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[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 廖婷  袁德义  彭邵锋  邹锋  
以普通油茶‘华硕’为试材,运用荧光显微观察法,研究了其自交和异交授粉后花粉在花柱上萌发和花粉管生长变化情况。结果表明:自交和异交授粉后,花粉均能在柱头上正常萌发,且花粉管均能生长到花柱基部,但生长速度不一样,异交的生长速度略快于自交;自交授粉72 h后花粉管到达花柱基部,异交60 h到达花柱基部,自交192 h后花粉管到达胚囊;自交与异交授粉花粉管白天生长速度均显著高于晚上。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 孔广红  余文才  贺熙勇  郑诚  吴超  柳觐  
【目的】探索荧光显微观察澳洲坚果花粉管原位生长的最佳制片方法,为澳洲坚果品种间杂交(不)亲和性及生殖生物学研究提供技术支撑。【方法】以品种‘HAES842’为母本、‘HAES863’为父本,异花授粉5 d后,采集雌蕊为试验材料,经过固定、软化、染色、镜检等步骤,比较分析不同制片方法下澳洲坚果花粉管的荧光显微观察效果。【结果】1)28℃下,NaOH溶液软化、徒手切片法中,选择1、2 mol·L~(-1) NaOH溶液对雌蕊软化,徒手切片容易获得雌蕊的完整组织;浓度为4、6 mol·L~(-1)时,雌蕊细胞反应剧烈,迅速失水后缓慢复水,切片时花柄易脱离,子房和柱头易破裂。2)100℃高温高压整体软化透明法中,NaOH溶液和Na_2SO_3溶液对澳洲坚果雌蕊均具有很好的软化效果,虽然镜检时花粉管被花柱其他组织遮挡,但此方法为整体观察澳洲坚果花粉管提出了新方向。3)未调节pH值和pH值7.0的染色液对澳洲坚果雌蕊进行染色,均未能明显区分花粉管和花柱其他组织;染色液pH值10.0时,花柱其他组织仅发微弱荧光,花粉管发黄绿色荧光,花粉管清晰明了,根根分明。【结论】28℃下,2 mol·L~(-1) NaOH溶液软化待检材料3 h,徒手切片,然后使用强碱性染液染色,能够很好地激发花粉管的黄绿色荧光信号,是澳洲坚果花粉管荧光显微观察的最佳制片方法,此方法能快速、清晰地观察澳洲坚果花粉管在花柱内的生长行为。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王尧  王玖瑞  刘孟军  刘平  
以冬枣和雄性不育3号为母本,大叶无核枣等品种为父本进行品种间授粉,在荧光显微镜下观察人工授粉后柱头上花粉的黏附、萌发和花粉管生长情况。结果表明,不同授粉组合之间有花粉黏附柱头比率、单柱头平均花粉数、有萌发花粉的柱头比率和单柱头平均花粉萌发率差异显著。经不同品种授粉后,冬枣有花粉黏附柱头比率和有萌发花粉的柱头比率之间,及单柱头平均花粉数和单柱头平均花粉萌发率之间无相关性。冬枣×大叶无核枣、冬枣×无核小枣和冬枣×苹果枣三个组合的花粉萌发率高且花粉管更容易深入花柱,是较为理想的杂交组合。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 肖晓凤  周兰英  
【目的】确定欧李花粉粒萌发时间,观察花粉管的动态变化过程,从微观角度了解欧李的授粉受精特性。【方法】对欧李进行人工授粉,取授粉后1-10d的雌蕊,采用荧光显微镜技术观察花粉粒的萌发生长情况以及子房受精过程。【结果】欧李柱头开裂时间为11:00-13:00,有粘液分泌;授粉后2h,少量花粉粒在柱头上萌发;授粉后8h,花粉管初步形成且主要集中在花柱上部;授粉后24h,花粉管成束状形式进一步伸长;授粉后3d,子房中胚珠完成受精;授粉后5d,花粉管呈现断裂、不连续状态,并开始解体;授粉后8d,花粉管完全解体,柱头
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 刘建鑫  于晓南  
以探明牡丹与芍药远缘杂交结实率低的原因为目标,以芍药‘朱砂判’为母本,以牡丹‘凤丹白’、‘岛大臣’、‘正午’、‘姚黄’为父本,并以芍药品种‘Kansas’为对照父本进行人工杂交,采用培养液培养法测定父本花粉萌发率,用苯胺蓝染色法,在荧光显微镜下观察父本花粉在母本柱头上萌发及花粉管生长的过程。结果显示:‘朱砂判’在开花第4天为最佳授粉期;离体状态下花粉萌发率由高到低为‘Kansas’、‘岛大臣’、‘凤丹白’、‘姚黄’、‘正午’;‘岛大臣’及‘Kansas’作父本的组合花粉管能够到达子房,其他组合花粉管都未到达子房,并观察到一些异常的花粉管形态,花粉管生长过程中还伴随着一系列胼胝质反应。表明受精前...
