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[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
何晨阳 顾光昊 王金生
用注射接种法测定了水稻白叶枯病菌诱导烟草过敏性反应的能力,发现所有测试菌株在诱导烟草过敏性反应出现时间和组织中的菌量方面都有差异。不同来源和小种的原始菌株都具有诱导能力,转座子Tn5诱变的突变体菌株只有一个突变体 XcoM3105失去了诱导能力.亲本菌株在烟草叶片组织中的种群量迅速下降,细菌被限制在接种区内,突变体菌株在组织中可以繁殖和扩展。测定细菌细胞不同组分的诱导活性,发现脂多糖是诱导烟草过敏性反应的信号物质,诱导活性中心是多糖体组分.亲本菌株和突变体的脂多糖和多糖体表现相同的诱导活性。对这一结果进行了讨论.
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
许志刚 易建平 朱晓丹
在水稻白叶枯病和水稻细菌性条斑病的检疫和生态学研究中,经常需要对病原细菌进行分离、检验,除了常规的鉴定技术之外,迫切需要一种对细菌是否具有致病能力的快速检测技术。Klement 在1964年报道了植物病原假单胞菌在不亲和的敏感寄主植物(烟草)叶片上接种后,在24小时内是否出现枯斑反应,可判断一个菌株有无致病能力。当毒性病原菌和抗病寄主或弱毒性病原菌和感病寄主接触时,均可产生完全相同类型的
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
张含 王冰倩 杜逸晨 宋康丽 李佳杨 聂婧源 宋从凤
[目的]探究水稻白叶枯病菌是否存在存活但不可培养状态(viable but non-culturable, VBNC),将有助于更好地了解水稻白叶枯病的病害循环，为有效防治水稻白叶枯病提供理论基础。[方法]对分离采集自田间、保存在室温和4℃下1～4年的水稻白叶枯病叶，采用划线稀释分离法进行病原菌的平板分离，探索不同温度处理下病叶中白叶枯病菌的可培养情况。将带利福平抗性的白叶枯病菌PXO99~A菌株剪叶接种感病水稻品种‘深两优871’,病叶剪成小段分别置于4、28和37℃下保存，每隔30 d取病叶小段，通过平板分离进行病原菌含量的测定。利用染色全细胞染料Microlight~(TM) Green JJ98 and JJ99以及染死细胞染料碘化丙啶(PI)对喷菌液中细胞的存活程度进行测定。[结果]采集自田间、保存在室温和4℃下的病叶都有明显的喷菌现象；只有从4℃保存(甚至保存4年)的样品上可以分离到病原菌，而保存在室温的样品上都不能分离到白叶枯病菌。从人工接种的保存在3个温度下的病叶上分离的病原菌，随着保存时间的增加，可培养的PXO99~A菌量呈现下降趋势，其中37℃保存60 d后未分离到病原菌。荧光染色结果显示，保存60 d后，4、28和37℃条件下保存的样本中活细胞的比例分别为52.52%、32.17%和24.02%。以上结果说明，37℃病叶中的病原菌部分进入了VBNC状态。[结论]高温诱导了水稻白叶枯病样中的病原菌进入了VBNC状态。这为研究水稻白叶枯病菌的侵染生物学特征和制定有效的防治策略提供了科学依据。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
彭建令 董宏平 包志龙 董汉松 王金生
从烟草中克隆了受病原物诱导的植物启动子 (pathogen inducibleplantpromoters,PPPs)PPP1、PPP2、PPP3,其长度分别为 130 8,1170 ,2 2 0bp ,序列分析表明它们均含有受细菌诱导的反应元件 (Bac)。资料检索表明 ,PPP3可能是从植物分离的、受细菌诱导的最短的启动子。构建了包括每个PPP启动子和报道基因uidA (编码 β 葡萄糖醛酸酶 ,GUS)的转化单元 ,用它们以及包括来自椰菜花叶病毒 35S启动子和uidA单元 ,在相同条件下分别转化烟草 ,获得了分别含PPP和 35S启动子的 4类转基因烟草品系 ;分子检测表明 ,转化单元...
