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[期刊] 实验技术与管理
[作者]
吴安庆 聂晶 裴海龙 张健 周光明
根据放射医学专业的实验教学特点,开设了第二课堂讲述流式细胞术的原理和应用,并设计了使用流式细胞仪检测X射线照射后肿瘤细胞的凋亡和周期的实验课。同时,每个星期安排固定时间让学生练习操作,熟练掌握流式细胞仪,加强学生对理论知识的理解,提高学生的科研兴趣和动手能力。
关键词：
流式细胞仪 放射生物学 实验教学
[期刊] 水产学报
[作者]
胡锦丽 任星潮 刘逸尘 孙金生 耿绪云 张亦陈
为了更精确地对甲壳动物血细胞进行快速分类和功能分析,本研究以中华绒螯蟹为例,依据其血细胞内具有颗粒结构的特征,与常规显微观察对比,探讨了一种基于图像流式细胞仪的血细胞自动化分类新方法,并测量了体质量为(10±3) g的中华绒螯蟹的血细胞对直径1μm微球的吞噬情况。结果显示,两种方法都可将中华绒螯蟹血细胞分为4个类群。显微镜观察分类基于胞内可见颗粒,但由于缺乏精细的量化标准,批次样品的人工辨识结果波动较大;而图像流式方法以胞内全部颗粒结构为对象,利用高精度检测模块测量,结果更准确、客观,而且通量高、重复性好。测量结果显示,中华绒螯蟹血淋巴中无颗粒、小颗粒、中颗粒及大颗粒细胞占比分别为40.62%±2.65%、36.68%±6.84%、7.80%±1.16%和16.51%±5.60%,依据测量的颗粒特征区分的4个类群界限清晰,缺乏过渡样点,提示各类细胞之间可能没有相互转化。进一步的活体微球吞噬实验证实,中华绒螯蟹的4类血细胞都具有吞噬功能,并以无颗粒细胞为主要吞噬类群;吞噬微球的细胞比例在注射后6 h内呈钟型曲线变化,4 h可达峰值(5.69%±0.44%),表明中华绒螯蟹血细胞能高效清除血淋巴中的异物。研究表明,图像流式细胞仪适合于中华绒螯蟹的血细胞分类分析和功能研究,本研究结果为同类研究提供了重要参考,将有助于更全面了解甲壳动物血细胞的功能。
[期刊] 清华大学学报(自然科学版)
[作者]
赵精晶 尤政
流式细胞仪是用于高通量细胞分析和分选的高端生命科学仪器,被广泛应用于科学研究和临床诊断。最新的一个发展方向是以微流体芯片为核心的高集成度、微体积、全封闭、零交叉污染的微流体流式细胞仪。该文针对微流体流式细胞仪的三维(3-D)样本聚焦、光斑整形和片上分选等3项关键技术开展了研究。3-D流体动力聚焦微流体芯片能够在每秒数米的高流速下将样本流聚焦在流道中心,聚焦后的样本流边长仅为10μm量级。经设计的二元光学器件可将激光光斑整形为矩形准平顶光斑,比传统流式所使用的椭圆形Gauss光斑,矩形平顶光斑具有更均一的能量分布。采用电火花空化微气泡,利用空泡膨胀产生的射流实现高精度的单细胞片上分选。将整合了上述技术的微流体流式细胞仪应用于标准荧光微球的分析测试,综合性能达到或接近于现有的大型传统流式细胞仪。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
王玉萍 黄巧云 陈雯莉
为确定土壤中的ＤＮＡ通过自然转化的方式发生水平基因转移的频率，将１个带有ｅｇｆｐ和卡那霉素抗性基因ＫＡＮｒ的质粒ＤＮＡ添加到自然土壤中，分离菌悬液，上流式细胞仪分选能发出绿色荧光且具有卡那霉素抗性的阳性转化子，确定土壤中发生自然转化的频率小于１０～（－７）。分离的菌悬液通过培养基的富集，从３９ ７３６ ４２６个细胞中分选获得了８２个细胞，最终得到了纯化的阳性转化子，证实土壤中的ＤＮＡ通过自然转化发生了水平基因转移。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
雷曹琦 谢志雄 李小燕
