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[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴丽云 何金清 周勇 陈国荣 张琳 张永嵘 吴松清 关雄
从40个样品中分离到112株芽孢菌,其中有2株为Bt,占1.8%;从城市污水和啤酒厂生物处理系统中分别分离到1株Bt:采用cry1-cry11、cyt、vip3A、aiiA和inhA引物对BRC-WLY1和BRC-WLY2进行PCR扩增,发现2株Bt含有cry1(cry1Ag、cry1Ba、cry1Gb、cry1La)、cry2Ac、vip3A、aiiA杀虫基因,其中BRC-WLY1还含有inhA基因.
[期刊] 湖南农业大学学报
[作者]
李建洪 万秋英 王沫 姜锡权 喻子牛
从韩国不同地区采集的 6 2 0个土壤样品中分离出 6 7株苏云金芽孢杆菌 ,分属于 1 0种不同的血清型 .毒力测定结果表明 ,在 6 7株分离株中 ,35 .82 %的菌株对鳞翅目昆虫具有生物活性 ,2 2 .39%的菌株对双翅目昆虫有毒 ,32 .84%的菌株对鳞翅目和双翅目昆虫都具有杀虫活性 ,8.95 %的菌株为没有杀虫活性的无毒菌株 .其中对鳞翅目昆虫有毒的菌株产生典型的双金字塔形伴孢晶体 ,对双翅目昆虫有毒的菌株和无毒菌株都产生球形伴孢晶体 ,而对鳞翅目和双翅目都有毒的菌株产生双金字塔形或球形伴孢晶体 .用对 cry ,cry ,cry ,cry 和 cry 基因特异性引物...
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴昌标
从5种草食性哺乳动物的粪便中筛选获得8株苏云金芽胞杆菌(Bt);并用聚合酶链式反应—限制性酶切片段长度多态性(PCR-RFLP)鉴定体系鉴定各菌株的cry基因型.结果表明:BRC-WCB1、BRC-WCB2、BRC-WCB3、BRC-WCB8同时含有cry1和cry2基因;BRC-WCB6仅含有cry1I基因;BRC-WCB5含有cry3基因,但未出现预知的酶切条带;而BRC-WCB4无任何PCR扩增产物.
关键词：
苏云金芽胞杆菌 动物粪便 基因鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
申建茹 郭巍 张霞 李晶
利用PCR方法检测vip1A/vip2A基因在野生型Bt菌株中的分布,进行基因片段的克隆和序列分析。结合cry1基因的PCR-RFLP基因型鉴定体系,分析与vip1A/vip2A基因有联系的cry1类基因。结果表明,分离保存的171株野生型Bt菌株中,有20株菌株含有vip1A/vip2A基因,分布率为11.69%。成功克隆了菌株Bt16的vip1A/vip2A基因片段,命名为vip1A/vip2A-16,GenBank登录号为EU594327。cry1基因的PCR-RFLP鉴定结果表明,该20株菌株均含有cry1Fa基因,说明vip1A/vip2A基因与cry1Fa可能具有某种联系。
[期刊] 华北农学报
[作者]
王志鑫 束长龙 申培立 苏旭东 李志辉 于妍 张先舟 马雯 檀建新
为发掘对蛴螬有防治作用的苏云金芽孢杆菌及其cry基因,在河北省各县市共采集土壤样品254份,采用温度筛选法分离出Bt菌株42株,经PCR-RFLP方法鉴定,其中10株含有cry8型基因。这些菌株有如下特点:同一菌株含1种或多种质粒;PCR-RFLP鉴定证明有多种cry8基因存在,多数菌株中含2种cry8基因,如cry8E和cry8F常共存于同一菌株中;Cry8杀虫晶体蛋白分子量约为130~140 k Da,晶体形态均为球形。这10株菌采样地点分布于保定、衡水、邯郸、廊坊、唐山和邢台等地,植被类型多样化,说明cry8型Bt菌株在河北省分布广泛,可为蛴螬类害虫的防治提供丰富的Bt资源。
