- 年份
- 2024(2507)
- 2023(3281)
- 2022(2846)
- 2021(2480)
- 2020(2194)
- 2019(4784)
- 2018(4736)
- 2017(8419)
- 2016(5076)
- 2015(5676)
- 2014(5506)
- 2013(5505)
- 2012(5228)
- 2011(4731)
- 2010(4562)
- 2009(3947)
- 2008(3933)
- 2007(3451)
- 2006(2947)
- 2005(2519)
- 学科
- 济(17561)
- 经济(17547)
- 业(9892)
- 方法(9872)
- 管理(9674)
- 数学(9079)
- 数学方法(8989)
- 企(6753)
- 企业(6753)
- 学(6698)
- 农(6002)
- 农业(3921)
- 中国(3728)
- 财(3448)
- 环境(3307)
- 业经(3189)
- 地方(3062)
- 贸(2918)
- 贸易(2914)
- 易(2832)
- 理论(2483)
- 划(2482)
- 水产(2341)
- 技术(2303)
- 制(2220)
- 教育(2125)
- 务(2121)
- 财务(2120)
- 银(2120)
- 财务管理(2114)
- 机构
- 大学(72957)
- 学院(72775)
- 研究(29716)
- 农(26736)
- 济(24732)
- 经济(24269)
- 科学(24042)
- 管理(22349)
- 农业(22009)
- 理学(19905)
- 中国(19791)
- 理学院(19555)
- 业大(19402)
- 管理学(18914)
- 管理学院(18814)
- 所(17685)
- 研究所(16754)
- 京(15458)
- 农业大学(14564)
- 中心(13293)
- 室(13080)
- 实验(12373)
- 省(12208)
- 实验室(11952)
- 江(11896)
- 业(11857)
- 重点(11281)
- 技术(10804)
- 科学院(10749)
- 财(10160)
- 基金
- 项目(56239)
- 科学(42841)
- 基金(40938)
- 家(39763)
- 国家(39492)
- 研究(32743)
- 科学基金(31643)
- 省(23974)
- 自然(23848)
- 自然科(23279)
- 自然科学(23268)
- 自然科学基金(22886)
- 基金项目(22194)
- 划(21042)
- 社会(19218)
- 社会科(18309)
- 社会科学(18301)
- 资助(16166)
- 教育(15393)
- 计划(15002)
- 科技(13797)
- 重点(13777)
- 发(12369)
- 创(11991)
- 农(11982)
- 科研(11886)
- 专项(11496)
- 业(11466)
- 部(11432)
- 创新(11347)
共检索到102188条记录
发布时间倒序
- 发布时间倒序
- 相关度优先
文献计量分析
- 结果分析(前20)
- 结果分析(前50)
- 结果分析(前100)
- 结果分析(前200)
- 结果分析(前500)
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
周 威1 2 张学文1 2 庄以彬2 刘晓楠2 殷 华2 郁 彭1 刘 涛2
波卓霉素是从波卓链霉菌（Streptomyces bottropensis）中分离得到的，具有抗革兰氏阳性菌及支原体的生物活性，尤其重要的是对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌和抗万古霉素肠球菌有抑菌活性。试验通过构建基因组文库，PCR筛选获得包含完整波卓霉素合成基因簇的柯斯质粒4E11，通过接合转移的方法把4E11转化至天蓝色链霉菌M145中，对获得的异源表达株M145/4E11进行发酵，通过提取纯化和HPLC-MS检测，表明M145/4E11发酵液中产生了波卓霉素；试验并通过Red/ET重组系统，以红霉素启动子（ermE*P1）替换了波卓霉素生物合成簇抗性基因btmA和前提肽合成基因btmD的启动子...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
陈萌 徐敏 王业民 白亭丽 毕德玺 邓子新 陶美凤
通过基因组粘粒文库的高通量接合转移、异源表达和生物活性测定，结合ＤＮＡ序列测定，从刺孢吸水链霉菌ＡＡ９７０２６中筛选具有广谱抗菌活性的小分子化合物及其生物合成基因簇，获得１个对革兰氏阳性细菌和红酵母均有抑制活性的阳性克隆１Ｈ５，其部分ＤＮＡ序列与链丝菌素生物合成基因相似。含１Ｈ５的异源链霉菌宿主的发酵液均能检测到链丝菌素的不同组份，表明１Ｈ５含有完整的链丝菌素生物合成基因簇。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张怡 鲁洲 黄胜 何璟
通过生物信息学分析,在链霉菌SH-62的基因组中发现一个Ⅱ型聚酮合酶基因簇(ents),与已报道的来源于Streptomyces maritimus的肠菌素生物合成基因簇具有高度的相似性。通过构建和筛选链霉菌SH-62的基因组细菌人工染色体(BAC)文库,克隆得到完整的ents基因簇。将ents基因簇导入白色链霉菌中进行异源表达,HPLC和LC-MS分析结果表明该基因簇负责肠菌素的生物合成,从而证实了ents基因簇的生物学功能。
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
张怡 鲁洲 黄胜 何璟
通过生物信息学分析,在链霉菌SHG62的基因组中发现一个Ⅱ型聚酮合酶基因簇(ents),与已报道的来源于Streptomycesmaritimus的肠菌素生物合成基因簇具有高度的相似性.通过构建和筛选链霉菌SHG62的基因组细菌人工染色体(BAC)文库,克隆得到完整的ents基因簇.将ents基因簇导入白色链霉菌中进行异源表达,HPLC和LCGMS分析结果表明该基因簇负责肠菌素的生物合成,从而证实了ents基因簇的生物学功能.
