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[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
田慧敏 王秀艳 李晓兰
为了研究沙地榆深色有隔内生真菌DSE(dark septate endophytes)的种类及抑菌作用，寻找潜在的可开发利用的生防菌，采用组织分离法从沙地榆分离DSE真菌，运用形态学与ITS测序方法进行鉴定，以常见病害灰霉病(灰葡萄孢Botrytis cinerea)、瓜类枯萎病(尖刀镰孢菌黄瓜转化型Fusarium oxysporum f. sp. Cucumerinum)和炭疽病(胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides)的病原菌为指示菌，采用对峙培养菌丝生长速率法测定其抑菌活性。结果表明：从沙地榆须根筛选到1株具有较高抑菌活性的DSE真菌(编号Upr105)，该菌初期菌落呈白色绒毛状、稀疏、菌落背面呈浅橘色，随着菌落扩大加厚，背面渐呈亮橘色，后期菌落变为深褐色，培养后期菌落可形成不明显的“环形带”结构；显微特征为菌丝棕色、具隔膜，不形成有性或无性繁殖结构，显微形态呈形态各异的“念珠状”膨大细胞；根据形态学特征和rDNA–ITS测序鉴定其为薄毛盘菌(Tricharina sp.)。抑菌试验结果发现，该菌对3种指示菌有不同程度的抑制作用，从接种第2天开始抑菌率逐渐上升，培养至第7天时对灰葡萄孢Botrytis cinerea、尖刀镰孢菌黄瓜专化型F. oxysporum f. sp. Cucumerinum和胶孢炭疽菌C. gloeosporioides的抑菌率达到最大值，分别为68.6%、61.5%和42.9%，对3种菌的平均抑菌率分别为52.8%、44.5%和22.8%，说明该菌株具有较强的抑菌活性，是枯萎病、灰霉病和青枯病防治的潜在生防菌。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
田慧敏 王秀艳 李晓兰
为了研究沙地榆深色有隔内生真菌DSE(dark septate endophytes)的种类及抑菌作用，寻找潜在的可开发利用的生防菌，采用组织分离法从沙地榆分离DSE真菌，运用形态学与ITS测序方法进行鉴定，以常见病害灰霉病(灰葡萄孢Botrytis cinerea)、瓜类枯萎病(尖刀镰孢菌黄瓜转化型Fusarium oxysporum f. sp. Cucumerinum)和炭疽病(胶孢炭疽菌Colletotrichumgloeosporioides)的病原菌为指示菌，采用对峙培养菌丝生长速率法测定其抑菌活性。结果表明：从沙地榆须根筛选到1株具有较高抑菌活性的DSE真菌(编号Upr105)，该菌初期菌落呈白色绒毛状、稀疏、菌落背面呈浅橘色，随着菌落扩大加厚，背面渐呈亮橘色，后期菌落变为深褐色，培养后期菌落可形成不明显的“环形带”结构；显微特征为菌丝棕色、具隔膜，不形成有性或无性繁殖结构，显微形态呈形态各异的“念珠状”膨大细胞；根据形态学特征和rDNA–ITS测序鉴定其为薄毛盘菌(Tricharina sp.)。抑菌试验结果发现，该菌对3种指示菌有不同程度的抑制作用，从接种第2天开始抑菌率逐渐上升，培养至第7天时对灰葡萄孢Botrytis cinerea、尖刀镰孢菌黄瓜专化型F. oxysporum f. sp. Cucumerinum和胶孢炭疽菌C. gloeosporioides的抑菌率达到最大值，分别为68.6%、61.5%和42.9%，对3种菌的平均抑菌率分别为52.8%、44.5%和22.8%，说明该菌株具有较强的抑菌活性，是枯萎病、灰霉病和青枯病防治的潜在生防菌。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
秦磊 王恒安 欧阳志明 顾翠妹 成志恒 赵国屏
在土壤中分离到一株细菌STRA ,菌块测定法显示该菌可显著抑制玉米小斑病菌和稻恶苗病菌 ,具有抗真菌活性。该菌可以在SFM和LB等多种培养基上生长 ,且菌落生长无明显终止现象 ;革兰氏染色为阴性 ,电镜观察可见 2～ 4根鞭毛。 (G +C) %在 5 9%～ 6 7%范围内。生化指标的检测显示该菌株对所测试的多数糖类不能发酵 ,经BioMerieuxVitek的革兰氏阴性细菌检测试验卡 (GNI)鉴定为食酸丛毛单胞菌 (Delftiaacidovorans)。设计两对简并引物对其 16SRNA进行PCR扩增 ,16SRNA的序列及其相关生物信息学分析结果进一步确证生化鉴定结果。该分离株的抗真...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
