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[期刊] 华北农学报
[作者]
张传丽 李同祥 黄天姿 汤薇 王春艳 孙会刚
为探明耐铬(Ⅲ)油菜内生菌BNC-Q菌株对铬(Ⅲ)处理的生理生化反应性特点,以BNC-Q菌株为研究对象,进行了菌种鉴定以及铬(Ⅲ)处理反应性分析等试验。16S rDNA PCR分析结果表明,BNC-Q菌株为阿氏芽孢杆菌。铬(Ⅲ)胁迫培养试验结果表明,BNC-Q对铬(Ⅲ)耐受较强,可在5 mmol/L铬(Ⅲ)浓度条件下保持繁殖能力,可被不高于2 mmol/L的铬(Ⅲ)促进生长繁殖。蛋白质表达分析试验结果表明,经2 mmol/L铬(Ⅲ)处理后,BNC-Q可特异表达出一条约40 ku大小的蛋白质条带。抗氧化性分析试验结果表明,2 mmol/L铬(Ⅲ)处理对BNC-Q菌株清除DPPH自由基的能力基本无影响,但其对超氧阴离子自由基(O■)和羟基自由基(·OH)的清除率分别由63.7%,63.5%上升到91.1%,85.2%。综上所述,BNC-Q菌株为阿氏芽孢杆菌,对铬(Ⅲ)耐受性较强,可被铬(Ⅲ)诱导表达约40 ku的特异蛋白,铬(Ⅲ)诱导处理可显著提高其清除超氧阴离子自由基和羟基自由基的能力。研究结果可为重金属铬的生物修复研究提供一定的基础。
[期刊] 中国农业科学
[作者]
李冠楠 夏雪娟 SENDEGEYA Parfait 何石宝 郭东东 朱勇
【目的】筛选对家蚕(Bombyx mori)具有益生作用的芽孢杆菌,改善家蚕肠道微环境,促进蚕业生产的发展。【方法】采用高温选育法对家蚕肠道内的芽孢杆菌进行初筛;以产胞外消化酶(蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶和淀粉酶)及能在肠道定殖为基础,结合溶血试验、抗生素药敏试验和产消化酶能力大小等对芽孢杆菌进行复筛。通过形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析鉴定菌种,再利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)技术检测其在家蚕肠道内定殖情况及其对肠道内微生物菌群多样性的影响。【结果】共从57株细菌中筛选出两株能同时产蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶和淀粉酶且不产生溶血现象的芽孢杆菌SWL-17和SWL-19。14种抗生素...
[期刊] 海洋渔业
[作者]
谭妙英 常彦磊 张璜 谢会 李丽丽 石磊
为了解芽孢杆菌科细菌的耐药性情况，本研究选择克氏原螯虾（Procambarus clarkii）作为样品分离芽孢杆菌科细菌，鉴定种属后通过微量肉汤稀释法确定菌株对药物的最小抑菌浓度值(Minimum Inhibitory Concentration， MIC)，检测耐药相关基因后通过接合转移实验分析耐药基因的转移情况。结果显示，所有样品共分离出59株芽孢杆菌科细菌，经鉴定可分为短芽孢杆菌属（Brevibacillus sp.）、假芽孢杆菌属（Falsibacillus sp.）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus sp.）和芽孢杆菌属（Bacillus sp.），芽孢杆菌属(Bacillus sp.)数目最多，为44株。药敏实验确定耐药菌株共33株，12株对甲砜霉素药物不敏感，菌株基因检测中共检出21种耐药基因和2种转移元件基因。接合转移实验结果表明，在含甲砜霉素药物的环境中耐药基因可以在芽孢杆菌或类芽孢杆菌与大肠杆菌（Escherichia coli）之间转移，并且耐药表型可传代传播。实验揭示了细菌间甲砜霉素耐药表型传播的高风险，对养殖药物的使用及细菌监测具有一定的指导意义。
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张宝 于雅琼 韩玉竹 游成真 尚庆茂 孔维嘉 李平兰