为了使教学工作紧跟科学发展前沿与热点,该项实验引入DNA损伤修复内容,并使所提出的问题均具有开放性,旨在全方位锻炼学生的自主性与创新性,提高细胞生物学实验教学效果。
[期刊] 上海海洋大学学报
[作者]
王文娟 蔡春芳 叶元土 施陈江 夏燕美
从异育银鲫外周血中分离淋巴细胞,利用RPM I-1640培养基培养48 h后,采用流式细胞仪分析方法研究不同浓度的植物凝集素(phytohem agglutin in,PHA)(0μg/mL、80μg/mL、200μg/mL、400μg/mL、600μg/mL、800μg/mL、1 000μg/mL、1 200μg/mL)对外周血淋巴细胞转化率的影响,旨在探索异育银鲫外周血淋巴细胞体外转化最适刺激剂量。结果表明:(1)在PHA浓度0~400μg/mL的范围内,随着PHA浓度的增加,淋巴细胞转化率也增加,呈浓度依赖的关系,但当PHA的浓度增加到1 200μg/mL,淋巴细胞转化率明显下降。其中P...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
冼健安 王安利 苗玉涛
应用流式细胞术(FCM)对克氏原螯虾(Procambarus clarkii)血细胞的分类、活性和免疫功能进行了研究。结果显示:血细胞可分为透明细胞、小颗粒细胞和大颗粒细胞三个亚群,组成比例分别为(26.25±5.29)%、(51.44±7.02)%和(11.20±1.82)%;螯虾血细胞的平均总凋亡率约为3.12%;血细胞对荧光大肠杆菌的吞噬活力显著(P<0.05)高于荧光微球,吞噬率分别为17.04%和14.57%;血细胞在自然生理状态下含有一定量的活性氧,其在两类颗粒细胞的含量显著(P<0.05)高于透明细胞,在大颗粒细胞中最高。结果表明,FCM能较好地应用于虾类的血细胞分类和功能研究。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
叶昌荣 戴陆园
本文结合笔者利用非放射性标记法进行限制性酶切片断长度多态性（ＲＦＬＰ）研究的实践经验，综述了近年来逐渐被广泛应用的三种非放射性标记法的产生、发展、原理和应用。
关键词：
非放射性标记法,分子生物学
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
武荣花 葛蓓蓓 王茂良 周燕 冯慧
以１８个中国古老月季为试材，以欧芹作为标准植物，采用２种不同的样本处理方法对其基因组大小进行测定，同时利用染色体计数法补充３个存在争议或尚未见报道的中国古老月季品种的倍性，为其基因组大小的确定提供必需的数据支持。结果表明：１）中国古老月季品种‘屏东月季’为二倍体（２ｎ＝２ｘ＝１４），‘桔囊’和‘牡丹月季’为四倍体（２ｎ＝４ｘ＝２８）。２）２种样本处理方法通过单因素方差分析发现，６个品种间差异显著，１２个品种间差异不显著。故２种处理方法均可用于基因组大小的检测，但方法Ⅱ准确度高，受外界影响小，更适宜基因组大小的检测。方法Ⅰ操作简便，可用于大规模的倍性检测。３）１８个中国古老月季品种（含二倍体、三．．．
[期刊] 淡水渔业
[作者]
孙敬锋 冼健安 张铁军 王安利
应用流式细胞术对墨吉对虾(Penaeus merguiensis)、南美白对虾(Penaeus vannamei)、斑节对虾(Penaeus monodon)三种对虾的血细胞类型进行了比较研究。根据其血细胞的前向角散射光(FSC)和侧向角散射光(SSC)特征的不同将血细胞分群,FSC和SSC二维图分析表明三种对虾的血细胞都可分为三个亚群:透明细胞、小颗粒细胞、大颗粒细胞。同时还对各种类型血细胞所占比例进行了比较研究,发现各个亚群血细胞所占组成比例在三种对虾之间具有相似性。其比例均为:小颗粒细胞最多,约为45%~49%;透明细胞次之,约为26%~28%;大颗粒细胞最少,约为10%~12%。
