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[期刊] 淡水渔业
[作者]
王红莉 刘丽娟 张德锋 尹纪元 石存斌 任燕 夏苏东 王庆
微生物制剂因其具有无毒害、无污染、低成本的优点在水产领域迅速发展，成为最具潜力的抗生素的替代产品。本研究通过对市场在售水产微生物制剂中的细菌进行分离培养与鉴定，以及抗生素药敏实验、耐药基因和可移动遗传元件的检测，评估水产微生物制剂源细菌的耐药性，为水产养殖中益生菌的筛选和安全应用提供科学依据。结果显示，分离得到的211株细菌可分为9个属，其中以芽孢杆菌属、肠球菌属、乳杆菌属为主。药敏实验结果显示，211株分离菌株中98株(46.7%)细菌表现为耐药。进一步对耐药性较强和多重耐药的79株细菌进行五大类(磺胺类、氨基糖苷类、四环素类、大环内酯类和β-内酰胺类)耐药基因和可移动遗传元件检测。结果显示，79株耐药菌中携带耐药基因的菌株阳性率为74.7%,存在多重耐药基因的菌株高达40.5%,氨基糖苷类和磺胺类耐药基因的检出率最高，分别为53.2%和40.5%。可移动遗传元件(Tn916/1545)检出率为13.9%。综上可知，市售微生物制剂中发现了耐药菌株以及耐药基因，表明水产用微生物制剂存在一定的安全隐患，应加强对微生物制剂的安全性检测和风险评估。
关键词：
微生物制剂 分离 鉴定 耐药性 抗性基因
[期刊] 实验技术与管理
[作者]
李佛生 胡舒昶 谢鑫 李一璠 汪杭 冯兰 杨鑫
对红原县16头牦犊牛分别采集腹泻粪样,用选择性培养基分离,并根据形态特征和16SrRNA基因序列分析鉴定得到了沙门氏菌、大肠杆菌、芽孢杆菌等64株菌株。采用药敏纸片法检测所得菌株对8类、共计9种药敏纸片的耐药性。结果表明:所测菌株对庆大霉素、环丙沙星、复方新诺明、氨曲南较敏感,耐药率为0%～25%;对红霉素和万古霉素耐药率为75%～100%。该实验不仅为抗生素类药物治疗牦牛腹泻问题提供参考,还有助于研究型创新人才培养,也为今后开设综合创新实验教学奠定了基础。
[期刊] 华北农学报
[作者]
贾艳华 李凤娟 刘建华 胡功政 莫娟 余军军
为探讨鸡源大肠杆菌生物被膜的耐药机制,采用改进的平板培养法建立鸡大肠杆菌生物被膜体外模型,用液体二倍稀释法分别测定了鸡源大肠杆菌生物被膜菌、浮游菌和脱膜菌对克拉霉素、环丙沙星、磷霉素等13种抗菌药的敏感性,并检测了细菌生物被膜中超广谱β-内酰胺酶的产生情况。结果表明:浮游菌和脱膜菌对同种药物的敏感性几乎相同,而生物被膜菌对同种药物的耐药性比后两者显著增强,并且2株不产超广谱β-内酰胺酶的浮游菌在形成生物被膜后产生了超广谱β-内酰胺酶。由此说明,生物被膜菌的耐药性主要是由于生物被膜这种特殊结构造成的,同时,由于生物被膜的存在,促使了超广谱β-内酰胺酶的产生。生物被膜的形成和超广谱β-内酰胺酶的产...