[期刊] 华北农学报
[作者]
苏旭东 马雯 马晓燕 王雪静 李英军 檀建新
采用温度筛选从云南省刁苓山土壤中分离得到一株伴孢晶体为长菱形的苏云金芽孢杆菌BSH-1。利用PCR-RFLP鉴定体系和SDS-PAGE对菌株所含cry基因类型和晶体蛋白的构成进行鉴定、分析,结果表明:菌株BSH-1具有的cry基因组合为:cry1Aa,cry1Ac,cry1Db,cry2Ab,cry1Ia,表达的晶体蛋白有130,70和56 kDa 3种,该蛋白对甜菜夜蛾具有较高杀虫活性,LC50为1.43 ng/mg。该菌株的基因组合类型对构建杀虫基因工程菌具有重要参考价值。
关键词：
苏云金芽孢杆菌 分离 杀虫基因 鉴定
[期刊] 华北农学报
[作者]
宋萍 郭丽伟 苏俊平 王勤英
苏云金杆菌XPZ-9菌株是从土壤中分离的对鳞翅目幼虫有特异杀虫活性的新菌株。光学显微镜下观察到该菌株可产生菱形和圆形伴胞晶体,SDS-PAGE检测表达的主要蛋白条带分子量约为70 kDa。PCR-RFLP分析结果表明该菌株含有新基因cry1Ah。生物活性测定表明该菌株对鳞翅目害虫棉铃虫、小菜蛾、亚洲玉米螟和美国白蛾的二龄幼虫都具有较强的杀虫活性。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴丽云
以啤酒厂不同处理工段废水、污泥为原料培养苏云金芽胞杆菌(Bt),并与城市污水做比较,研究啤酒废水、污泥的化学耗氧量(COD)、pH、发酵情况及其毒力.结果表明,以啤酒厂混合池原废水和酸化池废水为原料培养Bt,活芽胞数可达109 cfu.mL-1级,与城市污水相比(D595 nm=0.202),能产较高的晶体蛋白(D595 nm=0.209),发酵时间18.0-22.5 h.用啤酒废水培养Bt的发酵液毒力更强、发酵周期短、营养好,适合做为Bt发酵的工业化原料.
关键词：
苏云金芽胞杆菌 啤酒废水污泥 发酵
[期刊] 华北农学报
[作者]
冯静静 郭巍 刘廷辉 孙永祥 孙伟明 徐大庆
克隆对鞘翅目害虫有毒力的B t新菌株GW S7的cry7Ab8基因,并对该基因进行表达和杀虫活性的研究。利用全长PCR方法克隆cry7Ab8基因,将cry7Ab8基因插入到表达载体pET28b,获得重组质粒pETcry7Ab8,转化E.coliBL21(DE3),诱导后表达130 kDa的蛋白。将cry7Ab8基因连接到大肠杆菌-苏云金杆菌的穿梭载体pSXY422b,获得重组穿梭质粒pScry7Ab8,电激转化到苏云金杆菌无晶体突变株HD73-(cry-),获得工程菌B ioHD7Ab8,表达蛋白后进行生物活性测定。生物活性测定结果显示Cry7Ab8蛋白对马铃薯瓢虫二龄幼虫有较强的杀虫活性,L...
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
戴经元 王波 罗曦霞 喻凌 詹学明 喻子牛
对从中国２０个省（区）采集的１５４２个土壤样品中分离的４１０株苏云金芽孢杆菌进行了血清学鉴定。结果表明，２１８株（５３．２％）属于已知３０个标准Ｈ－血清型中的１５个Ｈ－血清型，即Ｈ１、Ｈ２、Ｈ３、Ｈ４、Ｈ５、Ｈ６、Ｈ７、Ｈ８、Ｈ１３、Ｈ１４、Ｈ１５、Ｈ１６、Ｈ１７、Ｈ２２和Ｈ２６。其余的１９２株中，除１７５株为无鞭毛或自凝菌株无法进行血清学鉴定外，１６株（３．９％）的Ｈ－抗原不与已知２７个标准Ｈ－抗血清起交叉反应，其中有４株的Ｈ－抗血清也不与已知２７个标准菌株的Ｈ－抗原起交叉反应；另一菌株无Ｈ－抗原，但其伴孢晶体和芽孢不分离，并连成长链状。这５个菌株生化反应也与Ｈ－血清型１－２７的标准菌株不同...
