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[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
王剑 蒋霞云 卢梦琪 王宗继 李进国 王正碧 孔仪
发酵罐装填系数0.6,控制罐压0.08 Mpa,采用单因素试验方法考察搅拌转速、种子液OD600、接种量和通气量4个因素对壳聚糖酶发酵的影响。根据试验结果确定该菌种10 L发酵罐发酵条件:搅拌转速250 r/min,种子液OD600=0.8~1.0,通气量2.0 vvm,接种量3%,其发酵周期56 h,酶活力在52 h达到最大,为(35.2±0.5)U/mL。补料工艺发酵周期为64 h,酶活力在60 h达到最大,为(46.4±0.5)U/mL。补料工艺能维持产酶期菌丝形态和延长产酶时间,从而提高产酶,最终补料工艺比批次发酵产酶提高了32%。该研究为壳聚糖酶工业化生产奠定了基础。
关键词：
壳聚糖酶 发酵工艺 链霉菌
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
卢梦琪 蒋霞云 司蕊蕊
建立了有效分析浅玫瑰色链霉菌菌体全蛋白质的方法，使用分离范围为ｐ Ｈ ４～７的ＩｐＧ胶条、２Ｄ ｃｌｅａｎ－ｕｐ试剂盒法纯化方法、８０μＧ蛋白质上样量和银染的双向电泳技术，获得了低背景、高分辨率和重复率、无明显条纹的浅玫瑰色链霉菌全蛋白质双向电泳图谱。通过ＩｍａＧｅ ｍａｓｔｅｒ２Ｄ ｐｌａｔＩｎｕｍ７．０软件对壳聚糖诱导条件下浅玫瑰色链霉菌菌体总蛋白质的电泳图谱进行匹配分析，在诱导菌株图谱上有７２３±１４个清晰可见的蛋白质点可供差异分析。与未诱导菌株的双向电泳图谱对比结果显示：１８个蛋白质点在诱导菌株中差异表达，其中１４个蛋白质点的表达量上调，４个蛋白质点的表达量下调，选取１０个差异表达量在．．．
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
姚炎 李菁菁 张雨萌 赵南鹏 丁德征 苏淑慧 付星
为挖掘专一性壳聚糖酶，从多地土壤中筛选出1株高壳聚糖酶活力的真菌M3b，对其进行了形态学观察和18S rDNA序列鉴定，采用单因素试验和正交试验优化固体发酵工艺，研究纯酶的酶学性质。结果显示，菌株M3b为溜曲霉，其最佳产酶发酵条件为：以水为100%计，1%胶体壳聚糖+1%葡萄糖、0.5%硫酸铵、麸皮∶豆粕=6∶10、接种量为10%、发酵6 d、初始发酵pH 7.0、发酵温度32℃。在此条件下酶活力达到20.56 U/mL，是初始发酵条件的221.3%。SDS-PAGE和酶谱分析发现该菌株只产1种壳聚糖酶，分子质量为40 ku。该酶的酶促反应最适pH值为5.5，最适温度为60℃，水解产物聚合度≥2。结果表明，采用溜曲霉进行固体发酵可以显著提高壳聚糖酶的酶活力，降低生产成本，纯化后的壳聚糖酶AtChito40酶学性质稳定，耐酸碱，且能有效地降解壳聚糖。
[期刊] 华北农学报
[作者]
徐君飞 刘正初 张居作 戴良英 陈汉忠 段盛文 冯湘沅 郑科 成莉凤 郑霞
采用因素轮换试验设计和均匀试验设计对现有枯草芽孢杆菌BE-91菌株的发酵工艺进行系统研究,获得木聚糖酶高产的优化发酵工艺为:国产胰蛋白胨1.5%,国产酵母膏0.05%,牛肉膏0.3%,KH2PO40.2%,MgSO40.03%,NaCl 0.5%,吐温80 0.4%,起始pH9.2,摇瓶装液量150 mL/500 mL,接种量3.5%,转速180 r/min,发酵温度37℃。在优化发酵工艺条件下培养BE-91菌株8 h,发酵液木聚糖酶活力达到423.24 U/mL,是优化前酶活力的1.5倍。BE-91菌株在国内已报道菌株中具有发酵周期短、耐热酸性木聚糖酶活力高的特点。
关键词：
均匀试验设计 木聚糖酶 酶活力 发酵工艺
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
魏福卫 蒋霞云 陈舜胜 陈道春 党培育
壳聚糖酶(EC3.2.1.132)能催化壳聚糖分子中β-1,4-糖苷键的水解,以获得具有特殊生理活性的壳聚寡糖(聚氨基葡萄糖,聚合度2-10)。该酶在细菌、真菌等多种微生物中存在。采用透明圈法,以壳聚糖为唯一碳源,从11份虾蟹壳堆积的土壤中分离出51株能降解壳聚糖的菌株。经平板初筛、摇瓶发酵复筛以及产酶动力学研究,确定H2为产壳聚酶活力高、发酵时间短的优良菌株。根据其形态及培养特征、生理生化特性及16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为浅玫瑰色链霉菌,并命名为(Streptomyces roseolus DH)。进一步的基本发酵条件研究显示:该菌株发酵最适温度为30℃,发酵液初始pH为7.2,最...
