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[期刊] 华北农学报  [作者] 张晓寒  陈彦良  马欣  张珊珊  韦善君  
为研究结缕草抗逆分子机制,报道了沟叶结缕草一个低温响应基因ZmCOR410的抗逆功能。基于转录组数据克隆获得了ZmCOR410基因,采用实时定量PCR技术检测了其表达的低温响应模式,将其转化拟南芥中和酵母中鉴定了其抗逆功能。结果表明,ZmCOR410基因编码区序列长927 bp,编码308个氨基酸,为酸性脱水素。在同源基因的系统进化树中ZmCOR410蛋白与耐旱性强的无芒隐子草和弯叶画眉草的同源基因亲缘关系最近。在基因组中,ZmCOR410基因编码区上游1 700 bp范围内有4个DRE顺式元件核心序列,其mRNA在低温胁迫下显著积累。转化了ZmCOR410基因的拟南芥,叶片抗冻能力增强,植株在干旱和高温胁迫下的存活率提高。转化了ZmCOR410基因的酵母细胞抗高温能力增强。结果说明,ZmCOR410基因的表达产物在冷冻、高温和干旱胁迫下对细胞起保护作用,将有利于沟叶结缕草度过不良环境。
[期刊] 华北农学报  [作者] 闫逢英  农钧绣  锁忠花  韦善君  
为揭示结缕草LEA蛋白在植物逆境胁迫应答过程中的作用与功能,利用RT-PCR方法从日本结缕草Meyer中克隆得到一个lea基因,命名为Zjlea3,对其进行生物信息学分析。蛋白质理化性质分析结果表明:该基因编码产物包含177个氨基酸,预测分子质量为18.3 ku,理论等电点(pI)为5.63,为亲水性蛋白,含有9个特征性的11氨基酸基序,属于LEA蛋白中的第3组成员。聚类分析结果表明:Zjlea3蛋白与高粱、石茅等耐高温物种的同源蛋白亲缘关系最近。荧光定量PCR分析显示:在低温、干旱和高盐胁迫下,Zjlea3基因表达量均有上调,表达量峰值分别出现在72,24,72 h,其中受低温诱导上调幅度最大。转基因酵母抗逆性分析显示:转化Zjlea3基因的酵母细胞对冷冻、高盐和高渗胁迫的耐受能力显著提升。由此推测Zjlea3蛋白参与结缕草抵御低温、干旱和高盐等非生物胁迫的调控。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 李国平  杨鹭生  胡文英  黄群策  
通过研究不同基本培养基及植物生长调节组合对沟叶结缕草丛生芽诱导、增殖和愈伤组织诱导、分化的影响,建立起沟叶结缕草试管无性系。以地下匍匐根状茎的顶芽为外植株,在MS+6-BA 2 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1培养基上诱导丛生芽形成,以MS+KT 3 mg.L-1+NAA 0.1 mg.L-1作为继代增殖培养基,建立起丛生芽苗→不定芽发生→丛生芽苗速生试管无性系;以丛生芽苗基部为外植体,以MS+2.4-D 4 mg.L-1作为愈伤组织诱导培养基,以MS基本培养基作为愈伤组织分化培养基,建立起丛生苗→愈伤组织→愈伤组织分化→丛生苗试管无性系。试管无性系室外移栽成活率达95%以上。沟叶结...