[期刊] 西南农业学报
[作者]
马玲 谭义俊 邵帅 吴健敏 廖文军 黄红梅 白安斌
从发病鸡关节腔内分离获得1株革兰氏阳性球菌,根据细菌形态、生理生化特性、动物试验,结合16S rRNA基因核苷酸序列测定、系统进化树分析及生物膜半定量检测,确定该分离菌株为可形成生物膜的的产色葡萄球菌,该菌在正常条件下不致病。药物敏感试验和耐药基因检测发现,该菌对磺胺六甲、阿奇霉素、米诺环素等8种药物敏感,对环丙沙星、头孢噻肟钠和复方新诺明中敏,而对万古霉素等13种药物低敏甚至不敏感。检测到该分离菌株包含氨基糖苷类、四环素类和磺胺类的6个耐药基因,说明这是一株多重耐药菌株,推测其耐药性与生物膜的形成有密切关系。
[期刊] 福建农林大学学报(自然科学版)
[作者]
吴斌
从发病马口鱼脑组织中分离出致病菌株ObB210709B1,通过对该菌株形态特征、生理生化特性、16S rDNA基因测序分析，鉴定分离菌株为鮰爱德华氏菌.人工感染试验证实此菌株可引起健康马口鱼发病死亡，并表现出与自然发病相似的症状.药敏试验发现：该菌对3种β-内酰胺类、5种氨基糖苷类、5种喹诺酮类、2种四环素类、1种氯霉素类、1种多粘菌素类等17种药物高度敏感；对青霉素、苯唑西林、红霉素、万古霉素和复方新诺明等5种药物耐药.对健康对照组、自然发病组和病原菌回归感染120 h组进行组织病理切片观察，感染鮰爱德华氏菌的马口鱼病理表现为：鳃丝崩解、肝空泡坏死、脾出血且坏死、肾小球出血与肾小管破裂，多组织器官均有细菌团块的聚集，肠道尤为严重.
[期刊] 华北农学报
[作者]
李晨 王思月 嵇少泽 张喜庆 李雪嵩 田佳琪 马红霞 高云航
为研究奥斯陆莫拉菌的致病机制及防控措施,对疑似患有奥斯陆莫拉菌的病猪肺组织进行病原分离,得到了1株优势菌命名为ZF2。对分离菌株进行形态学观察、生化试验、分子生物学鉴定,动物回归试验和药敏试验。结果显示,分离菌株为革兰阴性杆菌且对健康仔猪具有较强的致病性,经生化试验和分子生物学分析鉴定为奥斯陆莫拉菌。该分离菌株对阿奇霉素、红霉素呈现较强的耐药性。经大环内酯耐药基因检测结果显示erm B基因为阳性。本研究对奥斯陆莫拉菌病选择合理、正确的抗菌药物提供了一定的科学依据,并为进一步研究其耐药机制奠定了基础。
[期刊] 海洋渔业
[作者]
谭妙英 常彦磊 张璜 谢会 李丽丽 石磊
为了解芽孢杆菌科细菌的耐药性情况，本研究选择克氏原螯虾（Procambarus clarkii）作为样品分离芽孢杆菌科细菌，鉴定种属后通过微量肉汤稀释法确定菌株对药物的最小抑菌浓度值(Minimum Inhibitory Concentration， MIC)，检测耐药相关基因后通过接合转移实验分析耐药基因的转移情况。结果显示，所有样品共分离出59株芽孢杆菌科细菌，经鉴定可分为短芽孢杆菌属（Brevibacillus sp.）、假芽孢杆菌属（Falsibacillus sp.）、类芽孢杆菌属（Paenibacillus sp.）和芽孢杆菌属（Bacillus sp.），芽孢杆菌属(Bacillus sp.)数目最多，为44株。药敏实验确定耐药菌株共33株，12株对甲砜霉素药物不敏感，菌株基因检测中共检出21种耐药基因和2种转移元件基因。接合转移实验结果表明，在含甲砜霉素药物的环境中耐药基因可以在芽孢杆菌或类芽孢杆菌与大肠杆菌（Escherichia coli）之间转移，并且耐药表型可传代传播。实验揭示了细菌间甲砜霉素耐药表型传播的高风险，对养殖药物的使用及细菌监测具有一定的指导意义。
[期刊] 中国水产科学
[作者]
李爱华
目前 ,抗菌药物在水产养殖动物疾病防治中占有重要地位 ,然而 ,在水产养殖中使用抗菌药物也可产生一系列的副作用 ,例如细菌耐药性的产生和药物在鱼体和环境中的残留。本文就水产药物使用的历史、现状、适应症、副作用 ,耐药性的现状、来源、产生机制 ,耐药菌判定的标准 ,以及该领域的研究现状等问题进行综述与分析 ,以便为合理使用抗菌药物提供理论依据
关键词：
鱼类病原菌 抗菌药 耐药性
[期刊] 世界农业
[作者]
陈光华 赵晓丹 王子恒 宋俊霞 韩梓峰
抗微生物药物耐药性是FAO等国际组织以及各国政府高度关注的公共卫生问题。本文介绍了抗微生物药物耐药性的全球概况、耐药性监测体系、耐药性管理措施,并提出了有关建议,旨在为中国动物源细菌耐药性的相关政策的制定和行动实施提供依据和参考。
