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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
叶培根 唐万勇 雷宜福 刘莲意 余引娣
某猪场给仔猪注射乙型脑炎弱毒湿苗达1663头时,有137头发生不同程度的反应,并死亡10头,通过调查确诊为过敏反应。并观察到A、B两猪群公猪的后代发生过敏反应较多,而由A、B两猪群杂交而成的C猪群中无一发生反应;用肾上腺素、朴尔敏、可的松等治疗有效。
关键词：
仔猪 乙型脑炎弱毒疫苗 过敏反应
[期刊] 西南农业学报
[作者]
叶茂 郭万柱 徐志文 王小玉 李云云
为了构建和筛选良好的猪乙型脑炎和猪细小病毒的核酸疫苗,并提高核酸疫苗的免疫效果,用重叠PCR法把PPV VP2和JEV E10连接,再将扩增的IFN-γ连入构建载体pcDNA.VEI使其共同表达。用脂质体将pcDNA.VEI介导入Vero细胞,通过间接免疫荧光法检测目的基因的体外表达。用pcDNA.VEI和不表达IFN-Κ的pcDNAZ.VE分别免疫Balb/c小鼠,同时设立PBS、猪细小病毒灭活疫苗、乙型脑炎弱毒疫苗和pcDNA3.1空白质粒免疫对照组。共免疫两次,间隔2周检测免疫指标。结果表明,通过鉴定核酸疫苗的构建达到了预期目标,并可在荧光显微镜下观察到了其转染的Vero细胞。该核酸疫苗...
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵珊 林华 陈世界 杨苗 薛昌华 郝中香 王彬 文彩芳 颜其贵
为了更有效地保护野猪资源，评估其作为种质资源的安全性及人类驯养的风险性，采用Ｔａｑ Ｍａｎ荧光定量ＰＣＲ监测野猪乙型脑炎病毒的携带情况。结果显示，Ｔａｑ Ｍａｎ荧光定量ＰＣＲ敏感性是常规ＰＣＲ检测方法的１００倍，检测时间缩短了１／２。重复性试验中，批内及批间变异系数均低于２％。对４０份家养野猪血液样品进行检测，Ｔａｑ Ｍａｎ荧光定量ＰＣＲ的阳性检出率为１０％，国标（ＧＢ／Ｔ ２２３３３－２００８）中ＲＴ－ＰＣＲ的阳性检出率为５％，灵敏度显著提高。表明该方法可用于野猪乙型脑炎的实时监测和流行病学调查，同时也为野猪群乙型脑炎的净化奠定基础。
[期刊] 华北农学报
[作者]
赵珊 林华 陈世界 杨苗 薛昌华 郝中香 王彬 文彩芳 颜其贵
为了更有效地保护野猪资源,评估其作为种质资源的安全性及人类驯养的风险性,采用TaqMan荧光定量PCR监测野猪乙型脑炎病毒的携带情况。结果显示,TaqMan荧光定量PCR敏感性是常规PCR检测方法的100倍,检测时间缩短了1/2。重复性试验中,批内及批间变异系数均低于2%。对40份家养野猪血液样品进行检测,TaqMan荧光定量PCR的阳性检出率为10%,国标(GB/T223332008)中RTPCR的阳性检出率为5%,灵敏度显著提高。表明该方法可用于野猪乙型脑炎的实时监测和流行病学调查,同时也为野猪群乙型脑炎的净化奠定基础。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
陈果亮 余兴龙
将猪瘟病毒弱毒C株ST细胞苗以不同剂量(106 TCID50和105 TCID50)免疫28日龄仔猪,通过临床症状观察、病理剖检和组织病理学观察、抗体检测、特异性淋巴细胞增殖试验及抗原检测等方法评价疫苗免疫效果。结果表明:该疫苗接种仔猪后无任何临床症状,无病毒血症,无排毒现象;不同剂量免疫组,在2免后10 d左右猪瘟特异性抗体阳转,抗体水平于2免后20 d左右达到峰值。以上结果表明,猪瘟弱毒疫苗毒株C株的ST细胞传代疫苗对仔猪安全有效。
关键词：
猪瘟病毒 C株 ST细胞 免疫效果
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