为获得能够产Iturins类脂肽的芽孢杆菌以应用于植物的生物防治中,以果蔬体内、根际土壤等多生境中分离的118株细菌为出发菌株,采用平板对峙法、管碟法对其进行了初筛和复筛。结果表明:其中3株菌株对立枯丝核菌、瓜果腐霉和尖孢镰刀菌显示出强烈的抑制作用;通过薄层层析等方法对产Iturins脂肽菌株进行初步分析,最终确定K103为目标菌株。通过形态学鉴定、生理生化试验及16SrDNA的分子生物学等方法,对产抗菌脂肽的K103菌株进行分类学鉴定,最终确定菌株K103为解淀粉芽孢杆菌,并将其命名为解淀粉芽孢杆菌K103(Bacillus amyloliquefaciens K103)。
关键词：
解淀粉芽孢杆菌 鉴定 脂肽 生物防治
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
张宝 于雅琼 韩玉竹 游成真 尚庆茂 孔维嘉 李平兰
为获得能够产ＩｔｕｒＩｎｓ类脂肽的芽孢杆菌以应用于植物的生物防治中，以果蔬体内、根际土壤等多生境中分离的１１８株细菌为出发菌株，采用平板对峙法、管碟法对其进行了初筛和复筛。结果表明：其中３株菌株对立枯丝核菌、瓜果腐霉和尖孢镰刀菌显示出强烈的抑制作用；通过薄层层析等方法对产ＩｔｕｒＩｎｓ脂肽菌株进行初步分析，最终确定Ｋ１０３为目标菌株。通过形态学鉴定、生理生化试验及１６ｓｒＤｎＡ的分子生物学等方法，对产抗菌脂肽的Ｋ１０３菌株进行分类学鉴定，最终确定菌株Ｋ１０３为解淀粉芽孢杆菌，并将其命名为解淀粉芽孢杆菌Ｋ１０３（ＢＡｃＩｌｌｕｓ ＡｍｙｌｏｌＩｑｕｅｆＡｃＩｅｎｓ Ｋ１０３）。
关键词：
解淀粉芽孢杆菌 鉴定 脂肽 生物防治
[期刊] 华北农学报
[作者]
周嫒婷 彭睿琦 葛白瑞雪 王芳 伍建榕 马焕成
为探究生防菌以不同方式处理油茶后的转录组变化，明确生防菌提高油茶抗性的分子调控机制。以2年生的油茶苗为试验材料，利用喷叶和灌根2种方式将生防菌特基拉芽孢杆菌接种到油茶苗上，以等量的无菌水作为对照，取处理15 d后的油茶叶片进行转录组分析。结果表明，转录组测序共获得167 118 913条序列，差异表达基因(DEGs)有19 164条，其中，样本CK-vs-DZY 6715的DEGs有4 722个，样本CKG-vs-DZY 6715G的DEGs有14 442个，两组样本共有的DEGs数量为2 573个，样本CKG-vs-DZY 6715G特有的DEGs数量最多(11 869个),最少的是样本CK-vs-DZY 6715(2 149个)。GO富集分析表明，两组样本的DEGs被注释到生物学过程、分子功能和细胞组分，主要涉及代谢过程、细胞过程、单一生物过程、细胞、细胞组分、膜、结合、催化活性、转运活性等。KEGG pathway分析显示，两组样本的DEGs被富集到代谢过程、次级代谢产物的生物合成过程的数量最多，而样本CK-vs-DZY 6715的DEGs还主要被富集到植物激素信号转导通路，样本CKG-vs-DZY 6715G中DEGs还主要被富集到植物与病原体互作通路，主要涉及的与抗病性相关的DEGs大量上调表达，包括pckA、PGAM、ACOX1、FATB、asnB、ansA、FLS、LAR、AUX1、GID1、ETR、FLS2、CDPK、pfkA,但基因表达量在喷叶和灌根方式间存在差异，喷叶中与次级代谢产物的生物合成和植物激素信号转导有关的基因表达量更高，而灌根的则是与代谢过程和植物病原互作有关的基因表达量更高。研究认为，生防菌特基拉芽孢杆菌以喷叶或灌根方式处理油茶均有助于油茶抗病性的增强，只是2种处理方式的主要作用机制略存在不同。
关键词：
油茶 抗病性 转录组分析 生防菌
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
徐菱菱 王丽 陈龙男 谢福莉 李友国
