【目的】筛选适合油茶‘华金’Camellia oleifera‘Huajin’未授粉胚珠诱导愈伤组织的最适培养基，并对愈伤组织进行细胞学观察，为油茶单倍体育种提供依据。【方法】以油茶‘华金’为试材，筛选未授粉胚珠诱导愈伤组织的最适培养基配方，研究基础培养基类型MS培养基、木本植物用培养基(WPM)、MT培养基、1/2MS培养基、B5培养基、生长素萘乙酸(NAA)、吲哚乙酸(IAA)、吲哚丁酸(IBA)、二氯苯氧乙酸(2,4-D)和细胞分裂素苄氨基嘌呤(6-BA)、激动素(KT)、噻苯隆(TDZ)组合，以及植物生长调节剂浓度对愈伤组织诱导的影响；选取不同外部形态的愈伤组织进行石蜡切片，并根据流式细胞仪的倍性鉴定结果，研究愈伤组织来源及发育进程。【结果】MS作为基础培养基，添加1.0mg·L~(-1) NAA+2.0 mg·L~(-1) TDZ+40 g·L~(-1)蔗糖的诱导率最高，为92.97%,NAA和TDZ对诱导率影响显著(P

以棱角山矾叶片为外植体进行愈伤组织的诱导与增殖研究,并利用扫描电镜和透射电镜对愈伤组织进行细胞形态学观察。研究结果表明:叶基和叶中是棱角山矾叶片愈伤组织诱导的最佳部位,且宜选择远轴面向上的接种方式。棱角山矾叶片表面灭菌最适方法为70%酒精灭菌30~90 s,再用2%次氯酸钠灭菌3 min。愈伤组织诱导的最适培养基为B5+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L NAA+30 g/L蔗糖,该培养基上诱导率达到最高,为91.11%。愈伤组织增殖的最适培养基为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.1 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L NAA+30 g/L蔗糖,...

应用化学杂交剂Ｓｃ２０５３诱导小麦雄性不育的形态学和细胞学特征观察结果显示，经处理的小麦植株变矮，植株及麦穗呈现浅绿色，穗子呈爆裂状，花药不开裂，呈现雄性不育株的形态特征，这些特征可做为估算小麦群体化学杀雄效果即绝对不育率的依据。经Ｓｃ２０５３处理的小麦雄性不育有无花粉和花粉败育两种类型。无花粉型是在小孢子刚形成时即发生败育，从而产生无花粉的空壳型花药。花粉败育型是小孢子只发育到单核花粉，二胞花粉或不正常三胞花粉，或者只有花粉壁而无原生质体。无论何种情况，均未观察到花粉囊壁发育的异常现象。

比较分析了蔗糖、果糖、葡萄糖、白糖和麦芽糖5种碳源以及不同蔗糖浓度对油茶愈伤组织诱导的影响。结果表明:以蔗糖为碳源,诱导率可达100%,以白糖为碳源,诱导率可达93.3%,两者无显著差异;蔗糖浓度为30 mg/L,诱导率可达100%,蔗糖浓度为20 mg/L,诱导率可达83.2%,两者无显著差异。在油茶愈伤组织诱导过程中,为降低成本,可以白糖做为碳源,替代分析纯蔗糖,若须使用蔗糖为碳源,浓度应为20～30 mg/L。

【目的】研究高温处理对银灰杨小孢子发生的影响，揭示高温处理导致杨树花粉败育的细胞学机理，旨在完善高温处理诱导配子染色体加倍、选育林木三倍体的技术。【方法】本研究以银灰杨为试验材料，利用38℃和41℃的高温，对不同减数分裂时期的银灰杨花粉母细胞进行3、6 h处理，研究处理温度、减数分裂时期以及持续处理时间对败育花粉比率的影响。在此基础上，通过比较未经高温处理和高温处理后银灰杨花粉母细胞减数分裂染色体行为、微管骨架动态变化以及减数后绒毡层细胞发育的差异，揭示高温处理诱导银灰杨花粉败育的细胞学机理。【结果】（1）减数分裂时期、处理温度、持续处理时间以及减数分裂时期与处理温度、减数分裂时期与持续处理时间的交互作用均对败育花粉比率具有极显著的影响。41℃高温于中期Ⅰ持续处理3 h的败育花粉比率最高，为（25.11±4.28）%。（2）与对照组相比，银灰杨雄花芽经高温处理后，花粉母细胞减数分裂微管骨架表现出不同程度的解聚，中期Ⅰ和中期Ⅱ的部分纺锤体微管缺失，致使后期Ⅰ和后期Ⅱ的同源染色体或姊妹染色单体分离异常，产生大量的落后染色体。这些落后染色体被遗弃在细胞质中，引起微核的产生，四分体时期形成多分体而导致花粉败育。（3）高温处理可导致银灰杨花药绒毡层退化延迟，但仍能正常开裂，释放出花粉粒，因此绒毡层延迟退化不是高温处理诱导银灰杨花粉败育的原因。【结论】高温处理诱导银灰杨花粉母细胞中期Ⅰ和中期Ⅱ的部分纺锤体微管缺失，致使后期Ⅰ和后期Ⅱ产生大量的落后染色体，引起大量多分体的产生，是高温处理诱导银灰杨花粉败育的细胞学机理。