[期刊] 水产学报
[作者]
丁戈野 李纯 徐杨 陈晓颖 张秋实 胡亮 邓新兰 刘小燕 冯兴浪 李军华
为探明2023年3月初引起中国重庆市渝北区某牛蛙养殖场暴发疾病的原因，本实验从患病美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道中分离优势菌，采用形态学观察、生理生化实验、16S rDNA和rpoB基因序列测定、系统发育学分析进行鉴定。为确定该菌株的致病机理，对该菌株进行了人工感染实验、组织病理学观察、毒力基因检测、生长特性研究及药物敏感性实验。结果显示，在患病濒死美国牛蛙蝌蚪的肝脏和肠道中分离得到的其中一株优势菌命名为LT202303，经鉴定为约氏不动杆菌。该菌株携带OmpA、Omp34和OmpTsx等3种毒力基因，具有较强的耐盐性和在广泛的pH范围内生存的能力，对美国牛蛙蝌蚪的半数致死浓度为6.8×10~6CFU/mL，发病临床症状为肝脏红肿并伴有大量白色结节，肠道透明发黄。组织病理学观察发现该菌株可引起美国牛蛙蝌蚪肝脏和肠道的明显炎症反应和病灶性坏死。药敏实验结果显示，分离菌LT202303是一种产β-内酰胺酶的多重耐药细菌。本研究表明，约氏不动杆菌对牛蛙蝌蚪具有高致病力，可引起肝脏和肠道等多器官组织的病理损伤最终引发机体的损伤甚至死亡。本研究首次报道约氏不动杆菌感染引起的美国牛蛙蝌蚪传染病的暴发，为该疾病的诊断和防控提供理论参考。
[期刊] 西南农业学报
[作者]
李蓓 李旭林 郭丽娟 龙梅 郭放 何雪梅 罗燕 邹立扣
本实验分离大熊猫粪便样品中大肠杆菌,利用形态学和分子生物学方法鉴定菌株,采用药敏纸片扩散法(Kirby-Bauer)进行常用抗生素耐药性试验分析。结果表明,从抗生素大类来比较,耐药率依次为:四环素类(55.6%)>青霉素类(26.7%)>磺胺类(18.9%)>喹诺酮类(10%)>头孢类(7.8%)>氨基糖苷类(1.1%)>单环内酰胺类(0)、碳青霉烯类(0)。大肠杆菌对四环素的耐药率最高,达到55.6%;对头孢曲松、头孢他啶、氨曲南、亚胺配能及美罗配能等敏感,耐药率为0。其它抗菌药物耐药率依次是:阿莫西林(26.7%)>磺胺复合物(18.9%)>氨苄西林/舒巴坦(17.8%)>复方新诺明(11...
关键词：
大熊猫 大肠杆菌 分离 耐药性
[期刊] 水产学报
[作者]
赵姝 姜兰 周俊芳 王元 房文红
本研究从患病的半滑舌鳎分离得到5株弧菌,对其进行种属鉴定,并研究其耐药性及分子水平耐药机制。采用生化检测方法和分子生物学方法(基因16S rRNA、HSP60和mreB)进行鉴定,结果显示,5株弧菌均为嗜芳香环弧菌。通过肉汤稀释法检测菌株对抗菌药物的耐药性,通过PCR扩增和测序技术检测菌株中耐药基因和4类整合子并对其携带基因盒进行分析。结果显示,5株嗜芳香环弧菌均对环丙沙星、链霉素、红霉素、氟苯尼考、氨苄西林、磺胺甲恶唑、复方新诺明和利福平耐药,且均携带qnr VC、bla CARB-17、strA、strB和sul耐药基因。此外,菌株JS291和JS295携带Ⅰ类整合子、qacEΔ1和sul1耐药基因;可变区携带基因盒分别为dfr16-aad A2和arr-3-dfr A27。5株嗜芳香环弧菌为多重耐药菌株,且多重耐药表型与耐药基因密切相关。
关键词：
半滑舌鳎 嗜芳香环弧菌 耐药性 整合子
[期刊] 水产学报
[作者]
吴小梅 林茂 鄢庆枇 江兴龙 张娴
为了更有针对性地防控水产动物细菌性病害的发生和流行,本实验对美洲鳗鲡及其养殖水体耐药细菌的种属特征及耐药情况开展了相关研究。首先采集美洲鳗鲡不同部位(表皮、鳃、肠道)及其养殖水体的样品,经5种抗菌药物平板筛选耐药菌株,然后采用K-B纸片扩散法检测细菌对抗菌药物的耐药性,同时测定耐药菌株的16S r DNA序列,进而分析耐药菌的种属分布和多重耐药性。结果显示,经耐药平板筛选分离纯化得到108株细菌,分别属于气单胞菌属、柠檬酸杆菌属、不动杆菌属等20个属;其中,93.5%的菌株对3种(含)以上的抗菌药物具有耐药性,86.1%的菌株对3类(含)以上的药物具有抗性。对阿莫西林的耐药率高达90.7%,对...
