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[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 叶志杰  刘学群  吴仕筠  王春台  
分别用3种不同浓度的水杨酸(SA,3.25×10-5,7.5×10-5,1.5×10-4mol/L)处理水稻红莲型细胞质雄性不育(HL-CMS)型不育系粤泰A(YTA)和同核异质的保持系粤泰B(YTB)的三叶期幼苗,研究了幼苗叶片蛋白质含量及细胞壁纤维素和木质素含量的变化。结果表明,外源SA对水稻HL-CMS不育系和保持系的作用效果明显不同。3种浓度的SA均对YTA叶片蛋白质含量的增加起一定的促进作用,其中高浓度SA (1.5×10-4mol/L)的促进作用最为显著,但高浓度的SA对YTB则表现出抑制作用。与对照组(木村B培养液处理)相比,3.25×10-5mol/L和7.5×10-5mol/...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 孟祥南  张迪  范海延  于洋  崔娜  宋铁峰  
以黄瓜幼苗的叶片为材料,分别采用酚提取法、盐提法、尿素提取法和真空渗透提取法分离细胞壁蛋白,比较不同提取方法的提取效果,以期为黄瓜细胞壁蛋白质组学研究的开展奠定基础。结果表明:盐提法的蛋白产率最高,尿素提取法次之,真空渗透提取法和酚提取法的蛋白产率较低;采用六磷酸葡萄糖脱氢酶活性测定法检测细胞质蛋白的污染率,其中,真空渗透提取法获得的细胞壁蛋白污染率最低(1.07%),其次为盐提法(2.17%),而酚提法和尿素提取法的污染率分别高达25.90%和2.60%;SDSPAGE电泳分析表明盐提法的蛋白条带清晰,且细胞质中高丰度蛋白Rubisco的条带不明显。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 林梓浩  李玉红  董从娟  陈鹏  
【目的】建立一套适合黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学研究的双向电泳体系,为黄瓜细胞壁蛋白质组学的后续研究奠定基础。【方法】以黄瓜品种"长春密刺"幼苗叶片为材料,比较2种不同提取介质(CaCl2和LiCl溶液)对细胞壁蛋白的提取效果,对比IPG胶条梯度、裂解液、上样量及等电聚焦程序对黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳结果的影响。【结果】以0.2mol/L CaCl2和3mol/L LiCl溶液依次提取黄瓜叶片细胞壁蛋白,选用17cm pH 3~10NL IPG胶条和裂解液Ⅱ(7mol/L尿素、2mol/L硫脲、40g/L CHAPS、10g/L DTT和1mmol/L PMSF),上样量800μg,按聚焦程序Ⅰ...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 刘学群  杜爱玲  王春台  王洁  刘建朝  
在短日照长暗期条件下的暗期,对小麦华麦8号幼苗给予红光、远红光间断处理,研究不同光质对小麦细胞壁成分的影响,结果表明,红光间断处理细胞壁木质素含量增加,远红光处理的则下降;红光与远红光处理的叶片细胞壁纤维素含量虽无明显差异,但红光处理的细胞壁抗纤维素酶水解能力下降,远红光处理的抗纤维素酶水解能力则增强。
[期刊] 华北农学报  [作者] 邵彩虹  王萍  陈金  李瑶  刘光荣  谢金水  彭春瑞  
为揭示不易早衰水稻耐养分胁迫机理,应用蛋白质组学分析技术,对养分胁迫下不易早衰水稻隆平001生育后期叶片蛋白质组差异表达进行了研究。叶片蛋白质图谱经软件Imagemaster 2D Elite 5.0分析,有26个蛋白质发生差异表达,其中17个蛋白质功能经质谱分析(ESI-Q MS/MS)得到鉴定。差异表达蛋白质功能分析显示,养分胁迫下,隆平001叶片中光合及养分再利用相关蛋白质表达量增强,从而满足养分胁迫下植株生长发育的需要,是其具有较强抗养分胁迫的内在机理,而参与活性氧清除及逆境保护相关蛋白质表达量增强,可以保护光合机构免受胁迫伤害,从而对养分胁迫有更强的耐性、不易发生早衰。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 胡婧  程钢  谭艳平  王春台  刘学群  
以常规基因重组技术,将orf216基因克隆入含有内含肽标签的原核表达载体pTYB1中,得到重组质粒pTYB1-orf216,经鉴定正确后,转化至大肠杆菌ER2566感受态细胞,15℃下0.8 mmol/LIPTG诱导15 h后,SDS-PAGE检测到大小约85 ku的特异性蛋白条带,融合蛋白以可溶组分形式存在。融合蛋白经亲和纯化后制备多克隆抗体,Western blot分析表明多克隆抗体具有较高的特异性,可与免疫原特异结合。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 邵继荣  谢戎  唐梅乐  