关键词：
壳聚糖 壳聚糖酶 链霉菌 发酵
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
翟倩 江正强 闫巧娟 邓伟
为进一步研究木聚糖酶的纯化和性质,对本研究室新筛选出的一株高产木聚糖酶的链霉菌Z18的液态发酵条件进行了研究。结果表明:最佳碳源为1.5%(质量分数)的玉米芯水不溶性木聚糖,培养第5天其酶活性浓度达435.03 U/mL。不同来源木聚糖诱导产木聚糖酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳及酶谱分析结果表明,链霉菌Z18能够产生3种木聚糖酶,以22 ku的木聚糖酶为主;初始pH5.5、培养温度30℃时所得木聚糖酶活性最高。在优化后的培养基和培养条件下,第7天链霉菌Z18产木聚糖酶活性达到峰值,其活性浓度为755 U/mL,为目前国内报道链霉菌属最高产酶水平。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
徐姮 李婵娟 洪玉枝
从海洋微生物中筛选到1株具有木聚糖酶活性的考克氏菌(Kocuria sp.Mn22),用单交法研究了不同单因素对该菌株产木聚糖酶的影响。结果表明:用水不溶性和醇不溶性木聚糖诱导该菌株比水不溶性木聚糖诱导产酶量高;较低浓度的Tween 80对该菌株产木聚糖酶具有诱导作用,而高浓度的Tween 80会抑制木聚糖酶的产生;Triton X-100具有抑制作用。对考克氏菌液体发酵条件的正交试验表明:以水不溶性和醇不溶性木聚糖为碳源,牛肉膏为氮源,pH 8.5,Tween 80添加量为0.2%,发酵68 h后,菌株的最高酶活力可达到148.7 IU/mL。
关键词：
考克氏菌 液体发酵 正交试验 木聚糖酶
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
朱吉力 李剑芳 邬敏辰
在对黑曲霉WM20-11产酸性β-甘露聚糖酶的培养基组分和培养条件单因素研究的基础上,设计了Plackett-Burman试验选取主要影响因素,并进行响应面分析。结果表明,黑曲霉WM20-11产酸性β-甘露聚糖酶的最适培养基和发酵条件为:水11.7mL,麸皮9.0g,豆饼粉1.0g,魔芋粉0.98g,玉米浆0.375mL,(NH4)2SO412.5g/kg,CaCl21.0g/kg,MgSO41.0g/kg,KH2PO42.5g/kg(相对于固体料),自然pH;28℃固体静置培养96h,期间翻曲2~3次。在此条件下,菌株产酶活性可达1337IU/g干曲。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
李靖靖 洪平静 王晶 陈小倍 季香芝 柴文枝 高春丽 贾海锋
[目的]本文旨在探究壳聚糖与臭氧对采后葡萄果实保鲜的影响。[方法]以‘阳光玫瑰’葡萄为试材，采用壳聚糖与臭氧处理葡萄果实后放置不同的时间段测定果实生理指标，以不经任何处理的葡萄为对照，以期为‘阳光玫瑰’葡萄采后贮藏提供参考依据。根据前人研究得出的结论和我们的的预实验，筛选出1%的壳聚糖与1 h臭氧处理的效果最佳，因此，本试验处理组采用1%浓度的壳聚糖浸泡60 s以及通1 h浓度为4.288 mg·L~(-1)的臭氧。[结果]壳聚糖与臭氧处理能在短期内（0～20 d）减缓‘阳光玫瑰’糖酸含量的降低，但在20～40 d的效果不明显。壳聚糖与臭氧处理对采后‘阳光玫瑰’的醛类、醇类及萜烯类香气物质保留具有一定的效果，并且有助于提高外观品质及内在品质。[结论]与对照相比，处理显著提高了葡萄果实的可溶性糖和有机酸含量。壳聚糖与臭氧能维持采后‘阳光玫瑰’的香气，尤其是醛类、醇类和萜烯类。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
丁基喆 姜泰兴 李载昌
真菌壳聚糖酶类催化水解壳聚糖,它们在自然界的碳氮循环以及用于处理海洋食品和生产药用寡聚壳聚糖等工业上均有非常重要的意义。自1981年来,已有一些真菌源壳聚糖酶获得了纯化、明确了其特性,并作了序列分析。本文从以下3个方面阐述了真菌壳聚糖酶的近期研究进展:1)从Aspergil-lus fumigatus KH-94,Fusarium solani,Mucor rouxii A·B,Penicillum islandicum,P.spinulosum,Rhodotorula gracilis,Trichoderma reesei,A.oryzae,A.fumigatus Y2K和A.fumigat...