[期刊] 草业科学  [作者] 姜红岩  范希峰  温海峰  韩朝  滕文军  滕珂  尹淑霞  
盐胁迫能够加速草坪草的黄化,影响草坪的坪观质量。植物中的NAC转录因子在盐胁迫条件下发挥着重要作用,参与胁迫响应,而在日本结缕草(Zoysia japonica)中还鲜有NAC转录因子的功能研究。本研究对转ZjNAC3基因(GenBank登录号:MT254544)的YPH500酵母菌株进行盐敏感性检测,初步判定ZjNAC3在盐胁迫下具有负调节酵母细胞生长的作用;对过表达ZjNAC3基因的拟南芥(Arabidopsis thaliana)株系进行盐处理,发现150 mmol·L-1 NaCl处理7 d后转基因植株的生长明显弱于野生型(wild type, WT),脯氨酸含量、丙二醛含量、细胞膜透性均显著高于WT(P <0.05),表明过表达ZjNAC3基因降低了拟南芥植株的耐盐性。分析认为ZjNAC3通过减弱渗透调节、增加细胞受损和降低将Na+隔离到液泡的作用,从而使得转基因拟南芥植株表现出盐敏感的性状。本研究揭示了ZjNAC3是一个负调控植物耐盐性的重要基因,为之后探究NAC转录因子调控日本结缕草的耐盐性及其机理奠定了基础。
[期刊] 草业科学  [作者] 王云鹏   范博   张海阔   沈玉叶   张宝刚   陈有超   余兵   李永夫   蔡延江  
作为城市绿地生态系统中的主要景观类型,城市草坪频繁受到人为管理措施的强烈干扰。本研究以沟叶结缕草(Zoysia matrella)为对象,通过控制3个灌溉水平(I_1:4.00 L·m~(-2)、I_2:5.71 L·m~(-2)、I_3:7.43 L·m~(-2))和3个修剪水平(M_1:不修剪、M_2:留茬2 cm、M_3:留茬6 cm)的盆栽试验,探究不同灌溉和修剪水平对草坪草生长、土壤无机氮及氮素表观平衡的影响。结果表明:相同灌溉水平下,M_2处理草坪草地上生物量显著低于M_1和M_3处理,但M_2处理草坪草地上部分和地下部分氮含量均显著高于M_1处理(P <0.05)。在草坪草生长末期,相同灌溉水平下M_2处理土壤无机氮(Nmin)含量较M_1、M_3处理下降了0.6%~54.1%。各处理淋溶液中N_(min)均以铵态氮(NH_4~+-N)为主要形式,不过,N_(min)淋失量仅占氮输出总量的0.4%~1.3%。相同灌溉水平下,M_2处理的氮平衡相较于M_3处理表现出更为明显的盈余特征(P <0.05),但M_3处理在高灌溉量下会更趋于氮素收支平衡。综上可知,重度修剪(M_2处理)显著抑制了草坪草生长,增加了氮素损失风险,但却提高了草坪草氮素吸收量,因此,在本研究条件下,建议灌溉量(5.71~7.43 L·m~(-2))略高于一般灌溉水平,同时适度修剪(保持留茬高度为6 cm),既可以保证草坪草良好的生长状况,也可维持土壤氮素基本收支平衡,提高氮素利用效率。
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 李丽菁  张智韦  薛云  张嘉航  韩烈保  许立新  
【目的】日本结缕草是具有众多优良性状,被广泛应用的暖季型草坪草。通过对其叶绿素合成及降解的研究,探究日本结缕草秋冬季节在我国北方地区较早出现叶片脱绿现象的内源机理。【方法】对日本结缕草进行14 h光照(4℃)、10 h黑暗(2℃)的循环低温处理,并对叶绿素、叶绿素合成与降解途径中重要酶的活性、中间产物含量以及叶绿素代谢相关基因表达量进行测定。【结果】研究发现在低温胁迫处理下,日本结缕草叶片表观形态上有明显变化,严重枯黄且卷曲;叶绿素、叶绿素a、叶绿素b的浓度显著下降,叶绿素a与b的比值减小;5-氨基乙酰丙酸盐脱水酶、胆色素原脱氨酶(PBGD)活性和单卟啉胆色素原(PBG)含量显著低于对照组;脱镁鳌合酶(MDCase)活性显著高于对照组;叶绿素合成基因(除ZjMgCH2)均下调表达;叶绿素降解相关基因(除ZjNYC1)均比对照组较高表达。【结论】低温胁迫下,日本结缕草叶绿素合成减弱,同时加速了叶绿素的降解。此外,验证了MDCase是日本结缕草叶绿素降解途径中的关键因子。本研究为进一步解决日本结缕草滞绿性状提供了理论基础,也对培育日本结缕草滞绿品种育种工作具有重要意义。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 张瑜  杨知建  张志扬  张志飞  
以适合南方地区夏季种植的采自泰国北部的一种野生的细叶结缕草为供试材料,以匍匐茎节为外植体建立其再生体系.结果表明:在MS基本培养基上添加5.0 mg/L 2,4-D和NB培养基上添加0.2 mg/L IAA所产生的愈伤组织最好,而添加2.0 mg/L 2,4-D+1.0 mg/L BA时分化效果最好,1/2MS+0.5 mg/L NAA培养基最适于生根.