以水稻1103s和亲本8902s为材料,研究在降温条件下植株间断失绿性状表达过程中叶绿体蛋白质谱带、蛋白质含量与蛋白酶活性、光合作用变化。结果表明,在降温条件下,随性状表达1103s的叶绿素含量下降,叶绿素a/b值上升;在叶绿体蛋白质谱带中,20KD、25KD、50KD等主带含量减少。从同一叶片性状表达的绿区与黄区叶绿体蛋白质比较看,黄区缺少18KD,这说明同一叶片不同区域叶绿体蛋白质低温反应不同,从而造成蛋白质降解也不同,这是间断失绿性状表达的基础。从降温结束到性状表达(约2d~3d),叶片蛋白质含量下降与蛋白酶活性提高呈显著负相关;当性状逐渐消失时,蛋白质含量与叶绿素含量同步增长。据此认为...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 邵彩虹  王经源  林文雄  
【目的】从蛋白质组学角度对杂交水稻汕优63苗期的叶片蛋白质组变化进行研究,以揭示水稻苗期叶片蛋白质组的表达差异。【方法】蛋白质点经双向电泳得到分离,并采用Imagemaster 2D Elite5.0软件对所得到的双向电泳图谱进行分析比较。【结果】经图谱分析共得到差异蛋白质点41个,其中三叶期后新增蛋白质点17个,包括9个仅在三叶期出现特异的特异蛋白质点,13个蛋白质点表达丰度先逐渐增强随后减弱或在消失,其它11个蛋白质点中,自二叶期开始表达丰度呈现下降的蛋白质点有3个,保持上升的有6个,不规律出现的有2个;其中的15个蛋白质点经质谱分析得到鉴定。【结论】蛋白质是细胞功能执行者,受细胞功能或细...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 韦丹蒙   黄秋婵   兰娟   梁海红   黄自如   朱思凤  
【目的】探究不同浓度SiO2对锰—铅(Mn-Pb)复合胁迫下水稻幼苗叶片细胞壁多糖组分中Mn和Pb含量的影响,为利用农艺措施治理矿区农田重金属复合污染提供理论依据。【方法】在模拟矿区重金属污染前提下,先用水培法将水稻种子培养至5叶1心期,然后用2 mmol/L Mn2++ 2 mmol/L Pb2+溶液复合胁迫水稻幼苗。设6个不同的SiO2处理浓度:0(对照,CK)、70、90、110、130和150 mg/L。处理后提取水稻幼苗叶片细胞壁多糖组分,测定和分析其中Mn和Pb含量。【结果】施加SiO2增加了细胞壁多糖组分(果胶质、半纤维素和纤维素)中Mn和Pb含量。与CK相比,当SiO2浓度为70~110 mg/L时,细胞壁果胶质中Mn和Pb含量较高;SiO2处理下果胶质中Pb含量大于Mn含量,当SiO2浓度小于90 mg/L时,水稻幼苗叶片细胞壁中Pb含量小于Mn含量。SiO2浓度为110 mg/L时,在半纤维素和纤维素中Mn和Pb含量均较高;水稻幼苗叶片细胞壁半纤维素中Pb含量大于Mn含量,SiO2浓度小于90 mg/L时,纤维素中Pb含量为负值。未施加SiO2时,Mn和Pb的主要结合位点分别为纤维素和果胶质,施加SiO2使Pb的主要结合位点转移为半纤维素。【结论】SiO2能增加重金属Mn和Pb在细胞壁多糖组分中的含量。Mn-Pb复合胁迫下,SiO2浓度为110 mg/L时,Mn和Pb的含量在细胞壁、果胶质、半纤维素和纤维素中均较多。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 许培磊  白吉刚  王秀娟  宗成顺  田明  
【目的】分离不同基因型黄瓜叶片的低温诱导蛋白,为从蛋白质组角度揭示黄瓜应答低温逆境的调控机制打下基础。【方法】以黄瓜(Cucumis sativusL.)的日光温室品种‘新泰密刺’和露地栽培品种‘津研4号’为试材,采用分步提取法溶解叶片总蛋白质,运用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳、双向电泳、质谱分析与检索技术,在100μmol·m-2·s-1的光照条件下,比较研究低温(15/15℃)和常温(25/18℃)下叶片蛋白质组的差异。【结果】利用提取液Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ分步提取叶片总蛋白质后,提取液Ⅰ溶解的黄瓜蛋白质较少。对提取液Ⅱ和Ⅲ溶解的叶片蛋白质进行双向电泳后发现,相对于常温处理,低温使‘新泰密刺’的7个蛋白...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 高凤仙  常嵩华  田科雄  钟元春  陈宇光  
采用盆栽试验研究了不同铜浓度的猪粪对玉米叶片蛋白质、氨基酸含量的影响.供试猪粪为猪采食基础日粮添加铜250 mg/kg排出的粪,设每盆施猪粪100,200,300 g 3个试验组,对照组猪粪为猪采食基础日粮排出的粪,每盆施300 g.移栽3叶期玉米后10,20,30,40 d测定玉米叶片可溶性蛋白质含量、游离氨基酸总量和脯氨酸含量.结果表明,玉米移栽后10~20 d,叶片可溶性蛋白质、游离氨基酸总量显著高于对照组;玉米移栽后30~40 d,随着施用猪粪含铜浓度的增大和时间的延长,叶片可溶性蛋白质含量、游离氨基酸总量显著低于对照组,铜浓度越高,其含量下降越快;试验全期,随猪粪铜浓度的增加玉米叶片...