[期刊] 华中农业大学学报(自然科学版)
[作者]
胡欣瑞 贺卫军 吕金 王业民 陶美凤
为将生长快、发酵时间短、遗传操作便捷的稀有放线菌拟无枝酸菌TNS106开发成异源表达宿主,通过同源重组将内源的瑞斯托霉素生物合成关键基因rpsA替换为ΦC31和ΦBT1噬菌体细菌附着位点attB,清除代谢背景并引入整合位点,得到菌株HXR1;将含有来自天蓝色链霉菌的放线紫红素基因簇或来自刺糖多孢菌的多杀菌素基因簇的质粒转到HXR1进行异源表达,检测发酵产物。结果显示,HXR1成功表达放线紫红素和多杀菌素;与红色糖多孢菌宿主LJ161相比,放线紫红素的产生提前1 d,产量提高1.3倍。拟无枝酸菌异源表达宿主HXR1可为从链霉菌和稀有放线菌中发现新的次级代谢产物提供有用的平台。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张淑红 高凤菊 武秋颖 张运峰 范永山
[目的]分析玉米大斑病菌寄主选择性毒素(host selective toxin,HST)生物合成基因簇Cluster 397.3的结构,以及该基因簇组成基因在玉米大斑病菌侵染过程中的表达情况,为玉米大斑病菌HST的结构和功能研究奠定基础。[方法]以玉米大斑病菌23号生理小种et28a和01-23菌株,1号生理小种ny001和01-11菌株,玉米感病自交系B37为材料,利用antiSMASH技术预测玉米大斑病菌次生代谢产物合成基因簇,通过Synteny共线性分析获得玉米大斑病菌HST生物合成基因簇Cluster 397.3,并对其基因组成和结构进行分析,再利用RNA-Seq技术分析该基因簇的组成基因在玉米大斑病菌侵染玉米叶片3,5,7,10 d的表达情况。[结果]玉米大斑病菌次生代谢产物合成基因簇Cluster 397.3与交链链格孢(Alternaria alternata) ACT-毒素合成基因簇有保守的共线性,含有1个聚酮合酶(PKS)、1个氨基甲酰磷酸合成酶(CPS)、1个短链脱氢酶/还原酶(SDR)、1个锌结合氧化还原酶(ZOR)、1个保守假定蛋白(CHP)、2个细胞色素P450(P450)及2个耐药转运蛋白(DRT)等9个基因。其中PKS与ACT-毒素合成酶基因ACTTS3同源,编码的聚酮合酶包括PksD、PS-DH、Methyltransf_12、PKS_KR、PKS_NbtC superfamily和NADB_Rossmann superfamily 6个典型结构域。RNA-Seq分析结果表明,将玉米大斑病菌接种玉米叶片3,5,7,10 d后,Cluster 397.3组成基因均能表达,且以3 d时表达量整体较高;除CHP基因外,01-11菌株中基因表达量均显著高于01-23菌株。[结论]Cluster 397.3基因表达差异与玉米大斑病菌生理小种的分化和致病特异性有关,该基因簇可能参与了玉米大斑病菌寄主选择性毒素的生物合成。
[期刊] 中南林业科技大学学报
[作者]
刘增才 唐玉倩 佟鑫宇 邹莉
【目的】对参与暴马桑黄赤霉素合成途径关键酶-牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合酶（geranylgeranyl pyrophosphate synthase,GGPS）基因进行克隆及诱导表达研究，以期深入了解暴马桑黄的生长发育机制，为获得优质高产的暴马桑黄菌株提供理论依据。【方法】采用PCR扩增技术获得暴马桑黄GGPS基因cDNA全长及启动子序列，利用生物信息学软件对序列进行分析；qRT-PCR技术分析不同浓度茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）对暴马桑黄GGPS基因转录水平的影响，并用分光光度计测定不同浓度MeJA诱导下赤霉素含量的变化；电子天平称量暴马桑黄菌丝体生物量；SDS-PAGE检测暴马桑黄GGPS基因原核表达情况。【结果】将克隆得到的暴马桑黄GGPS启动子和基因分别命名为SbGGPS启动子和SbGGPS基因。SbGGPS启动子分析结果显示，除了含有CAAT-box、TATA-box典型的启动子作用元件之外，还含有MeJA响应元件。基因分析发现，SbGGPS基因cDNA序列全长945 bp，共编码314个氨基酸，蛋白相对分子量35.89 k Da，不存在信号肽和跨膜结构。荧光定量分析、赤霉素含量测定及生物量检测结果表明，SbGGPS基因转录水平、赤霉素含量及生物量均随着MeJA浓度增加呈现显著下降的趋势，三者变化趋势基本一致，并且两两之间均呈显著正相关。SDS-PAGE结果显示，SbGGPS基因能够在原核系统中成功表达出蛋白。【结论】通过对SbGGPS基因的克隆及诱导表达分析发现，该基因在暴马桑黄赤霉素生物合成及生长发育过程中具有重要作用。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