兰楠 祁高富 喻子牛 赵秀云
从油菜幼苗中通过PDA培养基分离出9株内生真菌,通过形态观察和18S rRNA基因序列分析,其中6株鉴定为链格孢菌(Alternaria alternata),1株鉴定为球毛壳菌(Chaetomium globosum),1株属于镰刀菌属(Fusarium),1株属于炭角菌目(Xylariales)。从鉴定出的油菜内生真菌中,筛选出1株有抑菌活性的生防真菌——球毛壳菌(Chaetomium globosum)YY-11,此菌株对油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)、立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)、油菜灰霉病菌(Botrytis cinerea)、...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
谢玲 刘斌 覃丽萍 张雯龙 李松 秦碧霞 史国英 邓心
从广西8个甘蔗主产区分离得到10个DSE菌株。这些菌株的核糖体DNA的28S基因D1/D2区序列与Genbank中最相似序列构建的系统发育树结果表明:10个菌株在系统树上聚为3个大分支。其中4个菌株以68%的支持率与枝孢属Cladosporium、茎点霉属Phoma、Lophiostoma sp.和Emericella sp.聚为一大类;5个菌株在84%的支持率上与Conlarium sp.、Cercophora sp.和Schizothecium sp.聚为一大类;1个菌株与Phialocephala fortinii聚为一类,支持率为100%。10个菌株均能与甘蔗共生而无致病性,其中7个菌...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
何璐 纪明山 王勇 徐洪波 齐补坤
【目的】分离药用植物苦参内生真菌,明确其抑菌特性,确定内生真菌BS001发酵产生抗菌物质的种类及结构。【方法】采用常规的组织分离法对内生真菌进行分离,平板菌块法测定抑菌特性,捷克八层析试验确定其极性,柱层析及冷冻干燥的方法对其分离纯化,并利用TLC生物自显影进行跟踪,采用高效液相色谱法(HPLC)测定其纯度,1H-NMR、13C-NMR以及液相色谱-质谱(LC-MS)等方法对其进行结构鉴定。【结果】从苦参种子中分离出1株内生真菌菌株,编号为BS001。该菌株对辣椒疫霉病菌、番茄炭疽病菌、油菜菌核病菌、苹果斑点落叶病菌等病原菌具有抑制效果,其中对番茄炭疽病菌的抑菌直径达2.734 cm。其发酵液...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
易晓华 朱明旗 冯俊涛 李琰 张兴
【目的】明确1株具抑菌活性的除虫菊内生真菌(编号为Y2)的种属分类地位。【方法】将在PDA培养基上培养7 d的Y2菌株,转接于PDA、PSA、Czapek(CA)、DYPA、WA、CLA、PA、VBC、CMA等9种培养基培养,并结合25℃间歇光照培养、变温培养、紫外线照射与黑暗交替培养等方法诱导产孢,进行形态学初步鉴定;采用分子生物学方法对Y2菌株rDNA的ITS基因(ITS-5.8 S rDNA)进行PCR扩增、测序,利用相关软件对PCR产物序列进行分析。【结果】该菌株在CLA、PA和VBC 3种培养基上产生了大型分生孢子堆,大型分生孢子着生在分生孢子梗顶端,呈镰刀形,微弯曲,具5~7个横隔...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
王晓国 卢家仕 周主贵 李秀玲 陈廷速 卜朝阳
了解带叶兜兰菌根真菌的群落组成，为优良菌株的筛选奠定基础，对采自广西乐业县的野生带叶兜兰进行了菌根真菌分离，通过根段直接培养法分离菌根真菌，以确定７５％乙醇和１０％ＮａＣｌＯ的最适表面消毒时间，并应用形态学方法对分离的菌株进行了属的鉴定。研究结果显示，带叶兜兰菌根真菌最适表面消毒时间是７５％乙醇８ ｍｉＮ，１０％ＮａＣｌＯ ８ ｍｉＮ。从带叶兜兰菌根中分离到的６３株真菌，除８株菌株分类地位不能确定外，其余菌株归属于镰刀菌属（Ｆｕｓａｒｉｕｍ）、轮层菌属（ＤａｌＤｉＮｉａ，）、碳团菌属（ＨｙｐＯｘｙｌＯＮ）、毛壳菌属（ＣＨａｅｔＯｍｉａＣｅａｅ）、胶膜菌属（ｔｕｌａｓＮｅｌｌａ）５属，其中镰刀菌．．．
关键词：
带叶兜兰 菌根真菌 分离鉴定