关键词：
流式细胞术 对虾 血细胞 分群
[期刊] 课程教材教学研究(教育研究)
[作者]
刘琼琳
高中生物学基于组织、细胞、环境的理论探索,其基本理论是对于实验内容的探索。生物学实验教学是高中生物学教学的重要组成部分,是培养学生生物学素养的有效环节。我国第八次基础教育课程改革提出了关于加强生物学实验教学的建议。通过实验的教学辅助,可以让学生从动手实践中获得相应结论,更加深刻地理解课程内容,也为将来进一步的学习奠定坚实的基础。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
李佛生 汪红 李一璠 王甜 樊佳 王茂林 林宏辉
为了丰富分子生物学实验教学内容,加深学生对分子杂交原理等专业理论知识的理解,在分子生物学实验教学中开展液相Northern杂交检测microRNA的实验探索。利用荧光标记的寡核苷酸做探针,通过探针灵敏性、杂交温度、杂交时间和杂交液等不同杂交条件的探索,从而简便、准确、灵敏地杂交检测不同植物中的microRNA。整个实验过程仅需几个小时即可完成,且实验结果直观生动。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
黄雄 郭英华 田林 李全梓 岳志强
以买麻藤(Gnetum montanum)为内参,测定5种常用裂解液(Tris·MgCl_2、LB01、WPB、Otto’s、Galbraith’s)对桫椤(Alsophila spinulosa)细胞核的裂解效果,并通过比较桫椤和买麻藤流式细胞仪测定的荧光峰值,计算出桫椤的基因组大小。结果表明:5种裂解液中,WPB为桫椤最佳裂解液;桫椤基因组大小为6 003.25Mb,即2C DNA含量为6.138 pg。
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
朴莹 江寅申 刘衍朋 余华海 高小炎
发现一种三级胺氮氧化物聚合物胶束（OPDEA-PS）具有革兰氏阳性细菌（G+）特异性粘附且对红细胞或其他血液成分粘附相对较弱的特性。利用这一特性研究了一种基于流式细胞术的快速血液细菌分型检测方法。结果显示，将不同比例的金黄色葡萄球菌（G+）和大肠埃希菌（G–）或肺炎链球菌（G+）和铜绿假单胞菌（G–）与血液混合，加入终浓度为0.01 mg/mL的~(Cy5)OPDEA-PS胶束，孵育10 min后用流式细胞术或平板计数法检测，得到流式检测准确率高于90%，平板计数法准确率低于80%。相比而言，流式检测法具有操作简单、快速高效、准确率高的优势。这种用流式细胞术快速分辨细菌革兰氏分型的检测方法将有助于临床上菌血症等急性血液细菌感染性疾病的细菌类型初判，达到及时诊断和治疗的目的。
关键词：
流式细胞术 细菌 血液感染 快速检测
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
林春丹 李秋真 杨东杰 张万松 郑伟博
设计性物理实验是大学物理实验中的重难点。以铜丝电阻温度系数的测定实验为例,针对学生在实验中的重难点和易忽视点,借助眼动仪对比研究了大二本科生、研究生和物理教师三者在实验中的眼动数据特点。通过注视热点图、注视轨迹图等实现了三者在连接电路、调节比例臂等过程中的视觉认识可视化,同时根据瞳孔直径、眼动类型等数据归纳分析了学生在实验中的不足之处。并由此提出了本科生和研究生设计性物理实验教学中的改进方法,为优化设计性物理实验教学提供了生理数据和理论基础。
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