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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
邓振山 何园 李超
通过组织块分离法、梯度稀释涂布法和划线分离法，从健康紫皮和白皮洋葱中筛选得到内生菌，采用平板对峙培养法测定其对１０株供试指示菌的抑菌活性，再以洋葱提取液为对照，对各拮抗菌株的发酵液进行薄层层析和高效液相色谱分析。结果表明，从２种洋葱中共筛选出８７株内生菌，其中内生细菌６８株，内生放线菌３株，内生真菌１６株。通过抑菌试验，发现１２株内生细菌对３至９种指示菌具有抑菌活性，占分离菌株总菌数的２３．０８％，其中ＹＤ–２１、ＹＤ–２３、ＹＤ–２６、ＹＤ–２７、ＹＤ–３２、ＹＤ–３８、ＹＤ–３７、ＹＤ–２２共８株菌株的抗菌谱较广，对９种供试指示菌均具有抑菌活性。薄层层析检测结果表明，菌株ＹＤ–２７发酵产物．．．
关键词：
洋葱 内生菌 抑菌活性 薄层层析 黄酮类
[期刊] 西南农业学报
[作者]
高学策 张岱 魏笑薇 杨志辉 朱杰华 韩志校
【目的】获得有效防治马铃薯黑痣病的芽胞杆菌，并明确其次级代谢产物的抑菌作用。【方法】利用平板对峙法筛选马铃薯黑痣病菌拮抗菌株，通过形态学特征及gyrB序列分析进行鉴定；通过带毒培养基法和平皿对扣法测定脂肽类物质和挥发性有机物抑菌活性；利用特异性引物对菌株G32次级代谢产物5种脂肽类抗生素合成的相关基因sfp、ituA、fenB、bacD、mycB进行检测。通过顶空固相微萃取技术（HS-SPME）富集G32挥发性有机物，利用全二维气相色谱-质谱联用法（GC×GC-MS）进行成分鉴定。【结果】从河北农业大学实验基地采集得到的根际土中共分离得到50株芽胞杆菌，成功筛选得到一株对马铃薯黑痣病菌具有良好拮抗作用的芽胞杆菌菌株G32，抑菌圈为（20.68±0.42）mm。经形态学和分子生物学鉴定为解淀粉芽胞杆菌（Bacillus amyloliquefaciens）。B. amyloliquefaciens G32分泌的脂肽类活性物质和挥发性化合物均可抑制黑痣病菌的生长，造成菌丝扭曲变形，出现囊泡等畸形现象。对B. amyloliquefaciens G32分泌的次级代谢产物进一步分析表明，B. amyloliquefaciens G32具有表面活性素（Suffactins）、伊枯草素（IturinA）、杆菌毒素（BacillomycinD）、抗霉菌枯草菌素（Mycosubtilin）等脂肽类化合物的基因簇；B. amyloliquefaciens G32能产生13种6类挥发性物质，包括酮类、醇类、芳香族类、醚类、有机酸类，其中3-羟基-2-丁酮含量最高为48.90%，其次是2-壬酮（11.33%）和正辛醇（10.84%）；B. amyloliquefaciens G32具有产淀粉酶和纤维素酶的能力。【结论】B. amyloliquefaciens G32可分泌脂肽、挥发性有机物和纤维素酶等多种抑菌物质，对马铃薯黑痣病的防治具有一定潜力，同时为多种抑菌物质的协同增效作用提供了理论基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
冯昭 张旭 徐静
采用化学与生物学活性结合的二级组合筛选模型对红树林植物海莲内生真菌进行筛选,得到优势菌株Pestalotiopsis sp.,从中分离得到4个甾体化合物,通过~1H NMR、~(13)C NMR及MS等现代波谱技术对其进行结构解析,并结合相关文献数据,鉴定化合物分别为:3β-(E)-feruloyllupeol、stigmastan-3-one、β-sitosterol和sitost-5-en-3β-ol acetate,其中化合物分别3β-(E)-feruloyllupeol为首次从红树林内生真菌中分离得到。对4个化合物进行清除DPPH、ABTS自由基以及抗菌活性测试,结果显示,所有化合物均无抗菌、抗氧化活性。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
袁名远 李宇 谭旭辉 刘玉 方昕悦 冉亚兰 何美军
为探究湖北贝母不同组织贝母素乙含量、内生菌组成及其次级代谢产物的抑菌活性,采用气相色谱法测定湖北贝母鳞茎、花、叶的贝母素乙含量,分别利用16S rDNA和ITS测序技术鉴定内生细菌和真菌,并通过琼脂扩散法、微量二倍稀释法研究内生菌次级代谢产物对10株供试菌的抑菌活性。结果表明:湖北贝母叶中贝母素乙含量最高,达(3.99±0.10) mg/g,其含量是鳞茎的1.78倍、花的4.24倍;从湖北贝母中分离鉴定了4株内生菌,分别为Pseudomonas sp. BM-X-6、Arthrinium sp. BM-Z-5、Aspergillus sp. BM-Z-1、Aspergillus sp. BM-Z-3;3株内生真菌次级代谢产物抑菌活性均优于细菌Pseudomonas sp. BM-X-6,其中Arthrinium sp. BM-Z-5的次级代谢产物抑菌谱最广,对肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有中度抑制活性。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张旭 吴小旭 张智慧 胡云捷 秦蕾 王勇