关键词：
苏云金芽孢杆菌,血清学鉴定,毒力,土壤
[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
邓英 戴经元 傅海庆 喻子牛
选取１６株苏云金杆菌自凝菌株对其Ｈ－血清型进行鉴定。研究结果表明，在摇瓶培养基的ｐＨ值为９．０（消前）、培养温度为４０℃时，可延缓自凝现象的出现；在试管凝集反应中，水浴温度为４０℃，可延缓自凝现象的出现。在以上选择条件下，能明显地将凝集反应和自凝现象区分开，从而将１６株自凝菌株的Ｈ－血清型分别鉴定为Ｈ３（７株）、Ｈ８（３株）、Ｈ１４（３株）、Ｈ３３（２株）和Ｈ４０（１株）。
关键词：
苏云金杆菌 自凝菌株 H~-血清型
[期刊] 华北农学报
[作者]
王伟 郭巍 徐大庆 孙伟明 刘大群 李瑞军
Cry8Ea2蛋白是一种新型苏云金杆菌杀虫晶体蛋白。通过穿梭载体pSXY422b将cry8Ea2导入Bt无晶体突变菌株中,获得工程菌HD8Ea2。Cry8Ea2蛋白在工程菌中获得表达。通过分子筛层析,成功获得纯化的130 kDa活性毒素蛋白。用改进的生物活性测定方法进行Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟和暗黑鳃金龟一龄幼虫的杀虫活性测定,LC50分别为0.267 9μg/mL和0.071 9μg/mL。研究首次发现Cry8Ea2蛋白对华北大黑鳃金龟具有较高毒力,拓展了该蛋白的杀虫谱,为转基因工程提供了新资源。
[期刊] 浙江林学院学报
[作者]
马良进 张立斌 崔永三 冯炎龙
在用5种农药的不同浓度处理后的马铃薯+蛋白胨+葡萄糖+琼脂(PPDA)培养基上培养苏云金杆菌Bacillusthuringiensis,结果表明在农药释稀5000倍时,对苏云金杆菌的生长没有影响。而苏云金杆菌与5种农药按1∶1和3∶1比例混配后的杀虫效果试验表明,苏云金杆菌菌体浓度为1012个·L-1与绿植(稀释浓度5000倍)或虫螨杀星(稀释浓度5000倍)的混配杀虫效果最好。表2参5
关键词：
苏云金杆菌 农药 混配 杀虫效果
[期刊] 农业现代化研究
[作者]
费成煜
通过发酵工艺条件研究，发现发酵菌数的高低并不能代表杀虫毒力高低。另外通过培养基浓度、培养基组成、培养温度和通气量试验，使发酵毒力效价从原来的１０００ＩＶ／ｍｇ，平均提高到２２００ＩＶ／ｍｇ，最高罐批达３８００ＩＶ／ｍｇ，使苏云金杆菌制剂的质量有了较大提高。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
朱文 杨志荣 刘世贵 侯若彤
采用石蜡组织切片和电镜超薄切片技术，对苏云金杆菌亚种Ｂ．ｔ．７侵染蝗虫后，在宿主中肠组织的病理变化和细胞病理超微结构的变化进行了研究。结果表明，这株苏云金杆菌感染蝗虫１８小时后，宿主中肠组织开始出现病变，４８小时以后中肠上皮细胞开始溃烂。宿主中肠细胞器如线粒体、内质网、核糖体和细胞核等均有不同程度的病变，其中以线粒体病变最为严重，中肠细胞表面的微绒毛也有的呈现空泡状突起、脱落等病症表现。
关键词：
苏云金杆菌,蝗虫,组织病理,细胞学病变
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