刘永祥 程伟 邱荣超 姜东风
为研究日粮添加共轭亚油酸(Conjugated linoleic acid,CLA)对细胞免疫抑制剂环孢酶素A(CiclosporinA,CsA)注射仔猪细胞免疫反应的影响,采用2×2试验设计即日粮类型(2%CLA或2%大豆油)和细胞免疫抑制处理(注射CsA或生理盐水),48头21d断奶仔猪随机分为4个处理组,试验期为42d。注射CsA显著提高仔猪的料重比(P<0.05),而日粮添加CLA显著降低仔猪的料重比(P<0.05),且日粮CLA阻止因CsA注射引起的仔猪料重比提高(P<0.05)。CsA注射极显著降低胸腺CD4+和CD8+T淋巴细胞百分数(P<0.01)。日粮CLA显著提高胸腺CD4...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘学芹 曹胜波 李么明 孙敏轩 叶静 周锐 杨影 徐高原 陈焕春
以JEV的NS1基因mRNA为靶序列,设计合成了4个siRNA序列,构建了各自的表达质粒pS-NS1A、pS-NS1B、pS-NS1C和pS-NS1D。通过间接免疫荧光、Western blot检测、RT-PCR和病毒空斑检测等方法对这些siRNAs抑制JEV复制的效果进行了评价。结果表明4个siRNA表达质粒均对JEV在细胞中的复制具有不同程度的抑制作用,其中pS-NS1C、pS-NS1D有显著的抑制作用。说明针对NS1基因的siRNAs可以有效抑制JEV的复制,并有望成为应对JEV感染的治疗方法。
[期刊] 中国卫生经济
[作者]
司磊 江启成
目的:研究对全国15岁以下人群进行乙型肝炎(乙肝)疫苗补种的成本效果。方法:运用Markov模型和蒙特卡洛模拟建立乙肝疫苗补种的卫生经济学模型:评价疫苗补种的卫生经济学效益;使用敏感性分析评价模型的稳定性。结果:疫苗成本加上疾病所产生的经济负担为2 320.60亿元,比不进行补种所产生的经济负担14 548.33亿元减少12 227.73亿元。同时,由于乙肝疫苗的补种减少了1.19亿个伤残调整生命年,挽回一个质量调整生命年的成本是10 260.7元。结论:对全国15岁以下人群进行乙肝疫苗补种是一种低成本高效果产出的策略。
[期刊] 中国卫生经济
[作者]
唐玥 杨益 李瑾慧 苏文莉 张洁 常国辉 黄留玉
目的:通过对目前军队采用的乙型肝炎疫苗全员接种方案与筛检后分类接种方案的经济效益比较分析,为制定更加精准的军队乙肝疫苗免疫策略提供科学依据。方法:采用Tree Age Pro V2011建立两种方案的决策树模型,通过查阅文献获得乙肝相关疾病发病概率、疾病年经济负担等参数信息,代入成本-效益计算公式分别计算两种接种方案的年净效益(NB)值和效益-成本(BCR)比,并比较两者差异。结果:若军内每年需要接种乙肝人数为20万人,全员接种方案和筛检后分类接种方案净效益为228.98万和398.51万元,效益-成本比
[期刊] 华北农学报
[作者]
禹乐乐 滕蔓 罗俊 迟佳琦 余祖华 柴书军 梁晓晓 张改平 王爱萍
为了解猪源乙型脑炎病毒(JEV)的全基因组结构及其分子进化规律,测定了3个JEV猪源分离株(BSF.ZZ-1、BSF.ZZ-3和CSF.XZ-2D)的全基因组序列,并对它们的氨基酸序列进行了分析。结果表明,CSF.XZ-2D全长为10 976 nt,而BSF.ZZ-1和BSF.ZZ-3全长均为10 977 nt,在后2个毒株基因组的10 701 nt位点处均有1个插入碱基"G"。BSF.ZZ-1、BSF.ZZ-3、CSF.XZ-2D与SA14株核苷酸和氨基酸同源性较高,核苷酸同源性都为99.4%,氨基酸同源性均为99.0%,与猪源分离株HW(HW1)、HWe(HW2)和SH0601的核苷酸与氨...