【目的】初步探讨Ac SCL4在洋葱成花中的功能,为解析洋葱成花分子调控机制提供理论基础。【方法】以长日生态型洋葱品系SB2为试验材料,根据已有的洋葱转录组数据,通过q RT-PCR筛选目的基因Ac SCL4后进行基因克隆,并对其进行生物信息学分析;构建Ac SCL4基因的过表达载体p B221-3300-Ac SCL4并转化农杆菌,采用花序浸染法浸染拟南芥,并对T3代纯系转基因植株进行表型分析和开花相关基因表达量分析。【结果】洋葱Ac SCL4基因CDS长1 515 bp,编码504个氨基酸;Ac SCL4蛋白N端高度变异,C端有GRAS结构域。聚类分析发现,Ac SCL4与石刁柏和棉花的SCL4蛋白亲缘关系较近。与野生型拟南芥相比,Ac SCL4过表达植株表现晚花表型。荧光定量PCR结果表明,与野生型拟南芥相比,Ac SCL4过表达植株开花调控基因CO和FT的表达量极显著下降。【结论】Ac SCL4通过调控CO及FT基因表达来抑制洋葱开花。
关键词：
洋葱 AcSCL4 基因克隆 开花调控
[期刊] 沈阳农业大学学报
[作者]
何璐 肖淑琴 关鑫 贺鹏飞 殷志鹏
采用组织分离法从孜然种子中分离纯化出内生真菌ZR-003菌株,并通过形态学观察和ITS序列分析方法确定其种属。采用平板测定法研究了该菌株对19种常见农业致病真菌的抑制作用,ZR-003菌株发酵液经过滤、离心和萃取,旋转蒸干之后利用GC方法对其代谢产物进行分析。研究结果表明:ZR-003菌落絮状、白色、具不明显的放射状沟纹,分生孢子结构稀少,其菌丝帚状结构明显散开,瓶梗形状和菌落特征应属于散枝亚组微紫青霉系中颜色较淡的类群;经分子生物学鉴定,ZR-003菌株的ITS序列与微紫青霉(Penicillium janthinellum)的相似性为99%,属微紫青霉菌;同时确定其对香蕉灰纹病菌[Cordana musae (Zimm.)Hohn.]、稻曲病菌(Ustilaginoidea virens)、苹果斑点落叶病菌(Alternaria alternaria f.sp mali)、小麦根腐病菌[Bipolaris sorokiniana(Sacc.)Shoemakey]、黄瓜黑星病菌(Cladosporium cucumerinum)都具有非常良好的抑制作用,其抑菌率分别为80.00%、81.82%、80.95%、80.00%和80.49%,其中对稻曲病菌的抑菌作用最好。经GC、UV分析可知,ZR-003菌株发酵液提取物在保留时间17.1789min处有明显出峰,其在328nm(λ),20(ε);280nm(λ),1500(ε);244nm(λ),15000(ε)下有明显吸收,与标准样品枯茗醛的色谱光谱特征一致,经计算得到其在发酵液中含量为28.7μg·mL-1,综上可见,孜然内生真菌ZR-003菌株发酵液中含有与孜然相同的药用成分—枯茗醛,从而为枯茗醛的获得开辟了新的微生物来源。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
寇晓琳 谢楠 吴彩娥 范龚健 洑香香
为揭示青钱柳内生真菌的分布、多样性及其代谢产物的抑菌活性,并筛选产黄酮的内生真菌,挖掘植物内生真菌新资源,采用组织分离的方法对青钱柳的枝、皮、叶、根部位的内生真菌进行分离,用马丁氏培养基、察氏培养基、PDA培养基对内生真菌进行培养,通过观察内生真菌的形态特征进行初步分类,同时提取其发酵产物,并以金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念珠菌为供试病原菌对分离的内生真菌进行抑菌活性试验,通过显色试验和薄层层析试验筛选出产黄酮的内生真菌.试验共分离得到67株内生真菌,通过菌落形态和显微形态对分离得到的青钱柳内生真菌进行分类,其分别隶属于3纲4目6科10属;青钱柳不同组织中内生真菌的分离结果不同,其中根部分布的内生真菌从数量和种属上都占优势;马丁氏培养基培养的菌株种类少、数量多,而察氏培养基和PDA培养基培养的菌株种类较多、菌株较少;抑菌试验共得到13株具有抑菌作用的内生真菌,其中有2株内生真菌的发酵产物对供试菌株均表现出较强的抑菌活性,分别属于青霉属和链格孢属;并且筛选出7株菌株(PP03、PY01、PG11、PZ06、PY12、PP12和PP06)具有稳定的产生黄酮类化合物的能力.