胡廷章 钟彦 陈林 杨俊年 黄小云
为了研究胚胎发育后期丰富蛋白基因OsLEA2的功能,利用PCR方法扩增目的基因,采用基因重组、蛋白质表达和抗逆性分析对OsLEA2基因进行研究。结果表明,构建的原核表达载体pET32a-OsLEA2,转化到E.coli BL21中,得到表达OsLEA2融合蛋白的工程菌;SDA-PAGE分析表明融合蛋白的分子量约为29.4 kDa。OsLEA2的表达增强了大肠杆菌对高盐、高温、低温和紫外照射等非生物胁迫的抗性。该研究为进一步改良作物品种、提高农作物的抗逆性奠定基础。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
王西成 任国慧 房经贵 李阿英 刘洪 吴伟民 赵密珍
【目的】分离和克隆‘藤稔’葡萄内根-贝壳杉烯氧化酶基因(VvKO)、GA2-氧化酶基因(VvGA2ox2和VvGA2ox4)、GA3β-羟化酶基因(VvGA3ox4)和GA20-氧化酶基因(VvGA20ox1)等5个重要赤霉素合成相关基因的ORF序列,并对其进行亚细胞定位与表达分析。【方法】采用电子克隆方法克隆相关基因,构建亚细胞定位表达载体,基因枪转化洋葱表皮细胞后激光共聚焦显微镜下观察。并用半定量和荧光定量RT-PCR方法研究各基因的时空表达。【结果】成功克隆了5个基因的完整ORF序列,对上述基因在葡萄不同组织器官中的表达水平进行分析发现,它们在组织器官间的表达有强弱差异。其中,VvGA2...
[期刊] 华北农学报
[作者]
石建斌 王宁 周红 许庆华 乔文青 严根土
为揭示赤霉素合成途径关键酶基因在棉花生长发育过程中的调控作用,利用实时荧光定量PCR方法中的相对定量方法,对中棉所49材料植株体内的赤霉素合成途径相关基因表达量进行了检测分析。结果显示,幼苗期茎组织内除GA2ox1基因外,其余各基因表达量相对较高。开花期根中GA2ox1、GA3ox1、GID1B,茎中CPS1、GA20ox1、GA3ox1、GID1B和叶中GA3ox1基因表达量上调;吐絮期根中GA2ox1和GA3ox1基因表达量上调,其余基因下调,茎中KS、GID1B基因表达量下调,其余基因上调,其中以GA2ox1上调幅度最大,叶中GA2ox1基因表达量下调,其余基因上调。结果表明,开花期,茎中GA20ox1基因的高表达为植株茎的伸长及果枝发育提供必要的活性赤霉素水平,GA3ox1基因可能与开花成铃有关;吐絮期,随着根茎组织的木质化,根茎中GA2ox1基因表达量逐渐升高以降低活性GAs合成,而叶组织中GA3ox1和GA20ox1基因表达量上调,则为棉桃生长发育与脱水成熟提供必要的激素水平。棉花通过改变植株体内赤霉素合成代谢途径关键酶基因的表达量来调控植株的生长发育,且随着生长发育的进行,各目的基因的表达量变化趋势存在一定差异。为深入研究赤霉素对陆地棉的调控机理提供了理论基础,有助于加快利用赤霉素进行品种改良与种质创新。
[期刊] 华北农学报
[作者]
李珍 刘金兵 刁卫平 王述彬 潘宝贵 戈伟 郭广君
为了明确辣椒花青素生物合成途径中相关基因的表达调控模式,选取3种不同果实颜色的辣椒品系(紫晶、淡紫、水晶)为试材,提取果实不同发育阶段的RNA并反转录成cDNA,利用qRT-PCR技术分析相关基因(CHS、CHI、F3H、F3'5'H、DFR、ANS、UFGT、ANP、GST)在不同辣椒材料果实不同发育阶段的表达情况。结果显示:CHS、CHI在3种材料果实发育过程中表达量都很少且无规律可循,F3H在淡紫、紫晶中表达量较高,且在果实发育的第15~20天时出现较大峰值,与之相比在水晶中的表达量可以忽略不计。F3'5'H、ANP、GST、DFR、UFGT在3种材料中相对表达量随着果实的发育分别呈现同...