以无蜜腺性状特征陆地棉97014和有蜜腺棉TM-1为材料,对其形态学、细胞学特征进行观察,发现,97014叶片中脉、花萼和苞叶上都缺少蜜腺,成熟叶片叶脉、花萼和苞叶上均无蜂窝状凹陷,叶片除了缺少叶蜜腺外,其他结构与TM-1基本一致;97014缺少蜜腺组织结构,在蜜腺着生处为排列整齐的薄壁细胞,且在下表皮无凹陷的组织结构和褐色的蜜腺分泌物.

在金丝小枣发育枝离体培养过程中，不同种类和浓度的激素及光照条件对诱导愈伤组织的质量有明显影响。２，４－Ｄ和暗培养易诱导出疏松的Ⅱ型愈伤组织，ＩＢＡ及光照培养则有利于致密的Ⅰ型愈伤组织形成。Ⅱ型愈伤组织未分化出芽，而Ⅰ型具有较强的再分化能力。继代繁殖时，２，４－Ｄ浓度超过１ｍｇ／Ｌ将导致Ⅰ型愈伤组织大量转化为Ⅱ型。不同类型愈伤组织的染色体倍性变异明显不同，再生植株无性系根尖细胞染色体倍性则相对稳定。

研究了卡那霉素、潮霉素对浙江红山茶、大花红花油茶愈伤组织的生长及对攸县油茶幼苗叶片诱导愈伤的影响,确定作为选择压力的卡那霉素质量浓度为50～60mg·L-1,潮霉素为25～30mg·L-1。在3种抑菌性抗生素中,羧苄青霉素促进愈伤组织诱导,对愈伤组织的生长没有影响,头孢霉素则有抑制作用,而羟氨苄青霉素轻微抑制愈伤组织的生长,但对愈伤组织的诱导影响不大。考虑到抑菌效果,适于在转基因研究中使用的羧苄青霉素的抑菌质量浓度为250mg·L-1,羟氨苄青霉素为125mg·L-1。

用聚乙二醇(Polyethylene glycol,PEG6000)处理新疆野苹果(Malus sieversii(Ledeb)Roem.)幼苗。通过对其叶片及根系中各细胞器的超微结构分析发现,干旱胁迫能诱导新疆野苹果发生细胞程序性死亡,并具有以下特点:随着干旱处理时间的延长,根系中各细胞器形态结构发生变化的时间普遍早于叶片;同是叶片,海绵组织中各细胞器形态结构发生变化的时间早于栅栏组织;同是根系,皮层细胞中各细胞器形态结构变化的时间普遍早于中柱细胞。

【目的】探讨不同植物生长调节剂对白刺花胚性愈伤组织诱导的作用,以及培养基中氮源和无机盐浓度对白刺花体细胞胚发生和植株再生的影响,以期建立白刺花体细胞胚发生、发育及调控技术体系,为白刺花种苗快速繁殖体系建立及遗传转化研究提供参考。【方法】以白刺花叶片为外植体,研究生长调节剂2,4-D(1.0、2.0、3.0、4.0 mg·L~(-1))、NAA(0、0.5、0.8、1.0 mg·L~(-1))、6-BA(0.2、0.5、1.0、2.0 mg·L~(-1))和TDZ(0、0.2、0.5、1.0 mg·L~(-1))组合对胚性愈伤组织诱导,及NAA(0、0.2、0.5 mg·L~(-1))、6-BA(0、0.5、1.0 mg·L~(-1))和TDZ(0、0.2、0.5 mg·L~(-1))组合对体细胞胚发生的调控作用,筛选最优生长调节剂组合;并研究培养基中KNO_3和NH_4NO_3比例对体细胞胚发生的作用,及MS培养基中无机盐浓度(1/5MS、1/4MS、1/3MS、1/2MS)对体细胞胚萌发的影响,筛选最佳的体细胞胚发育及成熟萌发条件。【结果】白刺花叶片外植体胚性愈伤组织诱导适宜培养基为MS+2,4-D 3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+TDZ 1.0 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+琼脂7.0 g·L~(-1),诱导率为42.0%。采用MS基本培养基时,最佳的体细胞胚发生培养基为MS+NAA 0.5 mg·L~(-1)+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+TDZ 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖40 g·L~(-1)+谷氨酰胺100 mg·L~(-1)+琼脂7.0 g·L~(-1),体细胞胚发生率为78.46%,总胚数为对照的3.6倍;MS培养基中,KNO_3浓度提高1倍、NH_4NO_3降至1/2时,体细胞胚发生率可提高至91.33%,总胚数为采用MS基本培养基时的1.4倍; 1/3MS培养基有利于体细胞胚的萌发,萌发率为82.75%,幼苗长势良好,单株平均鲜质量为76 mg,幼苗驯化移栽1个月后成活率达90%以上。【结论】白刺花叶片接种于添加2,4-D、NAA、6-BA和TDZ不同组合的诱导培养基上,可脱分化形成愈伤组织或胚性愈伤组织,2,4-D浓度对愈伤组织形态和质地有较大影响。TDZ有利于体细胞胚的形成,适宜浓度的生长素与细胞分裂素组合及硝态氮和铵态氮的比例对体细胞胚的形成和发育具有调控作用,降低MS无机盐浓度可提高体细胞胚萌发率,本试验体系的再生植株移栽成活率达90%以上。