[期刊] 华中师范大学学报(自然科学版)
[作者]
魏敏 陈莲 陈剑锋 金桂兰 徐帮 王倩 邹坤 程凡 刘呈雄
从华泽兰根部分离得到一株内生真菌Aspergillus puniceus。采用正相硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱及半制备高效液相色谱等方法，从该菌株的发酵液中分离得到8个结构类似的口山酮类化合物，通过现代波谱技术分别鉴定为3'， 4'-hydrogenated austocystins A（1）、Austocystin M（2）、Austocystin F（3）、Austocystin D（4）、Austocystin B（5）、Austocystin K（6）、Austocystin A（7）、Austocystin H（8）。MTT结果显示化合物5对三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞具有较好的选择性细胞毒活性（IC_(50)为1.28 μmol·L~(-1)）。另外，流式细胞术检测化合物5作用于MDA-MB-231细胞后凋亡率的变化，相比于对照组，最高总凋亡率为69.7%。同时，AO/EB双荧光染色也证明化合物5能够诱导MDA-MB-231的细胞凋亡。JC-1线粒体膜电位检测进一步显示化合物5能够通过线粒体途径诱导三阴性乳腺癌MDA-MB-231的细胞凋亡。
[期刊] 教育发展研究
[作者]
王红艳
新手阶段的发展对教师的整个职业生涯而言具有奠基性意义。对拥有全世界规模最大的中小学教师队伍的中国来说,每年都有大量的新手教师补充到教师队伍中。他们从"在校学习的学生"变身为"学生眼里的教师",是一个需要学习的过程,是学着"做老师"的过程。作为一种发生在实践世界的成人学习,新手教师学习的内容可以描述成由外至里的三层洋葱圈:学习教的知识与技能、理解和领悟教的意义、把握在教的自我。模仿(follow me)、镜道(hall mirrors)和反身性(reflexivity)是分别对应的三种(典型)学习路径。
关键词：
新手教师 学习 教学 意义 自我
[期刊] 华北农学报
[作者]
翟亚辉 马蓉丽 成妍 吴海涛 张光星
利用RAPD和SSR方法研究了37份洋葱种质资源间的遗传多样性,并对这2种分子标记方法进行了比较。结果表明,从15个RAPD引物中,检测到61条有多态性的带;利用筛选出的8对SSR引物,检测到41条多态性带;RAPD和SSR标记均有很高的多态性,RAPD多态性带所占比例为84.7%,SSR位点检测出的平均有效等位基因数为3.75;SSR标记的有效等位基因数、Nei's基因多样性指数及Shannon信息指数的平均值均高于RAPD标记。UPGMA聚类分析表明,2种标记均可将37份洋葱种质资源划分为四大类,聚类结果相似。RAPD和SSR标记均适于洋葱种质的遗传多样性研究,但SSR标记效果较好。
关键词：
洋葱 RAPD SSR 遗传多样性
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张仕林 杨海峰 惠林冲 曹学伟 陈微 侯喜林 李英 王建军
为深入了解洋葱研究的发展现状、研究热点和前沿趋势,以2000—2020年Web of Science(WoS)数据库和中国知网(CNKI)数据库收录的洋葱研究论文为数据来源,利用文献计量学方法,运用Citespace和Excel等软件对发文量、主要发文国家和机构、研究主题、研究前沿等进行统计分析。结果显示:1)WoS关于洋葱研究的发文量呈现逐年上升的趋势,主要出自美国、印度和日本等国家,总占比超过38%;以印度农业研究委员会、美国农业部和美国乔治亚大学等研究机构发文量最高;高水平的文献主要出自美国、日本和韩国等国家的研究机构、学者和期刊。2)CNKI关于洋葱研究的发文量呈现先上升后逐步回落的趋势,发文机构主要包括连云港市农业科学院、东北农业大学和山东农业大学等,总占比超过10%;高水平的文献主要出自北京理工大学、浙江大学和南京农业大学等院校;具有较高影响因子的期刊数量较少。3)国内外研究热点表现出趋同的发展趋势,专注于洋葱营养品质、抗氧化活性、栽培技术、品种选育和病虫害防治等方面;关键词突发性检测表明针对洋葱的酚类化合物、植物促根际细菌、间套作及综合利用等领域可能为研究前沿。以上计量分析结果可为洋葱的深入研究及促进其产业发展提供参考与借鉴。
[期刊] 渔业科学进展
[作者]
衣尧 郑兰红 陈世建 盛军 孙谧
