｃ／Ｎ、ｐ Ｈ、以及温度等不同培养条件对菌株４－Ｙ－０６溶磷效果的影响。结果表明：解磷菌４－Ｙ－０６在碳源为蔗糖、氮源为硫酸铵、Ｃ／Ｎ为４０：１、ｐ Ｈ ７．０～７．５、３０℃条件下解磷效果最好。

从油茶(Camellia oleifera Abel.)叶片中分离克隆了Rubisco rbcL和rbcS基因的cDNA序列,全长分别为1 522和615 bp.其中,前者的编码区为1 425 bp,编码475个氨基酸;后者的编码区为615 bp,编码176个氨基酸,分别命名为Co-rbcL和Co-rbcS.利用荧光定量PCR研究其在油茶品种‘湘林14’、‘湘林1’和‘横冲89’中的表达,结果显示,油产量较高的品种,这2个基因的转录表达量也较高,3个品种的净光合速率呈现类似于上述基因的表达模式.Pearson分析表明:Co-rbcL与3个品种的油产量和种子产量显著相关(P<0.001);而Co-rbcS与油产量和种子产量具有相关性.另外,净光合速率与产油量、种子产量具有相关性(P<0.001;P<0.01).因此,这2个基因具有作为早期高油产量油茶品种选择分子标记的潜力,结合净光合速率测定,这种早期鉴定将会缩短育种时间并提高育种效率.

【目的】探讨油茶炭疽病复合病菌种类，筛选油茶炭疽病复合病菌的高效杀菌剂，为科学防治油茶炭疽病提供依据。【方法】从湖南、广西、广东、江苏，海南等地油茶成林采集炭疽病叶样本，采用组织分离法分离纯化致病菌，结合形态学和多基因联合系统发育分析进行种类鉴定；通过复合侵染试验研究致病菌之间的关系；采用菌丝生长速率法测定杀菌剂咪鲜胺、苯醚甲环唑、嘧菌酯、啶氧菌酯，氟吡菌酰胺和啶酰菌胺对油茶致病菌的室内毒力。【结果】1）从106个油茶炭疽病病斑中分离获得186株致病菌，其中主要病原菌是炭疽属真菌130株，拟盘多毛孢属真菌18株，新拟盘多毛孢属真菌28株，假拟盘多毛孢属真菌4株，链格孢属真菌6株；分离出单一炭疽病菌的病斑55个，而能同时分离出炭疽病菌和其他致病菌的病斑有51个，其中同一个病斑能同时分离出同属不同种或不同属致病菌的病斑有51个，分离的不同病菌有7种组合方式：同属不同种炭疽菌、炭疽菌和拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和新拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和假拟盘多毛孢属真菌、炭疽菌和链格孢属真菌两两组合以及炭疽菌和拟盘多毛孢属和新拟盘多毛孢属、炭疽菌和拟盘多毛孢属和链格孢属真菌3种菌的组合。2）将炭疽菌属和拟盘多毛孢属，炭疽菌属和新拟盘多毛孢属，炭疽菌同属不同种这3种分离率最多的组合方式致病菌回接到油茶上，发现炭疽病菌和其他致病菌复合接种的病斑显著大于只接同种病菌的病斑，表明油茶炭疽病斑中存在炭疽病菌与其他病原菌复合侵染协同增效的现象。3）室内毒力测定结果显示，苯醚甲环唑和咪鲜胺对炭疽菌属，拟盘多毛孢和新拟盘多毛孢致病菌均具有较强的抑制作用，平均EC50在0.011～0.555μg·mL-1之间；其次是嘧菌酯和啶氧菌酯，这2种药剂对拟盘多毛孢和新拟盘多毛孢的室内毒力最强，平均EC50在0.007～0.020μg·mL-1之间，但对炭疽菌的抑制作用较差；而啶酰菌胺和氟吡菌酰胺对油茶炭疽菌和拟盘多毛孢属致病菌几乎没有抑制作用。【结论】油茶炭疽病斑中存在炭疽菌和其他病菌复合侵染现象，咪鲜胺和苯醚甲环唑可作为防治油茶炭疽病复合侵染的主选药剂。