关键词：
病原物诱导性启动子 反应元件 转基因烟草
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙玉静 马文秀 蔡璐璐 刘良 邹丽芳 陈功友
【目的】水稻条斑病菌（Ｘａｎｔｈｏｍｏｎａｓ ｏｒｙｚａｅ ｐｖ．ｏｒｙｚｉｃｏｌａ）中单链Ｄｎａ结合蛋白（ｓｉｎｇｌｅ－ｓｔｒａｎＤｅＤ Ｄｎａ－ｂｉｎＤｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ，ｓｓｂＸ）通过病原菌ｉｉｉ型分泌系统（ｔｙｐｅ－ｉｉｉ ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ ｓｙｓｔｅｍ，ｔ３ｓｓ）分泌，在非寄主植物烟草上产生过敏反应（ｈｙｐｅｒｓｅｎｓｉｔｉｖｅ ｒｅｓｐｏｎｓｅ，ｈｒ），研究旨在明确ｓｓｂＸ激发烟草产生ｈｒ的机理。【方法】将水稻条斑病菌ｒｓ１０５菌株注射水稻和烟草叶片，应用ｃｒｅａｔｏｒｔｍ ｓｍａｒｔｔｍ ｃＤｎａ文库构建试剂盒构建水稻和烟草ｃＤｎａ文库，借助ｐｇａＤｔ－ｓｆｉ ａｂ载体上特．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
孙玉静 马文秀 蔡璐璐 刘良 邹丽芳 陈功友
【目的】水稻条斑病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzicola)中单链DNA结合蛋白(single-stranded DNA-binding protein,SsbX)通过病原菌III型分泌系统(type-III secretion system,T3SS)分泌,在非寄主植物烟草上产生过敏反应(hypersensitive response,HR),研究旨在明确SsbX激发烟草产生HR的机理。【方法】将水稻条斑病菌RS105菌株注射水稻和烟草叶片,应用CreatorTM SMARTTM cDNA文库构建试剂盒构建水稻和烟草cDNA文库,借助pGADT-Sfi AB载体上特...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
马国胜 高智谋 曹舜
【目的】探究烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)的寄主范围,为烟草黑胫病菌的相关研究提供理论依据,为烟草黑胫病菌所致病害的综合防治提供决策依据。【方法】人工模拟烟草黑胫病菌在田间的侵染途径,采用菌丝块创伤和不创伤接种61种农作物及杂草的活体或离体组织,结合柯赫氏法则鉴定,对烟草黑胫病菌的寄主范围进行较为系统的大样本研究。【结果】烟草黑胫病菌在人工创伤条件下可侵染21科41属51种植物,在不创伤条件下可侵染10科15属16种植物,首次发现烟草黑胫病菌在人工创伤接种条件下可以侵染21科40属47种植物,在人工不创伤接种条件下可以侵染10科12...
关键词：
烟草黑胫病菌 人工接种 寄主范围
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
孔维文 邵敏 彭建令 董汉松 王金生
利用mRNA差异显示技术从水稻中克隆到一个受白叶枯病菌诱导的基因片段 (rgi 97)。根据RT PCR结果 ,rgi97具有诱导表达特性 ,在水稻受白叶枯病菌侵染后 2 4h时检测不到 ,36h时有微弱表达 ,而到 4 8h时表达增强。通过3′RACE技术获得了该片段 3′端约 970bp的序列。相似性搜索表明 ,包含 3′末端的rgi 97可能的编码产物与拟南芥一个未知蛋白有一定相似性 ,达 92 % ,提示该基因可能与水稻对白叶枯病的抗性有关。
关键词：
水稻 抗病性 调控基因
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
何晨阳 王金生
笔者综述了分子植物病理学科组对水稻白叶枯病菌致病基因的研究结果和进展，介绍了病菌致病基因研究中分子遗传学分析方法，报道了病菌毒性基因、无毒基因和受寄主诱导基因的特征和功能，阐述了致病基因对致病性、致病生化因子可能的调控关系，讨论了该领域的研究现状和前景。
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
陈磊 韩志成 王晨 杨万风 钱国良 胡白石 刘凤权