对5株海洋微生物进行发酵培养,发酵液离心后,收集上清液,采用饱和正丁醇萃取制备海洋微生物的代谢产物,采用MTT活性跟踪法,以BEL-7402、RKO、A549、U251和MCF-7等细胞系为模型,对代谢产物进行抗肿瘤活性的筛选。结果显示,菌株S-1和N16代谢产物的活性组分具有较好的抗肿瘤活性:菌株S-1对MCF-7、U251和BEL-7402三种肿瘤细胞的IC50值分别为44、102和82μg/ml;菌株N16对MCF-7和BEL-7402两种肿瘤细胞的IC50值分别为84、133μg/ml。对菌株S-1和N16进行了16S r RNA序列分析、生理生化特征鉴定,结果显示,菌株S-1为短芽孢...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王永勤 田保华 梁毅
【目的】构建大葱和洋葱的种间杂种。【方法】以章丘大葱和洋葱自交系06-38为材料,进行远缘杂交,对杂种子房进行培养;利用CAPS技术对所获得植株进行鉴定;利用花粉染色法、离体萌发法和自交对其进行育性鉴定。【结果】大葱和洋葱正反交,自然状态下胚败育。在未添加激素的MS培养基上进行大葱与洋葱种间正反交后的子房培养,均获得种间杂种F1,授粉后第7天为最佳培养时期;通过子房培养分别获得了大葱×洋葱、洋葱×大葱杂种植株26株和22株;经CAPS检测,杂交后代全部为真杂种。F1杂种植株具有明显的杂种优势,杂种雄性不育。【结论】利用子房培养技术,克服了大葱和洋葱远缘杂种在自然状态下胚败育的情况发生,获得了种...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
赵慧玲 程智慧 刘同金 戴文婧
【目的】筛选适宜与大棚基质栽培辣椒套作的洋葱品种和套种期。【方法】选用3个洋葱品种(黄皮洋葱5803、5805和白皮洋葱Terminator(简称T)),设3个套种期(S1(2011-10-13)、S2(2011-11-02)和S3(2011-11-22)),于2011-03-2012-05在大棚基质栽培辣椒畦内套种洋葱,研究套种期对不同品种洋葱农艺性状(绿体株高、最大绿叶长、假茎粗、绿叶数)、未熟抽薹率、鳞茎特性(横径、纵径、周长、单头质量)和产量的影响。【结果】在套种后20~170d,不同套种期3个品种洋葱绿体株高、最大绿叶长和绿叶数均呈先升高后下降再升高的变化趋势,而假茎粗则呈先缓慢上升...
[期刊] 林业科学
[作者]
周婧 杨琦 李钢 徐静
红树林是生长在热带和亚热带潮间带河口地带的耐盐植物群落,分布在南纬30°与北纬30°之间,具有盐胁迫、高矿物组成、强还原性、频繁的潮汐等特征,也使植物对营养、空间的竞争异常激烈,特殊生境使红树林植物内生真菌多样性丰富,必然会造成不同于其他生态系统的良好生物活性、独特化学结构的活性功能分子。红树属是红树林植物中分布较广泛的一个属,包括8个种,分别是红海榄、红树、红茄苳、美洲红树、Rhizophora harrisonii、R.racemosa、树冬红树和萨摩红树。迄今为止,从红树属分离出内生真菌类群已达23目41科64属,其中对拟盘多毛孢属、青霉属和毛霉属的内生真菌代谢产物研究的最为广泛;从红树属内生真菌中分离鉴定出195种天然产物,包括生物碱类、萜类化合物、香豆素类、色酮类化合物、醌类化合物、杂氧蒽醌类化合物、肽类、酚酸类化合物、内酯类等化合物,从红树属植物中发现许多结构新颖的次生代谢产物,从中国南海红树林红茄苳内生拟盘多毛孢真菌中发现一系列罕见的具有亲脂性取代基的新色酮类化合物pestalotiopsones A-F (107—112),从拟盘多毛孢属JCM2A4中发现2个具有柔性结构的补身烷型倍半萜-环青霉醛酸的新骨架化合物pestalotiopens A和B (83, 84)。此外,许多化合物显示出良好的抗肿瘤、抗菌和抗氧化等生物活性,如化合物pestalpolyol 1(119)具有很强的抑制作用,对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞的半抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))值为4.10μmol·L~(-1)。从内生真菌毛霉QEN-189中分离到的吲哚生物碱rhizovarins A,B和F(46, 47, 50)对肺癌细胞A549抑制作用强,IC_(50)值分别为11.5、6.3和9.2μmol·L~(-1),对白血病细胞HL-60有强抑制作用,IC_(50)值为9.6、5和7μmol·L~(-1)。
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