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[期刊] 实验技术与管理  [作者] 沈筱芸  郭杏  黎远东  陈萍  王琦  冯雁  
流式细胞技术是医学分子与细胞生物学研究领域中重要的检测技术之一。根据流式细胞仪检测教学与科研工作的要求,该文设计了一个应用流式细胞术测定金花茶水提物作用功效的综合类实验项目。通过该实验可以使学生掌握体外细胞扩增和培养技术,以及使用普通倒置显微镜观察评估不同浓度的金花茶水提物对人外周血T淋巴细胞的刺激增殖功效,同时学会采用流式细胞术检测和分析金花茶水提取物是否具有活化T淋巴细胞作用的技术方法,有助于学生更好地理解和掌握流式细胞术的基本原理和实际应用。
[期刊] 水产学报  [作者] 王有基  林江兴  李琼珍  胡梦红  吴芳丽  沙毅杰  吕为群  
为更好地了解翡翠贻贝血淋巴细胞的免疫功能和拓展该贝类在环境免疫学中的应用,本研究调查了其血淋巴细胞亚群分类,并运用流式细胞术分析了各个亚群的相关免疫功能。结果显示,在翡翠贻贝的血淋巴中主要存在3种血淋巴细胞,包括粒细胞、半粒细胞(分大小2种)和透明细胞。粒细胞占细胞总数的40.4%±8.4%,直径(7.49±1.32)μm,细胞内部充满颗粒;半粒细胞占34.6%±9.4%,直径(12.45±2.21)μm,内部含有部分颗粒,其中小半粒细胞直径(6.64±1.05)μm;透明细胞占15.6%±4.8%,直径(4.69±1.01)μm,细胞内部基本无颗粒。流式细胞分析显示,粒细胞在吞噬作用上最为活...
[期刊] 上海海洋大学学报  [作者] 王文娟  蔡春芳  叶元土  施陈江  夏燕美  
从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPM I-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohem agglutin in,PHA)(0μg/mL、80μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1 000μg/mL、1 200μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明:(1)在PHA浓度0~400μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降。其中P...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王益兵  姚军虎  覃定奎  李朝云  杨小军  
【目的】建立以流式细胞术结合Fluo-3-AM测定肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的方法。【方法】分离培养21 d肉仔鸡肠道B淋巴细胞,以不同质量浓度(0,5,10,15,20μg/mL)脂多糖(LPS)刺激B淋巴细胞,测定B淋巴细胞刺激指数(SI),确定B淋巴细胞增殖的最适LPS质量浓度,建立肉仔鸡B淋巴细胞体外增殖试验模型。以最佳质量浓度LPS刺激培养72 h的肉仔鸡肠道B淋巴细胞为研究对象,应用Fluo-3-AM作为钙指示剂,建立肉仔鸡肠道B淋巴细胞胞内Ca2+浓度的流式细胞术测定方法,并用该测定方法探讨不同质量浓度(0,20,40,60,80μg/mL)二十碳五烯酸(EPA)对肉仔...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 张红英  崔保安  王学兵  赵现敏  邱妍  
将24头35日龄断奶仔猪随机分为6组,2种多糖(山药多糖和黄芪多糖)分别以高、低2个剂量(山药多糖剂量17.10、8.55mg/kg,黄芪多糖剂量为11.50、5.75mg/kg)和猪PRRSV灭活苗同时注射,于免疫后不同时间点采血,监测PRRSV抗体水平和外周血中T淋巴细胞亚群的变化.结果表明,2种多糖均能增强免疫猪的体液免疫,其中以高剂量的黄芪多糖效果较好;2种多糖均能促进猪CD3+细胞的增殖,其中以山药多糖效果较好,提示2种多糖对PRRSV灭活苗免疫效果均有较好的增强作用.
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘宸铄  刘芳  杨鸣琦  
【目的】探讨磺酰罗丹明B法(Sulforhodamine B,SRB)检测鸡外周血T淋巴细胞增殖反应的最佳条件。【方法】体外培养鸡外周血T淋巴细胞,选用SRB法对淋巴细胞含量(1×105,1×106,2.5×106,5×106,7.5×106和1×107 mL-1)、ConA质量浓度(5.0,7.5,10.0,12.5和15.0μg/mL)、培养时间(36,48,60h)3个因素进行组合设计培养T淋巴细胞,每个组合设3个重复,SRB显色后用酶标仪在492nm波长处测量OD492值,计算刺激指数(Stimulation index,SI),筛选SRB法检测鸡外周血T淋巴细胞增殖的最佳条件。【结果...