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 齐春辉  韩烈保  梁小红  曾会明  刘君  
将含有DREB1A和gus基因的双基因载体质粒包裹在金粉上,以基因枪轰击日本结缕草胚性愈伤组织,以gus基因的瞬时表达研究日本结缕草基因枪转化参数.结果表明,在1 100 psi压力下6 cm的轰击距离、每皿轰击2次的转化效果最好,而金粉和质粒用量对转化效率影响不显著;经过筛选和再生培养,检测到gus基因的稳定表达,并获得日本结缕草潮霉素抗性株系,PCR-Southern杂交证实外源DREB1A基因已整合到日本结缕草基因组中.
[期刊] 草业科学  [作者] 李丽菁  张娜  张智韦  高娅楠  张嘉航  段梦琪  许立新  
日本结缕草(Zoysia japonica)是一种常见的具有众多优良性状的暖季型草种,秋冬季节在我国北方地区会较早出现叶片脱绿现象,在一定程度上限制了日本结缕草在北方的大面积使用。ZjSGR是从结缕草中分离出来的一种衰老诱导基因,负调控叶片滞绿性状。本研究利用CRISPR/Cas9系统,通过基因枪介导的遗传转化方法实现对日本结缕草ZjSGR基因的编辑,经测序验证获得1株单碱基缺失突变植株。突变植株叶片深绿,在正常生长温度(28~30℃)条件下,和对照相比,叶绿素含量更高(P <0.05)。本研究为进一步阐述ZjSGR基因在日本结缕草滞绿性状调控中的作用机理提供了基础研究材料,也为培育日本结缕草滞绿品种育种工作奠定了基础。
[期刊] 草业科学  [作者] 姜红岩  张蕊  滕珂  檀鹏辉  刘凌云  尹淑霞  
NAC(NAM, ATAF1/2, CUC2)是植物所特有的最大的转录因子家族之一,在调控植物生长发育、响应非生物胁迫等方面发挥着重要作用。本研究利用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends, RACE)从日本结缕草(Zoysia japonica)中克隆获得了ZjNAC2基因(GenBank登录号为MH580281),其编码区序列长1 110 bp,编码369个氨基酸。保守结构域分析显示,ZjNAC2编码蛋白在N端有一个典型的NAM结构域,表明ZjNAC2属于NAC转录因子家族。同时通过染色体步移的方法获得其启动子序列1 574 bp,通过作用元件分析发现该启动子上有ABA、非生物胁迫等多个不同的响应元件。亚细胞定位结果显示,ZjNAC2定位于细胞核。荧光定量分析表明,ZjNAC2在根中的表达量最高,并且在衰老叶片中表达量显著高于幼嫩叶片;此外ZjNAC2的表达受200μmol·L(–1) ET、10μmol·L(–1)MeJA、10μmol·L(–1) ABA和20%PEG4000的抑制,但受300 mmol·L(–1) NaCl处理的诱导。本研究表明ZjNAC2转录因子可能参与多种信号转导途径,这为进一步深入研究ZjNAC2的功能奠定了基础。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘刚  薛喜成  
关键词:
[期刊] 草业科学  [作者] 杭楠  王翔宇  张蕴薇  王克华  