根据黄单胞菌hisF基因的同源性设计简并引物,采用PCR方法从水稻白叶枯病菌(Xanthomonas oryzaepv.oryzae,Xoo)中克隆了hisF同源基因,命名为hisFXoo。NCBI网站蛋白质保守结构域搜索表明,HisFXoo属于组氨酸生物合成蛋白家族的一员,具有与其他HisF蛋白相似的结构。序列比较显示,该基因在黄单胞菌中是相对保守的。同源性搜索比较显示,与水稻条斑病菌(X.oryzaepv.oryzicola,Xooc)的hisF(登录号:DQ372107)同源性高达98%。通过同源重组的方法,构建了hisFXoo的插入突变体,在NA+Amp平板上筛选后,并且经过PCR及S...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
商明清 梁元存 刘爱新 胡雪光 董汉松
用来自赤星病菌弱毒株的糖蛋白激发子处理烟草 ,能明显抑制烟草体内过氧化氢酶 (CAT)的活性 ,增加组织中H2 O2 的含量。诱导后 1dCAT活性就已开始下降 ,至第 6天下降到最低 ,以后又逐渐恢复。而H2 O2 含量的变化趋势与CAT活性的变化相反 ,随CAT活性的降低 ,组织中H2 O2 含量逐渐增加 ,在诱导后第 10天达到最大值。激发子处理烟草还可以诱导碱性PR蛋白基因PR 1b的表达 ;同时 ,烟草对赤星病强毒株的抗性逐渐增强 ,以诱导后第 10天接种抗性最强 ,且这种抗性是系统性的。水杨酸 (SA)处理后CAT及H2 O2 的变化与上述趋势类似。
[期刊] 林业科学
[作者]
孙绪艮 乔鲁芹
Olfactory respones of Tetranychus viennensis to different plants odors with “Y” olfactometer and petri-dish was studied and volatiles from leaves of different plants were absorbed with SPME and analyzed with GC-MS. It was showed: Olfaction takes part in the response during the Hawthorn Spider Mite ...
[期刊] 南京农业大学学报
[作者]
林玲 伍辉军 梁文伯 高学文
［目的］拟从马来西亚植物根际土壤中分离和鉴定抑菌能力强的芽孢杆菌菌株，并对菌株产生的脂肽类抗菌物质的种类以及生防效果进行研究。［方法］采用平板对峙试验，筛选具有抑制水稻白叶枯病菌和油菜菌核病菌的芽孢杆菌，基于１６Ｓ ｒ ＤＮＡ、ｇｙｒ Ｂ基因序列对分离菌株进行分类鉴定，采用基质协助激光解吸附／电离－飞行时间质谱（ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ－ＭＳ）法鉴定菌株所产生的脂肽类抗生素的种类，并通过温室试验对菌株防治水稻白叶枯病的效果进行研究。［结果］拮抗试验结果表明：Ｄ１５、Ｗ３、ＫＬｕ７、ｙＭ１６、Ｄ１和ＰＬＺ２６这６株菌株对水稻白叶枯病菌或油菜菌核病菌具有较强的抑制活性，其中菌株Ｄ１５和Ｗ３对这２种病原菌．．．
[期刊] 中国农业科学
[作者]
余腾琼 梁斌 叶昌荣 徐福荣 汤翠凤 毛孝强 戴陆园
从云南高原粳稻区采集分离36份白叶枯病菌株,在包括初步选定的7个高原粳稻白叶枯病菌鉴别品种(毫糯扬、TN1、黄玉、珍珠矮、IR26、南粳33、金南风)在内的29个水稻品种上测定致病型,进一步明确了这7个鉴别品种的有效性。发现菌株与品种之间具有交叉互作反应,菌株与品种之间存在质的特异性互作关系;利用这套鉴别品种可将36个菌株划分为9个致病型,其中Ⅴ型菌为优势菌群,Ⅶ型菌为毒性菌群。云南高原粳稻区的主栽品种多数感病。稻种资源IRBB21(Xa-21)、扎昌龙(Xa-22t,Xa-24t)、IR1545-339(xa-5)对所有参试菌株均表现抗病,在云南高原粳稻育种中具有较好的利用价值。
关键词：
高原粳稻 白叶枯病菌 致病型 抗性 云南
[期刊] 华北农学报
[作者]
欧阳乐军 黄真池 沙月娥 曾富华
根据GenBank中植物病原物诱导型启动子碱基序列设计引物,以烟草基因组DNA为模板,扩增PPP3启动子。用PPP3替换pCAMBIA1301中与gus基因相连的35S启动子,构建重组质粒pCOMBIA+PPP3+gus后导入农杆菌GV3101。通过农杆菌介导的瞬时表达技术将受PPPs控制的gus基因导入烟草。分别接种青枯菌和水杨酸24 h后,烟草叶片中检测到gus基因转录效率分别提高了27.94,17.69倍。表明PPP3启动子具有本底表达水平低、诱导表达活性强的特点。
关键词：
诱导型启动子 瞬时表达 定量PCR
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