[目的]本研究旨在探讨不同油茶半同胞子代实生苗的耐低磷能力,筛选耐低磷性强的砧木以及可用来鉴定油茶耐低磷性的关键指标,为油茶良种繁育以及耐低磷的机制研究奠定基础。[方法]以12个品种油茶的半同胞实生苗为研究对象,进行盆苗试验,设定正常磷1 mmol·L-1 KH2PO4、低磷0 mmol·L-1 KH2PO4 2个浓度,测定生物量、叶形态、根系形态、全磷等14个指标,以耐低磷系数为衡量油茶耐低磷的依据,建立逐步回归模型判别耐低磷关键指标。[结果]低磷胁迫减少了大部分油茶地上部分和根系的生物量积累,增加了根冠比和总磷利用效率。主成分分析将14个指标转化为4个独立的综合指标,累计贡献率达90.398%。依据综合评价值(D),12个品种油茶半同胞子代聚类为3种类型,其中,GF20、CL3、84-3为相对不耐低磷类型;W1、CL53、GX48为中间型;G8、CL4、W2、CL40、CL18、83-4为相对耐低磷类型。PA(总磷积累量)、SPC(地上全磷)、TRA(总根表面积)、LW(叶宽)、RPC(根全磷)指标的回归模型为:D=-0.960+0.666PA+0.341SPC+0.379TRA+0.460LW+0.197RPC。[结论]低磷胁迫或许会抑制油茶的生长,但普遍增加根冠比和总磷利用效率。长林18、长林40、赣8、长林4、赣无2、赣石83-4相对耐低磷。总磷积累量、地上全磷、总根表面积、叶宽、根全磷可作为油茶耐低磷性的判断指标。

以构建的油茶cDNA文库为基础,采用交错延伸PCR技术,分离克隆到一个水通道蛋白基因的编码序列(coding sequence,CDS),它编码一个287aa的跨膜蛋白(GenBank蛋白质id:ACF39901)。该蛋白可能由2条基因(GenBank登录号:EU850810、EU850811)编码,这2个基因具有相同的CDS和3′-UTR,但5′-UTR不同,其中之一多了2个小的插入片段。经对该蛋白的同源性比对和特征性基序分析,推测这个水通道蛋白属于质膜内在蛋白成员,定名为CoPIP1-1。通过同源建模,论证CoPIP1-1的水通道活性与通道口的(去)覆盖有关。N端与D环、B环的静电势作用导...

２０１３年广西百色市田林县利周乡油茶苗圃岑软２３号油茶苗出现严重的叶枯病。对叶枯病的病原菌采用组织分离培养、致病性测定、形态特征观察及核糖体内转录间隔区（ｒ ＤＮＡ－ＩＴＳ）基因序列测定。结果表明：引起岑软２３号油茶苗叶枯病的病原菌为茶拟盘多毛孢ＰｅＳＴＡｌｏＴＩｏＰＳＩＳ ＴｈｅＡｅ（ＳＡｗＡＤＡ）ＳＴｅｙＡｅｒＴ。这是广西对油茶叶枯病的首次报道。

【目的】研究湖南省油茶炭疽病病原,为该病害的防控提供依据。【方法】采集湖南省长沙、株洲、浏阳、永州、怀化、常德、常宁等油茶主产区9个样地的典型油茶炭疽病叶,分离纯化叶片病健交界处的真菌菌株,观察菌株在(PDA)培养基上的菌落、分生孢子及附着孢的形态特征,确定为炭疽属真菌。进一步对炭疽属菌株进行柯赫氏法则验证,确定油茶炭疽病病原菌菌株。对获得病原菌的r DNA-ITS、CAL和GAPDH 3个基因进行PCR扩增和测序,得到的基因序列与GenBank中已有模式炭疽属菌株序列按照3个基因一致的顺序拼接后采用PA