结缕草属(Zoysia)植物具有优良的环境适应性和观赏价值,既可用于建植高质量运动场草坪,又可用于绿化、护坡,适宜粗放管理,在我国广泛种植。种子建植结缕草草坪播种期与夏季杂草高峰期重叠,极易因杂草滋生导致建坪失败。因此,探索合理有效的结缕草草坪杂草防除方法具有重要意义。化学防除具有经济、高效、省力等优点是目前常用的杂草防治手段,但除草剂的选择和施用浓度不当会造成草坪药害和环境污染。本文根据国内外有关结缕草草坪化学除草剂筛选的相关研究,结合作者的研究经验,介绍了国内结缕草草坪杂草种类、发生规律,总结各个时期结缕草坪杂草的化学防除方法,为减少杂草危害、建植高质量结缕草草坪提供参考。
[期刊] 华北农学报  [作者] 张艳  赵茂林  孙淼  徐粤宇  
分别以耐黄矮病耐蚜虫小赖麦附加系Line24、耐盐耐旱小赖麦附加系Line15、耐盐小赖麦易位附加系Line14为材料,以它们各自所附加的含有相应抗逆基因的多枝赖草染色体(简称为抗逆染色体)的6个特定SSR分子标记为探针,通过两轮菌落杂交法筛选多枝赖草基因组可转化人工染色体(TAC)文库,最终得到经过验证的阳性克隆77个,它们分别对应于3个(易位)附加系中所附加抗逆染色体(臂)连锁群的6个特定SSR标记,每一标记所对应的TAC克隆数目变化在5~19个,平均约13个。进一步从来自Line24的抗逆染色体连锁群的同一个探针筛选到的阳性克隆中抽查2个TAC克隆15J18和09I02,通过双色荧光原位...
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵欣雨   康占海   王羽   李艳艳   高维芳   李星  
选育抗性品种是小麦叶锈病防治举措中最经济、可行的方法。为进一步挖掘抗病基因,选取河南、河北、山东等8个省小麦产区50个小麦品种。首先在苗期将16个叶锈菌生理小种(THFS、TGTS、THJS、FHKT、FGJN、KHKS、FCJQ、RFKS、THFM、MHGT、KHGS、KBGT、FHGT、PHHT、FHJT、FCJT)接种在36份小麦抗叶锈病近等基因系材料以及50个供试小麦品种上。因各菌种带有不同毒力,可根据表现型的差异,再将已知抗病基因紧密连锁的特异性分子标记与之结合分析,进而推测50份小麦材料中可能含有的抗叶锈病基因。通过基因推导、分子标记以及系谱分析综合鉴定抗锈性基因,结果表明,在50个品种中共检测出9个(Lr1、Lr2c、Lr10、Lr16、Lr26、Lr34、Lr37、Lr45和Lr46)已知抗叶锈性基因和少量未知基因。含有Lr1基因的有淄麦12等22个品种;含有Lr2c基因的有鲁麦14等10个品种;含有Lr10基因的只有莱州9361一个品种;含有Lr16基因的有科农199等25个品种;含有Lr26基因的有徐州24等15个品种;含有Lr34基因的有宝麦3号和京冬8号;含有Lr37基因的有淄麦12、鹤0927和荷9946;含有Lr45基因的有连麦2号等11个品种;含有Lr46基因的有山农19等38个品种。
[期刊] 林业科学研究  [作者] 钱永强  孙振元  李云  韩蕾  
针对中华结缕草深休眠的特性,研究了不同物理、化学等处理方法对中华结缕草解除休眠的作用。结果表明:以700mL·L-1乙醇浸泡3min后,在300g·L-1NaOH溶液中处理20min,再用200mg·L-1GA3浸泡10min效果最好,7d发芽势达89 9%,比对照高出51 9%;16d发芽率达91 0%,比对照高出51 8%,已接近中华结缕草种子的潜在发芽率,发芽历时比对照缩短12d。
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