采用形态观察、16S rDNA序列和部分特异基因排列分析鉴定从植物根际土壤中分离的1株根际细菌HNA3;采用平板对峙试验和抑菌率计算方法测定其对供试植物病原真菌的拮抗谱和拮抗能力;通过摇瓶发酵和酸沉淀方法研究相关抗菌活性物质的产生条件及其分离方法;采用表面活性检测和有关功能编码基因的序列分析初步鉴定抗菌活性物质成分的性质。结果表明:HNA3菌株为1种解淀粉芽孢杆菌Bacillus amyloliquefa-ciens;BPY(牛肉膏蛋白胨酵母粉)培养基是适合HNA3生长和产生相关抗菌活性物质的适宜培养基;活性物质存在于发酵除菌液中,可通过酸沉淀方法分离获得。活性物质具有较高的稳定性和抗逆性,属...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
来航线 杨保伟 邱学礼 薛泉宏
通过对采集样品中细菌的分离与纯化,获得9株芽孢杆菌,经纯化培养后观察其个体和群体形态特征,并进行了12项生理生化特征鉴定。结果表明,B10为地衣芽孢杆菌,B13为巨大芽孢杆菌,B12、B14为短小芽孢杆菌,B15为苏芸金芽孢杆菌,B16为蕈状芽孢杆菌,B11,B17,B18为蜡样芽孢杆菌。通过对8株植物病原菌和3株动物病原菌的拮抗试验,初步确定B13,B16,B17,B18的抗菌谱较广,其中B10,B15对棉花枯萎菌,B13,B17对辣椒疫霉菌,B11对西瓜枯萎菌,B10,B17,B18对3株动物病原菌有较好的拮抗能力。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
孙娜 王腾腾 韩慧宗 张明亮 王斐 姜海滨
为获取具有益生特性的芽孢杆菌(Bacillus)应用于养殖生产,从野生蓝点马鲛(Scomberomorus niphonius)和许氏平鲉(Sebastes schlegelii)肠道内分离筛选出两株芽孢杆菌,分别命名为YB1和YH2,其革兰氏染色均呈阳性,基于形态学观察、生理生化特征分析及16S rDNA序列比对,鉴定YB1为蜡样芽胞杆菌(Bacillus cereus YB1),YH2为壁芽孢杆菌(Bacillus muralis YH2)。分析了温度、pH和NaCl含量(w/v%)对YB1和YH2生长的影响,选取蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶特性培养基检测了YB1和YH2的产酶特性,并通过腹腔注射的方式测定了YB1和YH2对许氏平鲉和大菱鲆(Scophthalmus maximus)的安全性。结果显示:YB1适宜的生长条件为温度15～35℃、pH 5～9、NaCl含量0～2%,最适生长条件为温度35℃、pH 7、NaCl含量0;YH2适宜的生长条件为温度15～45℃、pH 5～9、NaCl含量1%～3%,最适生长条件为温度30℃、pH 5、NaCl含量2%;YB1和YH2均具有产淀粉酶和蛋白酶的特性;YB1在浓度≤1×10~8 cfu·mL~(-1)时对大菱鲆和许氏平鲉均是相对安全的,YH2在浓度≤1×10~8 cfu·mL~(-1)时对大菱鲆是相对安全的。研究表明:YB1和YH2具有作为有益菌应用于海水鱼养殖的潜力,可作为候选菌株开发为芽孢杆菌微生态制剂。
[期刊] 淡水渔业
[作者]
贺国龙 刘立鹤 张恒
从100 g左右的健康草鱼(Ctenopharyngodon idellus)肠道中分离出3株疑似芽孢杆菌(Bacillus)菌株(G1、G2、G3),并通过对其进行生理生化特征、16S rDNA全序列和产酶能力的分析,筛选出1株高产酶能力的益生菌株。结果显示:G1、G2和G3菌株与枯草芽孢杆菌在16S rDNA序列相似性≥99%的水平上聚为同一分支,结合形态观察和生理生化特征,最终鉴定G1、G2和G3菌株均为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis);以水解圈直径/菌落直径比值评定了G1、G2和G3菌株的产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶的能力,其中G1菌株产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶能力(比...