香花槐是集绿化、固土、饲料等于一体的多用途林木,其细胞培养则是充分利用该树种优良特性的生物工程技术基础.该文以香花槐叶片为外植体,研究愈伤组织诱导和细胞悬浮培养的技术体系.结果表明,愈伤组织诱导最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L.愈伤组织生长符合S型曲线,在固体培养基上,培养7 d进入指数生长期,到28 d,愈伤组织鲜重从1.329 3 g增长到10.763 7 g.悬浮培养的细胞,最大生长量为鲜重8.496 g或干重0.474 g.S型生长曲线分析表明,细胞生长迟滞期为3.6 d,最大生长量为14.6 g.

诱导棉花下胚轴切段形成愈伤组织需要外源2,4-D,加入激动素(KT)可以增进2,4-D的效果.愈伤组织形成胚性细胞和胚性细胞团的过程需要2,4-D和KT的共同作用.KT可以促进胚性细胞团分化出胚状体,加入2,4-D则会降低KT的效果.采用2,4-D(0.05mg/L)+KT(0.1mg/L)诱导愈伤组织,60天后转移到无激素的液体培养基上振荡培养,得到了大量的胚状体.

本实验选用乙烯利(Ethrel)对豚草杀雄,效果显著,在花序生长2.5cm 以下时期喷施2%浓度乙烯利较为适宜。败育雄蕊 PMC 粘连、退化,四分体形状不规则:花粉粒收缩、空瘪,内部无淀粉粒,蛋白质含量降低;绒毡层类似于腺质绒毡层类型,相互连成一圈后消失;花的败育出现无雄蕊型和花粉败育型。

为了建立中国水仙遗传转化体系,为转基因分子育种提供良好受体,以中国水仙‘金盏银台’品种的不同花器官为实验材料,以MS为基本培养基,研究了花药、花梗、子房、花柄愈伤组织诱导情况。对愈伤组织诱导效果较好的花梗和花药培养基中添加不同浓度6-苄基腺嘌呤(6-BA)、硫酸腺嘌呤(Ad)、萘乙酸(NAA)和2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D),筛选出愈伤组织诱导及鳞茎芽再生的最适培养基配方。结果表明:花梗愈伤组织诱导及鳞茎芽分化的最佳培养基为MS+1 g·L-1 NaH2PO4+0.003 g·L-16-BA+0.001 g·L-1 NAA+0.2 g·L-1 Ad+30 g·L-1蔗糖,花药愈伤组织诱导及...

为阐明广宁红花油茶授粉特性，提高其产量和效益，采取野外实地调查与实验室观测相结合的方法，研究了其花粉数量、活力、储藏条件、柱头可授性及辅助授粉效果。结果表明：（１）广宁红花油茶单枚花药花粉数在３ １２０～１２ ４６０粒之间，平均值为６ ８７７粒；单花花粉数量随其花药花粉量增加而增加，在７９２ ２００～３ ４６８ ４００粒之间，平均值为２ １０２ ２５０粒。（２）花药多在开花第１天开始散粉，开花当天花粉活力随时间进程呈上升趋势，第２天达到最大值，前３ ｄ花粉活力都在８０％以上。而柱头可授性在花后第２天达到最大值，２～３ ｄ是柱头可授性最强的时期，即最佳授粉时间。（３）花粉的最佳贮藏方式是－８０℃．．．