关键词：
辣椒 花青素 生物合成 表达分析
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
李勤 黄建安 李娟 刘仲华
将来源于Escherichia coli DH5α的γ-谷氨酰转肽酶基因克隆到高表达质粒pET-32α中,并转化E·coli BL21,构建茶氨酸生物合成的基因工程菌。工程菌在温度为20℃,OD600nm为1.5,IPTG浓度为0.1mmol/L,培养基初始pH为7的条件下,诱导培养6h,γ-谷氨酰转肽酶的酶活力达(4.41±0.17)U/mL,大约是出发菌株E·coli DH5α的18.4倍。直接以工程菌为催化剂,在200mmol/L谷氨酰胺、1.5mol/L乙胺盐酸盐、pH10、20℃的条件下,反应6h,茶氨酸合成量达12.6mg/mL,L-谷氨酰胺转化率为41.05%。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
石建斌 王宁 周红 许庆华 乔文青 严根土
为揭示棉花植株体内赤霉素合成途径关键酶基因表达量与不同组织及环境条件的关系,以"中棉所49"(CCRI49)和"高脚棉"(396289)为材料,利用实时荧光定量PCR方法中的相对定量,以UBQ7为内参基因,对新疆维吾尔自治区阿拉尔和河南省安阳,2种不同生态环境下的CCRI49和396289不同组织内赤霉素合成途径相关基因的表达量进行检测。结果显示,在阿拉尔地区生长条件下,CCRI49果枝始生节位相比于安阳地区平均降低2.0,高脚棉平均降低2.6。在安阳地区,CCRI49和396289中赤霉素合成途径各关键酶基因在不同组织内的表达趋势基本一致,茎组织中各相关基因表达量高,为植株生长提供充足的活性赤霉素;在新疆阿拉尔地区,CCRI49和396289主要表现为赤霉素合成早期阶段CPS1、KS和KO等基因的表达量下调,GA2ox1表达量上调,以减少活性赤霉素的合成。结果表明,棉花植株赤霉素合成代谢途径关键酶基因的表达量发生改变,从而调控植株的生长发育来适应新疆干旱和盐渍化的生长环境。
关键词：
棉花 赤霉素 环境条件 基因表达量
[期刊] 华北农学报
[作者]
刘莉 孙虹丽 程召阳 贾兵 刘普 叶振风 朱立武 衡伟
为探索砀山酥梨褐皮芽变果皮褐色形成机理,试验以褐皮芽变果皮为材料,克隆了木质素生物合成相关的PAL2、4CL1、CAD1、PPO1、POD4等5个酶基因3'端序列,并利用Real-time PCR技术,分析各基因在花后25,50,75,100,125,150,175 d等不同时期的表达差异。结果表明,在基因相对表达量各取样时期,锈酥果皮中PAL2、4CL1、CAD1和POD4相对表达量均高于砀山酥梨。砀山酥梨果皮中木质素增量仅与POD4酶基因表达量存在极显著正相关性,而锈酥果皮中木质素增量与PAL2、4CL1、CAD1和POD4酶基因表达量均存在极显著正相关性。PAL2、4CL1、CAD1和P...
关键词：
梨 褐皮芽变 基因克隆 实时定量PCR
[期刊] 华北农学报
[作者]
王文雅 吕静 朱本忠 常世敏 翟百强 罗云波
为了研究CaM和Ca2+在调控乙烯生物合成和信号转导组分基因表达中的相互关系,利用272 mmol/L CaCl2及272 mmol/L CaCl2+100 μmol/L W5(或W7)处理绿熟期番茄果实圆片,然后采用无菌培养的方法在20℃的 条件下进行培养。结果表明:CaCl2处理能够抑制番茄果实圆片的乙烯生成,抑制LeACO1,NR,LeERF2基因的表达, 而CaCl2+W5(或W7)能消除Ca2+对果实圆片乙烯生成及LeACO1,NR,LeERF2基因的表达的抑制作用,但CaCl2和 CaCl2+W5(或W7)处理均对LeACS2基因表达影响不明显。以上研究结果表明外源钙处理对乙烯生物...
关键词：
钙调素 钙 乙烯 基因表达
文献操作()
导出元数据
文献计量分析
导出文件格式：WXtxt
删除