[期刊] 华北农学报
[作者]
郭珺 武爱莲 闫敏 李娓 池秀蓉 丁玉川 焦晓燕
拮抗菌Ｐｂ－４是一株对多种植物病原菌有较强抑制作用的菌株。为了明确拮抗菌Ｐｂ－４的分类地位和抑菌机理，通过形态观察、生理生化特征和１６Ｓ ｒｒＮＡ基因序列同源性比对及系统发育树分析，对Ｐｂ－４菌株进行鉴定。并采用平板对峙培养法测定Ｐｂ－４菌株的抑菌谱，显微观察其抑菌作用，采用硫酸铵沉淀和乙醚、苯提取得到抑菌活性物。通过加热处理，明确高温对Ｐｂ－４菌株抑菌活性的影响。结果表明，Ｐｂ－４菌株鉴定为解淀粉芽孢杆菌；Ｐｂ－４菌株对番茄枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、西瓜枯萎病菌、青椒枯萎病菌、辣椒疫霉病菌、苹果腐烂病菌均有抑制作用，其抑菌活性具有广谱性。该菌菌液能明显抑制枯萎病菌孢子的萌发，并对病菌菌丝有致畸．．．
关键词：
解淀粉芽孢杆菌 枯萎病 拮抗菌 抑菌活性
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
朱碧春 顾丽 李正 伍辉军 顾沁 吴黎明 高学文
[目的]本研究旨在从南极土壤中筛选防治玉米细菌性褐腐病的芽孢杆菌菌株,为该病害的防治提供菌株资源。[方法]从南极长城站地震台附近的企鹅聚居地土壤中分离芽孢杆菌。结合16S rDNA及gyr B基因序列对分离到的芽孢杆菌进行鉴定。借助平板抑菌试验筛选对玉米细菌性褐腐病病原菌具有拮抗效果的生防芽孢杆菌。通过田间防治试验,筛选具有较好生防效果的芽孢杆菌。利用MALDI-TOF-MS对芽孢杆菌产生的抗菌物质脂肽化合物进行鉴定。[结果]通过16S rDNA及gyr B基因序列对分离自南极的23株芽孢杆菌进行鉴定,其
[期刊] 淡水渔业
[作者]
但言 马跃岗 朱杰 陈元坤 曾东 谭占坤
从健康大鳍鳠(Mystus macropterus)肠道菌群分离得到25株细菌,通过对菌株胞外酶活力及对鱼类常见病原菌抑制作用进行筛选,从中筛选出一株益生菌DQHY-7菌株。对DQHY-7菌株安全性进行检测,并结合菌株形态观察、生理生化试验,对DQHY-7菌株进行了初步鉴定。结果显示:DQHY-7菌株具有较强的分泌纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶能力,能够抑制大肠杆菌(Escherichia coli)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)和荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)的生长。急性毒性试验表明,浓度为1.0×108CFU/mL的DQHY-7菌悬液对...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
范晓静 杨瑞先 邱思鑫 胡方平
【目的】克隆植物内生解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)BS2的β-1,4-内切葡聚糖酶基因(β-1,4-endoglucanase gene,eglS),探明BS2中该基因与定殖的相关性。【方法】以枯草芽孢杆菌BS168基因组为模板扩增组成型启动子rpsD。依据芽孢杆菌β-1,4-内切葡聚糖酶基因的同源序列设计1对引物,以BS2基因组为模板扩增eglS。将rpsD启动子基因和eglS片段用T4连接酶连接,并对连接产物进行PCR扩增,得到eglS表达盒片段。将表达盒片段插入穿梭载体pGFP4412用以构建eglS过表达质粒。设计引物扩增eglS的同源重组片段,...
[期刊] 淡水渔业
[作者]
唐家毅 刘婕 于铁妹 杨博 王永华 张毅
对从水产养殖环境中筛选出一株菌MM01进行了鉴定和培养条件优化研究。结果显示:此菌MM01能有效的降低养殖水水体中的氨氮和亚硝酸盐含量,经生理生化实验及16S rDNA测序鉴定其为枯草芽孢杆菌。单因素和正交实验结果显示:枯草芽孢杆菌MM01最佳发酵培养基配方为,玉米淀粉18 g/L、玉米浆12 g/L、NH4Cl6 g/L、MnSO4.H2O 0.2 g/L、KH2PO43 g/L、CaCl20.2 g/L、MgSO4.7H2O 0.2 g/L。
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