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
姜海燕 白娜娜 晁开瑞 孟达 赵胜国 党海龙 于凤强
以前期筛选的植物内生真菌SDYS180（聚多曲霉菌Aspergillus sydowii）为试验材料，通过体外试验测定其对13株常见林木病原真菌的抑菌活性，并建立SDYS180粗提物对各病原真菌的毒力回归方程，同时测定了SDYS180粗提物对杨树叶斑病菌生理指标[电导率、可溶性蛋白（SP）质量分数、丙二醛（MDA）浓度、超氧化物歧化酶（SOD）活性、过氧化物酶（POD）活性、过氧化氢酶（CAT）活性]的影响。结果表明，SDYS180菌体、发酵液和挥发性代谢产物对13株林木病原真菌的抑菌效果表现为菌体＞发酵液＞挥发性代谢产物，其中对杨树叶斑病菌的抑制活性最佳，粗提物对该菌的毒力回归方程为y=0.3010x+0.1437，R~(2)=0.986 4，EC_(50)=1.183 7 mg·mL~(-1)。SDYS180粗提物对杨树叶斑病菌的生理指标存在明显影响，主要表现为：试验期间处理组的电导率和MDA浓度大于对照组，8 h时电导率最大，达到27.73 ms·cm~(-1)，4 h时MDA浓度最大，达到0.183 μmol·g~(-1)；8 h后处理组的SP质量分数小于对照组；处理组的POD、SOD、CAT活性与对照组相比都呈现先增强后减弱的趋势，且均在4 h时达到最大值，分别为1 200 U·g~(-1)·min~(-1)、33 U·g~(-1)、5.46 U·g~(-1)·min~(-1)。可见，SDYS180是一株具有开发潜力的生防菌。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
宋静静 陆柳琳 黎俊杰 赵天义 彭春艳 曹宏明 邱清华 贾纪鑫 龚斌
【目的】对半红树药用植物杨叶肖槿（Thespesia populnea）内生真菌的多样性及其抑菌活性进行研究，为开发生态友好型抗菌剂提供参考依据。【方法】采用形态学和分子生物学相结合的方法，对广西北部湾沿海杨叶肖槿茎、叶和树皮组织中的内生真菌进行分离鉴定。选用从柿树、核桃、荔枝中分离的炭疽菌（Colletotrichum）、香蕉枯萎病菌尖孢镰刀菌古巴专化型FOC1(Fusarium oxysporum f. sp. cubense 1）和FOC4（Fusarium oxysporum f. sp. cubense 4)、黄瓜瓜链格孢菌（Alternaria cucumerina）6种植物病原真菌、白骨壤内生真菌链格孢菌（Alternaria alternata）和罗非鱼海豚链球菌（Streptococcus iniae）为指示菌，通过平板对峙法和滤纸片法对杨叶肖槿内生真菌提取物进行抗真菌和抗细菌活性筛选。【结果】从杨叶肖槿中共分离纯化出60株内真生菌，分属于5个属25个种。其中，炭疽菌属（Colletotrichum）和间座壳属（Diaporthe）为优势菌属，分离率为48.33%和26.67%；其余菌属分别是葡萄座腔霉属(Botryosphaeria)、亚隔孢壳属(Didymella)和小隐孢壳属(Cryptosporella)，对应的分离率为15.00%、6.70%和3.33%。从杨叶肖槿树皮组织分离到的菌株最多，共分离到4个属23株菌，占总分离量的38.33%；其次为叶片组织（31.67%）和茎组织（30.00%）。发现12株内生真菌与NCBI数据库已公布ITS rDNA序列相似性低于95.00%，为潜在新种。抑菌结果表明，炭疽菌J1-20对8种指示菌均有较强的抑菌活性，对柿树炭疽菌、核桃炭疽菌、荔枝炭疽菌、香蕉枯萎病菌FOC1和FOC4、黄瓜瓜链格孢菌、白骨壤链格孢菌的抑菌率分别为39.39%、25.00%、19.10%、32.43%、28.20%、89.00%和74.19%，对罗非鱼海豚链球菌的抑菌圈为21.00 mm。【结论】杨叶肖槿内生真菌多样性丰富，分布较均匀。其中J1-20菌株对8种指示菌具有广谱抑菌性，有较好的开发潜力。
关键词：
杨叶肖槿 内生真菌 多样性 抑菌活性
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)
[作者]
朱宏建 周倩 高必达
从湖南壶瓶山国家自然保护区土样中分离放线菌株,经平板对峙培养初筛和发酵过滤液抑菌试验,得到一个较好的菌株D35,其发酵液经5倍稀释对稻瘟病菌、柑橘炭疽病菌和烟草黑胫病菌的菌丝生长抑制率分别为47.6%、80.3%和54.2%.经培养性状观察,生理生化测定,并结合16S rDNA序列分析,初步鉴定D35为三泽链霉菌(Streptomyces misawanensis).