[期刊] 水产学报  [作者] 杨泽琴  李荣华  母昌考  宋微微  王春琳  
为了研究管角螺受精卵在受精和早期卵裂过程中的核相变化以及保育卵的形成,实验通过HoecHst 33258染色、荧光显微观察方法,对管角螺受精和早期卵裂过程中核行为的细胞学变化进行了详细观察,并对其胚胎发育过程中的数量变化进行统计分析。结果显示,管角螺的成熟未受精卵呈卵圆形,平均卵径(0.33±0.03)mm,核相处于第一次成熟分裂中期,在水温为(26±2)°c条件下,1 H精子入卵,2~3 H受精卵先后排出第1、第2极体,完成第一次和第二次成熟分裂,6 H雌、雄性原核形成,靠近融合,第一次卵裂形成2细胞,12~24 H时2细胞继续分裂生成4细胞。研究表明,管角螺受精卵在成熟分裂和卵裂过程中表现...
[期刊] 水产学报  [作者] 孙慧玲  方建光  王清印  张继红  梁兴明  燕敬平  孔杰  杨爱国  姜明  
采用荧光染色剂DAPI己固定的泥蚶成熟卵和受精卵进行染色的方法 ,在显微镜下观察泥蚶受精细胞学过程。通过DAPI的染色 ,在荧光显微镜下可清楚观察到 ,泥蚶的成熟未受精卵处于第一次成熟分裂的中期 ,精子入卵后成熟分裂再次启动 ,释放出第一和第二极体 ,完成成熟分裂。部分受精卵的第一极体有极明显的分裂现象。精子入卵的部位是随机的 ,且自精子入卵至成熟分裂完成 ,入卵的精子在形态等方面将发生一系列变化 ,形成雄性原核。雌雄原核形成后均具有极明显的膨大现象。并且在系列的样品中可观察到 ,在雌雄原核联合的过程中具有雄性原核向雌性原核移动的趋势
[期刊] 中国水产科学  [作者] 任建峰  杨爱国  董迎辉  刘志鸿  周丽青  
采用二氨基苯基吲哚(DAPI)染色荧光显微方法,对栉孔扇贝(Chlamys farreri♀)×长牡蛎(Crassostrea gigas♂)受精过程进行详细观察。结果显示,长牡蛎精子能迅速附着并穿过栉孔扇贝卵膜,精核发生解凝缩而膨胀形成雄性原核;精子入卵后,栉孔扇贝卵子减数分裂重新启动,释放极体并形成雌性原核,最后雌、雄原核融合,受精卵开始第1次卵裂。栉孔扇贝与长牡蛎杂交受精率一般在40%左右。受精卵发育过程中出现了排放2个极体、排放1个极体、不排放极体3种类型,所占受精卵比例约为65%、25%和10%。多数受精卵第1次卵裂后期,染色体发生异常分离,不能平均分配到2个子细胞中,这可能是造成早...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 李映志  余庆  李洪波  吴钿  叶春海  
为了解菠萝蜜(Artocarpus heterophyllus Lam.)受精及胚发育过程,采用荧光显微、整染透明及石蜡切片法观察菠萝蜜的花粉萌发和胚发育过程。结果表明:1)菠萝蜜授粉6 h后,花粉粒开始萌发;授粉12 h后,花粉管开始进入花柱;授粉72 h后,花粉管通过花柱进入子房;2)谢花后第9天,胚乳先于合子分裂;谢花后第16、18和21天,胚依次发育至球形胚、心形胚和子叶胚,胚乳为细胞型胚乳;3)菠萝蜜不形成种子的主要原因有胚囊败育、胚珠败育及胚囊未受精。
[期刊] 林业科学  [作者] 甘国峰  陆叶  徐进  施季森  
通过间接免疫荧光标记对杉木花粉和花粉管内微管骨架的分布进行观察,结果显示:杉木花粉在萌发初期的花粉中存在浓密的微管网络,主要呈现横向或斜向分布;花粉萌发后,微管开始从花粉粒延伸入花粉管中,花粉粒和花粉管基部微管排列呈现横向、斜向或螺旋状排列;在杉木花粉管中部微管骨架则主要呈现与花粉管伸长相平行的网络状分布,在部分伸长初期的花粉管中微管会延伸到花粉管顶端。在多数花粉及花粉管中微管主要分布在细胞的周质。在花粉管顶端微管分布有3种形式:1)在花粉管亚顶端有垂直于花粉管伸长方向排列的微管;2)花粉管中微管呈螺旋状分布并延伸到顶端;3)微管在花粉管顶端形成复杂的网络结构。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 陈娟  王森  邵凤侠  