关键词：
猪 乙脑病毒 全基因组 系统进化分析
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
沈红霞 韩秀杰 赵凡凡 张保新 余风艳 王晓杜
猪Sus scrofa domestica日本乙型脑炎病毒(Japanese encephalitis virus,JEV)是引起母猪繁殖机能障碍的重要病原之一,其NS1蛋白参与病毒复制和组装、调节宿主免疫反应功能。提取猪日本乙型脑炎上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增该病毒的NS1基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS1,转化大肠埃希菌Escherichia co1i BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS1蛋白,获得分子量大小为46 kDa的重组蛋白。为了提高表达量,JEV-NS1基因的958...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张元鹏 杨占娜 杨利 李兰 于晓明 杜露平 陈瑾 侯立婷 乔绪稳 侯继波 郑其升
[目的]本试验旨在分析乙型脑炎病毒(JEV)感染猪睾丸(ST)细胞和正常ST细胞miRNA差异表达谱,以探索miRNA在JEV感染过程中的作用及其调控机制。[方法]分别提取正常ST细胞和JEV感染8 h后的ST细胞总RNA,利用高通量测序技术检测分析ST细胞中的miRNA表达谱并进行差异分析。使用miRanda软件对表达差异显著miRNA的靶基因进行预测并对靶基因进行GO分析。选取6个显著性差异表达的miRNA通过RT-qPCR进行验证。[结果]与正常ST细胞相比,JEV感染后的ST细胞有112个差异表达miRNA,其中80个miRNA上调表达,32个miRNA下调表达。经RT-qPCR方法验证6个差异表达的miRNA结果与高通量测序结果一致。差异表达miRNA靶基因的生物学功能相对集中在细胞代谢、细胞黏附等生物过程。[结论]检测和分析JEV感染后猪睾丸细胞的miRNA表达谱,获得了大量的与JEV感染相关的miRNA表达谱数据,为揭示JEV感染生殖系统致病机制提供了有效的数据和理论基础。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
刘辉 熊金凤 邹浩勇 陈杨 杨维红 何启盖
根据猪瘟病毒(CSFV)的E2基因保守序列、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)的ORF7基因及部分ORF6和3-UTR基因序列和猪乙型脑炎病毒(JEV)的E基因保守序列,设计了3对引物,扩增大小分别为288 bp4、30 bp和1 015 bp目的片段。以纯培养病毒抽提RNA,制备cDNA模板,利用3对引物,通过条件的优化,建立了同时检测这3种病毒的多重RT-PCR。CSFV、PRRSV和JEV的RNA最小检出量分别为0.270 ng、0.049 ng、0.067 ng,其它的RNA病毒如TGEV以及DNA病毒如PPV、PrV、PCV-2检测结果为阴性。以-βactin为对照,利用本方法...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
王韦华 张旭 张彦明 邢福珊 徐彦召
【目的】分离鉴定乙型脑炎病毒(JEV),确定分离毒株的基因分型及其E区段氨基酸的序列特征。【方法】采用BHK-21细胞培养法,从猪脑组织标本中分离出1株病毒,对其进行细胞和免疫荧光试验,同时采用RT-PCR扩增并克隆该毒株的PrM、E区段核苷酸序列,利用PrM(456~695位)区核苷酸序列与36株参考序列进行基因分型分析,并对E区核苷酸序列与减毒活疫苗株SA-14-14-2株的相应序列进行比对,分析分离株和疫苗株氨基酸的同源性及关键结构域的差异。【结果】分离出的病毒经细胞病变和直接免疫荧光试验证实为乙脑病毒,命名为SX-BJ07;用该病毒感染BHK-21细胞,72 h后所有细胞均发生病变(C...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
余风艳 韩秀杰 沈红霞 张保新 赵凡凡 王晓杜
提取猪日本乙型脑炎病毒(JEV)上海分离株的基因组RNA,反转录合成cDNA,扩增JEV-NS5基因片段,亚克隆到原核表达载体pET-28(a)上,构建重组原核表达质粒pET-28(a)-JEV-NS5,转化大肠埃希氏菌BL21(DE3)菌株,IPTG诱导表达重组JEV-NS5蛋白,获得分子质量为103 ku的重组蛋白.该蛋白主要以包涵体形式表达,表达量占总菌体蛋白的35%以上,His-band Ni+纯化后,获得高纯度重组蛋白占总蛋白的比例达75%以上.以纯化的蛋白免疫小鼠,制备小鼠抗JEV-NS5抗体,抗体效价达到3×104,并能与病毒感染的样本反应,证明该蛋白具有较好的特异性.
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