[期刊] 实验技术与管理  [作者] 朴莹   江寅申   刘衍朋   余华海   高小炎  
发现一种三级胺氮氧化物聚合物胶束(OPDEA-PS)具有革兰氏阳性细菌(G+)特异性粘附且对红细胞或其他血液成分粘附相对较弱的特性。利用这一特性研究了一种基于流式细胞术的快速血液细菌分型检测方法。结果显示,将不同比例的金黄色葡萄球菌(G+)和大肠埃希菌(G–)或肺炎链球菌(G+)和铜绿假单胞菌(G–)与血液混合,加入终浓度为0.01 mg/mL的~(Cy5)OPDEA-PS胶束,孵育10 min后用流式细胞术或平板计数法检测,得到流式检测准确率高于90%,平板计数法准确率低于80%。相比而言,流式检测法具有操作简单、快速高效、准确率高的优势。这种用流式细胞术快速分辨细菌革兰氏分型的检测方法将有助于临床上菌血症等急性血液细菌感染性疾病的细菌类型初判,达到及时诊断和治疗的目的。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 于正强  陈瑾  彭西  方静  陈科杰  何杨  
为探明黄曲霉毒素B1(AFB1)对雏鸡细胞免疫功能的影响,将100只1日龄艾维茵健康公雏鸡随机分为4组,分别喂以基础日粮(玉米–豆粕型基础日粮,对照)和AFB1日粮(基础日粮中AFB1的添加量分别为0.15、0.3、0.6 mg/kg,分别记为AFB1Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组),试验期21 d。以流式细胞术检测雏鸡外周血T淋巴细胞亚群变化;用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测雏鸡血清IL–2和IFN–γ含量变化。结果显示,与对照组相比,AFB1Ⅱ和AFB1Ⅲ组7、14和21日龄雏鸡外周血CD3+,CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞百分比下降明显(P<0.05或P<0.01),血清中IL–2和IF...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘永祥  崔锦  程伟  朱宽佑  姜东风  
【目的】研究日粮中添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对仔猪外周血T淋巴细胞的细胞毒活性影响,为将CLA作为免疫调节剂调控动物机体的免疫力和应用于畜禽乃至人类的营养实践提供参考。【方法】30头21日龄杜长大断奶健康仔猪按体质量相近、性别比例一致原则两两配对,随机分为对照组和CLA日粮组,分别喂给基础日粮和2%CLA日粮,每组5个重复,每个重复3头猪,63日龄时用肝素抗凝真空管前腔静脉采取血样,测定外周血T淋巴细胞亚群、细胞毒活性、穿孔素和颗粒酶B mRNA表达及脂肪酸组成。【结果】日粮添加CLA不影响仔猪外周血T淋巴细胞CD3+、CD4+的数量(P>0.0...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 黄克和  陈万芳  
将1日龄罗曼系商品代蛋用健康公雏360羽随机均分成3组。对照组饲喂基础日粮,补硒Ⅰ组和补硒Ⅱ组在饲喂基础日粮的同时分别添加0.3和0.6mg/kg硒。分别于7,21,35和49日龄采用微量全血培养3H-TdR掺入法测定雏鸡外周血T淋巴细胞转化率,LDH释放法测定NK细胞活力,荧光分析法测定血硒含量,化学法测定GSH-Px活性。定期称重并进行临床观察。结果表明,补硒能显著并持续地增强雏鸡外周血淋巴细胞对PHA的应答能力和NK细胞活力。另外,还对全血淋转试验3H-TdR掺入法进行了讨论。
[期刊] 中国水产科学  [作者] 汪开毓  耿毅  黄小丽  