[期刊] 华北农学报  [作者] 陈鸿飞  张志兴  林文雄  
为探究促芽肥对头季稻的调控效应,以Ⅱ优1273为材料,在头季稻齐穗后18 d设置施用促芽肥和未施用促芽肥2种处理,采用比较蛋白质组学的方法和技术,并结合相关生理指标测定,分析了促芽肥对头季稻灌浆后期叶片蛋白质表达及相应生理特性的影响。不同促芽肥处理的头季稻灌浆后期叶片蛋白质经双向电泳分离后共获得了15个差异表达的蛋白质点,涉及头季稻灌浆后期叶片的光合碳同化、电子传递与光合磷酸化和抗逆抗衰老响应等,分析结果表明,头季稻后期剑叶中与光合碳同化、电子传递与光合磷酸化相关蛋白随灌浆进程呈下降趋势,施用促芽肥能明显减缓其下调幅度,从而使头季稻灌浆后期剑叶具有相对较高的叶绿素含量和净光合速率,提高了头季稻...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 陈智雄  齐桂年  陈盛相  胥伟  
为探明水杨酸(SA)对茶树离体叶片衰老的影响,先后分别用0、100、200、300、400、500 mg/L和0、50、100、150、200 mg/L的水杨酸处理茶树离体叶片。结果表明,一定浓度的水杨酸能有效延缓茶树离体叶片的衰老,但质量浓度高于200 mg/L的水杨酸会导致离体叶片出现不同程度的伤害;50、100、150 mg/L处理均能使离体叶片保持正常,且能减缓其衰老过程中SOD活性、叶绿素含量、可溶性蛋白含量的降低和MDA的积累,其中100 mg/L处理的效果最好。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 刘太国  李永镐  陈万权  
用水杨酸(SA)和普通烟草花叶病毒(TMV)诱导且接种抗病烟草品种CV85和感病烟草品种G80,研究其对烟草叶片苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性的影响。结果表明,抗、感病烟草品种对照接种处理的PAL活性均较对照增加;抗病烟草品种CV85诱导和诱导接种处理的PAL活性也较对照增加,且较对照接种增加得更为明显,8d时可达活性高峰;而感病烟草品种G80诱导接种后,其PAL活性先增加后降低,而对照接种后PAL活性升高,17d时达到活性高峰;诱导接种并没有增加感病烟草品种的PAL活性,而增加了抗病烟草品种的PAL活性。可见,外源应用SA控制烟草花叶病毒病在抗病品种上表现更好。
[期刊] 中南林业科技大学学报  [作者] 马松亚  蒋维昕  屈林丰  曹雪宁  谭玲  杨梅  
为了建立适用于桉树叶片蛋白质组研究的双向电泳体系,以尾叶桉Eucalyptus urophyllas广林4号无性系作为试验材料,对蛋白质样品获取方法、双向电泳等电聚焦胶条p h范围、蛋白质上样量、胶条平衡条件以及染色方法进行了优化。结果表明:提取液+酚抽提法最适合桉树叶蛋白质的提取,电泳图谱可检测到850个蛋白质点。7 mol/l尿素+2 mol/l硫脲+4%chaps+60 mmol Dtt 10μl的蛋白质干粉裂解液,裂解效果较好;使用50 mg蛋白质干粉和600μl裂解液所获得的蛋白质浓度较高,为3.97μg/μl。使用p h4~7、24 cm Ipg胶条,蛋白质上样量为1 200μg,...
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