关键词：
放线菌 植物病原真菌 抑菌活性 发酵液
[期刊] 浙江农林大学学报
[作者]
蒋楚楚 辛静静 夏树全 罗平 邵果园 崔永一
【目的】从蕙兰‘红香妃’Cymbidium faberi ‘Hongxiangfei’中筛选获得兰科Orchidaceae植物病害生防菌，为蕙兰菌根化栽培及绿色生物防治提供科学依据。【方法】通过蕙兰‘红香妃’健康根段培养、分离、纯化、鉴定内生真菌；以5株常见植物病原菌为指示菌，通过平板对峙培养法筛选出生物防治效果最优的内生真菌，并用活体接种法验证其抑菌效果。【结果】在蕙兰‘红香妃’健康植株根段培养中共分离筛选出6株内生真菌，经鉴定4株属于毛壳属Chaetomium spp.,1株属于镰刀属Fusarium spp.，另1株属于赛多孢属Scedosporium spp.。在平板对峙培养中发现：6株内生真菌对5株病原菌均具有一定的抑菌效果，其中Z2菌株腐皮镰刀菌Fusarium solani对兰花茎腐病致病菌——尖孢镰刀菌F. oxysporum的抑制效果明显，抑制率为67.51%;Z3菌株蝇生二叉毛壳菌Dichotomopilus funicola对兰花炭疽病致病菌——胶孢炭疽菌Colletotrichum gloeosporioides的抑制率达68.56%。活体接种试验表明：经Z3菌株处理组，春兰‘绿云’ C. goeringii ‘Lüyun’病叶率、病情指数极显著(P<0.01)低于对照组。【结论】Z3菌株是筛选出的防治兰科植物病害的优势拮抗生物防治菌。图4表2参35
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
丁宁 陆兆新 别小妹 吕凤霞 赵海珍
[目的]本文旨在筛选对黄曲霉和禾谷镰刀菌具有抑制活性的乳酸菌,并确定乳酸菌发酵液(CFS)中主要的抑制霉菌物质。[方法]采用累积富集法从谷物中分离乳酸菌,用双层平板法测定其对黄曲霉和禾谷镰刀菌的抑制活性,同时用96孔板法测定乳酸菌发酵液对2种霉菌孢子的抑制活性,筛选具有最佳抑制活性的乳酸菌菌株并进行鉴定。采用pH值调节、蛋白酶处理和热处理的方法分析发酵液中有效抑制霉菌物质的种类,通过HPLC法测定发酵液中主要有机酸的含量,并采用傅里叶红外光谱和SDS-PAGE凝胶电泳测定戊糖片球菌Y5发酵液中蛋白类抑制霉菌物质。[结果]从谷物中初筛出139株乳酸菌,其中12株对黄曲霉有高度抑制作用,14株对禾谷镰刀菌有高度抑制作用。Y5、Y9、S2和S9 4株乳酸菌的发酵液对黄曲霉孢子萌发的抑制效果较好;Sm1、Sm12、S6和N6 4株乳酸菌的发酵液对禾谷镰刀菌孢子萌发的抑制效果较好。经过鉴定,8株乳酸菌分别为乳酸片球菌(N6、S2和Y9)和戊糖片球菌(Y5、Sm12、Sm1、S6和S9)。不同pH值调节和蛋白酶处理对发酵液的抑制霉菌活性有不同的影响,但热处理不改变抑制霉菌活性。发酵液中含量最高的有机酸为乳酸、乙酸和柠檬酸,戊糖片球菌Y5发酵液中存在蛋白类抑制霉菌物质。戊糖片球菌Y5粗提物的傅里叶红外光谱中存在蛋白质和多糖特征峰,胰蛋白酶处理后其SDS-PAGE凝胶电泳条带改变,戊糖片球菌Y5发酵液中存在的蛋白类抑制霉菌物质为糖蛋白。[结论]本文共筛选出8株对黄曲霉或禾谷镰刀菌有明显抑制作用的乳酸菌,发酵液的抑制霉菌活性是有机酸共同作用的结果,戊糖片球菌Y5发酵液中存在具有抑制霉菌活性的糖蛋白。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
周浩 黄宁珍 郭伦发 王新桂 龚庆芳 何金祥
对广西靖西寄生植物菟丝子上分离的生防真菌进行研究,为菟丝子的生物防治提供依据。采集寄生于豆科羊蹄甲属植物羊蹄甲上具有炭疽病斑的日本菟丝子,分离病原并扩大培养,进行致病性鉴定。柯赫氏法则证明该病由真菌YTJ-8侵染引起;根据YTJ-8的形态学特征和ITS序列分析比较,推定其为尖孢炭疽菌(Colletotrichum acutatum)。
关键词：
菟丝子 寄生真菌 分离 鉴定 尖孢炭疽菌
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