【目的】探究适合观察枣花授粉荧光显微观察效果的最佳制片方法,为枣树授粉受精研究提供方法依据。【方法】以4年生、生长发育良好的‘中秋酥脆枣’枣花作为试验材料,经过固定、水洗等步骤,采用不同软化和染色方法对枣花进行处理,压片后在荧光显微镜下拍照,比较不同处理下枣花授粉的荧光显微观察效果。采用NaOH溶液对枣花柱进行软化,设置1、2、3、4和8 mol/L 5个浓度梯度,分别软化0.5 h和1 h,软化后用水溶性苯胺蓝溶液对枣花进行染色,设置0.01%、0.05%和0.10%3个浓度梯度,分别染色0.5、1和4 h。【结果】相同处理时间,NaOH溶液浓度越高,枣花花柱软化程度也越高;而NaOH溶液浓度越高,所需要的软化处理时间也越短。选择1、2和3 mol/L NaOH溶液对枣花进行软化,都能取得良好的压片效果,但当NaOH溶液浓度超过4 mol/L后,枣花花柱组织明显变软,压片时组织也容易破碎。在相同软化方法处理的条件下,同一浓度水溶性苯胺蓝溶液的染色时间增加,对花粉管的染色效果并没有产生明显的增强作用;而在相同染色时间内,用高浓度的水溶性苯胺蓝溶液对枣花进行染色,染色效果较低浓度的要好。【结论】1)选择1 mol/L或2 mol/L NaOH溶液来处理枣花花柱,都能取得较好的制片效果。2)在软化时间的选择上,软化0.5 h就能取得较好的压片效果,这能缩短试验需要的时间;在相同染色时间内,用高浓度的水溶性苯胺蓝溶液对枣花进行染色,染色效果较低浓度的要好。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 翟学杰  董凤祥  张日清  王贵禧  梁丽松  
采用固体培养基研究了不同浓度的蔗糖、硼和钙配比对杂交榛花粉萌发及花粉管生长的影响。结果表明:蔗糖、硼酸浓度间对花粉萌发有显著影响,钙浓度间对花粉萌发的促进作用不明显;蔗糖150 g.L-1、硼酸100 mg.L-1时最适宜花粉管伸长;蔗糖的缺乏会导致胼胝质在花粉管顶端积累,使其生长停滞,缺硼时胼胝质在花粉管内分布正常。杂交榛花粉适宜的培养基为:蔗糖150 g.L-1+硼酸100 mg.L-1+氯化钙100 mg.L-1+琼脂10 g.L-1。
[期刊] 林业科学  [作者] 甘国峰  徐进  陆叶  施季森  
花粉萌发、花粉管生长是植物有性生殖的重要环节,包含许多复杂的生理过程。微丝是细胞骨架重要组成成分,很多研究表明微丝在花粉萌发、花粉管内原生质流动(Justus et al.,2004)、花粉管顶端生长(Li et al.,2001)等方面具有重要的作用。花粉管
[期刊] 林业科学  [作者] 尚峰男  宋少宇  田菊  王君  
采用离体培养结合荧光定位技术对油松花粉管生长特征和微丝骨架分布规律进行研究。结果表明:油松花粉离体萌发过程,除大量呈单一花粉管形态外,还存在异形花粉管,如具2条花粉管及分枝花粉管等;在适宜培养条件下,培养60h后萌发率趋于稳定(91%以上),培养96h后花粉管长度逐渐趋于稳定(173μm以上);异形花粉管发生频率与花粉萌发率呈极显著正相关(r=0.7867,P=0.0041),花粉管分枝发生于管伸长至89.73(±3.44)μm处;在不同形态的花粉管中均有微丝骨架正常分布,并且推动花粉管细胞核和造粉体向花粉管顶端移动;在花粉管的透明区,微丝束呈现平行于花粉管的浓密网状结构,当花粉管生长较长时,...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张大爱  杜莹  钱一萍  赵绪明  高金锋  王鹏科  高小丽  杨璞  冯佰利  
【目的】探究甜荞的结实性及授粉受精过程中花粉管的生长动态,为甜荞自交不亲和性机理的研究奠定基础。【方法】以同型花和异型花甜荞品种为材料,在温室条件下利用自然和人工杂交授粉,调查结实率,并对异型花品种的自交和杂交花柱进行荧光显微观察。【结果】1)同型花品种结实率31.5%~72.7%,其为自花结实性品种;异型花品种的结实率为0~6.3%,其为自花不结实品种。2)异型花的异类型花之间杂交结实,其中以长花柱为母本杂交时的结实率高于以短花柱为母本杂交时的结实率;异型花的同类型花之间杂交时不结实或结实率很低,少量的结实发生在长花柱与长花柱类型杂交之间。3)在异型花品种中,长花柱与长花柱杂交授粉,花粉萌发...
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