关键词：
壳聚糖酶 纯化 序列分析
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭敬华 孟庆芳 李亚宁 杨文香 张汀 周锟 刘大群
药效试验表明,玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63发酵液对黄瓜白粉病有良好的防效,其中发酵液保护作用的防效为88.63%,治疗作用的防效为82.26%,表明该发酵液对黄瓜白粉病的防治既有保护作用又有治疗作用。通过对喷施发酵液后黄瓜叶片内的抗病相关酶的活性的测定发现,喷施Men-myco-93-63发酵液后黄瓜叶片内POD,CAT,PAL,PPO等酶的活性在一定时间内有明显上升的趋势。
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭敬华 孟庆芳 石琳琪 刘大群
利用透射电镜技术与细胞学相结合的方法探索了Men-myco-93-63发酵液对黄瓜白粉病菌的作用位点,揭示了白粉菌以及寄主细胞在超微结构上发生的变化。利用扫描电镜技术研究了处理前后黄瓜白粉病菌孢子萌发率、菌丝的生长、产孢时间。结果表明:利用透射电镜观察超微结构表明,寄主细胞对病原菌的侵入产生了防卫反应结构,表现为寄主细胞壁加厚,染色加深,在寄主细胞壁下产生结构致密的乳突,在寄主细胞壁与质膜之间有黑色沉积物质。黄瓜白粉菌产生吸器的数目明显减少,吸器畸形,吸器壁增厚,细胞器泡囊化解体,最终吸器坏死,不能从寄主
[期刊] 上海水产大学学报
[作者]
王平平 周培根 王艳 周颖 刘文杰
壳聚糖是由氨基葡萄糖通过β-1,4键连接而成的天然线形高聚物,其在工业、农业尤其是医药、食品等领域都具有重要的应用价值。但由于壳聚糖相对分子质量大,水溶性差,其在人体内不易吸收,使其应用受到限制。而甲壳低聚糖(chitooligosaccharides)不仅水溶性好,易吸收,而且具有抗菌、抗癌以及促进双歧杆菌增殖、增强机体免疫等功能。目前制取方法常用盐酸水解壳聚糖来制备,但该法反应条
关键词：
壳聚糖酶 纯化 特性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
柴萍萍 韦贇 江正强 李里特 日下部功
为获得最佳产酶配方,同时获得高活力的β-甘露聚糖酶,经碳源、氮源、碳氮质量比、初始pH和培养温度5个单因素发酵条件的优化,得到芽孢杆菌WY45发酵产β甘露聚糖酶的最适发酵培养条件:以4g/L魔芋精粉为碳源,1.33g/L大豆蛋白胨为氮源,碳氮质量比为4/1,初始pH5.5,50℃培养时间96h。此条件下,β甘露聚糖酶活性最高可达2800U/mL。
关键词：
芽孢杆菌 β-甘露聚糖酶 发酵 魔芋粉
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
彭萱
对β—葡聚糖酶（ＥＣ３．２．１．７３）高产菌Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ９１２６—６发酵优化的实验结果表明，最佳培养基配比是：大麦份７％，玉米粉３％，豆饼粉５％．在１Ｌ发酵罐中保持温度３５—３７℃、ｐＨ７．０～７．２，搅拌通风培养３ｄ．发酵液的酶活力高达１５４Ｕ／ｍｌ．作者还对大麦β—葡聚糖对９１２６—６β—葡聚糖酶产生的诱导性机制做了初步探讨．
关键词：
β—葡聚糖 β—葡聚糖酶 发酵 诱导效应
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