采用含200 mg.kg-1喹乙醇的饲料连续饲喂鲤鱼(Cyprinus carpioLinnaeus),分别于饲喂后的第7天、14天、20天、25天和第30天各剖杀4尾鱼,取肝组织,用流式细胞仪检测其细胞凋亡程度。结果显示,在肝细胞DNA直方图中,于G1峰之前出现一AP峰,且AP峰峰值随染毒时间的延长而升高,肝细胞在不同时期的凋亡率与染毒时间呈正相关。在经喹乙醇染毒第7天,鲤肝细胞的凋亡率平均值为2.05%,而对照组为1.70%,两组间差异不显著(P>0.05);在第14天,可见轻微的AP峰;在第20天,凋亡率达到9.49%,凋亡峰已较明显;在第25天时的AP峰比第14天时峰值明显升高;在染毒...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 罗晓春  李正秋  王金虎  张奇亚  
用白细胞分离介质Histoque 10 77将草鱼外周血液中淋巴细胞分离后 ,依据它们对尼龙毛的粘附特性分为粘附性细胞和非粘附性细胞两个类群。分别检测分离前、后的淋巴细胞的细胞表面超微结构、α 醋酸萘酯酶活性及膜表面球蛋白。结果表明 :表面粗糙细胞、α 醋酸萘酯酶阳性细胞和膜表面球蛋白阳性 (SIg+ )细胞在外周血液总淋巴细胞中的比例分别为 47.8%、15 .2 %和 5 3.8% ,在粘附性淋巴细胞中的比例分别为 82 .3%、0 .1%和 76 .2 % ,在非粘附性淋巴细胞中的比例为 18.3%、2 4.2 %和 2 5 .5 %。
[期刊] 水产学报  [作者] 郭琼林  
草鱼淋巴细胞表面扫描电镜结构特征为有孔穴且较为光滑、具短小细锥状突起 ;中华鳖淋巴细胞、胸腺细胞表面扫描电镜结构特征为凹凸不平、较为光滑 ;它们均以表面凹凸不平特征的占大多数。E花环试验的光镜和扫描电镜观察显示 :草鱼淋巴细胞E花环形成不明显 ,而中华鳖淋巴细胞、胸腺细胞的成花率分别为 2 5 %~ 34%和 36 %~ 47% ,能形成花环的淋巴细胞、胸腺细胞以表面结构特征凹凸不平 (类似哺乳动物T淋巴细胞 )的为主。草鱼、中华鳖血液淋巴细胞和中华鳖胸腺细胞与抗人CD2 单克隆抗体交叉反应的免疫组化检测显示中华鳖血液淋巴细胞和胸腺细胞的CD2 阳性率分别为 2 4%和 33%。草鱼血液淋巴细...
[期刊] 中国水产科学  [作者] 郭志勋  冯娟  王江勇  
通过检测注入斑节对虾(Penaeus monodon)血淋巴内的鳗弧菌(Vibrio anguillarumH)浓度、血淋巴细胞浓度和血淋巴细胞的组成变化,研究斑节对虾血淋巴细胞对进入体内细菌的清除作用。实验显示,斑节对虾能够迅速清除注入其体内的鳗弧菌。注射鳗弧菌悬液(107~108CFU/mL)5 min后,血淋巴中可检测到的鳗弧菌浓度是(1.4±0.6)×106CFU/mL,而2 h后所检测到的鳗弧菌的浓度仅相当于前者的3.1%。7天后,仅在部分个体的血淋巴中检测到少量鳗弧菌。伴随着血淋巴液内鳗弧菌的减少,对虾的血淋巴细胞浓度发生变化。鳗弧菌注入对虾体内5 min后,血淋巴细胞浓度为(3....
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 张彤瑶  高雅松  张爱龙  周家生  宋慧  
为探索不同含量金针菇菇脚(Flammulina velutipes stembase,Fvs)添加到肉鸡饲粮中对肉鸡生产性能以及t、b淋巴细胞免疫功能的影响,采用1日龄健康aa肉鸡270只,随机分为5组,每组3个重复,每个重复18只。试验分为:对照组(基础日粮);抗生素组(基础日粮+0.05%黄霉素);低剂量组(基础日粮+2%Fvs);中剂量组(基础日粮+4%Fvs);高剂量组(基础日粮+6%Fvs)。试验为期42d,检测指标为:生产性能,免疫器官指数,外周血t、b淋巴细胞增殖率(mtt法测定),血清细胞因子il-2、il-4、iFn-γ含量测定(elisa法测定),血清免疫球蛋白iG-a、i...
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