[期刊] 水产学报
[作者]
李健 赵姝 王元 马立才 刘旭 房文红
通过检测从海水养殖中分离的对氟苯尼考低敏感弧菌菌株中常见酰胺醇耐药基因的携带情况,来分析外排泵抑制剂对弧菌酰胺醇耐药性的影响,旨在研究主动外排机制在我国海水养殖源弧菌耐药中的作用。本研究从前期分离的海水养殖源弧菌中挑选出41株对氟苯尼考低敏感的菌株,运用琼脂稀释法测定了这些菌株对酰胺醇类药物(氯霉素和氟苯尼考)的敏感性;利用PCR方法检测了这些菌株的酰胺醇外排泵耐药基因和整合子的携带情况,包括外排泵基因floR、cmlA、pexA、fexA、fexB和optrA,以及Int1、SXT和ISCR1整合子相关基因;同时研究4种外排泵抑制剂对弧菌氯霉素、氟苯尼考最小抑菌浓度(MIC)的影响,利用琼脂稀释法检测41株弧菌分别加入甲基吡咯烷酮(N-methyl-2-pyrrolidone,NMP)、利血平(reserpine)、羰基氰氯苯腙(carbonyl cyanide m-chlorophenyl hydrazone,CCCP)和苯丙氨酸-精氨酸-β萘酰胺(Phe-Arg-β-naphthylamide,PAβN)4种外排泵抑制剂前后对氯霉素和氟苯尼考的MIC值的变化情况。副溶血弧菌(14株)、溶藻弧菌(17株)、哈维氏弧菌(8株)、创伤弧菌(2株)共41株氟苯尼考低敏感弧菌敏感度检测结果显示,氟苯尼考耐药菌株39株、氯霉素耐药菌株11株。41株氟苯尼考低敏感弧菌菌株中,酰胺醇类外排泵基因floR检出率为100%,而cmlA的检出率仅为17.1%,其他4个外排泵基因均未检出;整合子相关基因Int1、SXT和ISCR1的检出率分别为46.3%(19/41)、46.3%(19/41)和63.4%(26/41)。41株弧菌中,添加NMP、利血平、CCCP和PAβN后,分别有0株、2株、10株和2株弧菌为氯霉素外排阳性菌;分别有1株、1株、15株和3株弧菌为氟苯尼考外排阳性菌。研究表明,CCCP被验证可以作为有效治疗酰胺醇类药物耐药弧菌的外排泵抑制剂。
[期刊] 华北农学报
[作者]
忽占利 李军星 胡松华 王一成 袁秀芳 徐丽华
为了解浙江省规模化猪场患病猪副猪嗜血杆菌的耐药性,采用K-B琼脂法对73株HPS浙江株进行了18种临床药物的敏感性试验,同时应用PCR技术对11个相关耐药基因进行扩增、测序和比对分析。药敏试验结果显示:对磺胺类耐药的分离株比例高达86.30%,对四环素类、氨基糖苷类、喹诺酮类、β-内酰胺类和氯霉素类耐药的比例分别为65.75%,60.27%,50.68%,50.68%,46.58%,对大环内酯类耐药仅为28.77%。PCR分析显示:97.26%的菌株中检测到耐药基因,多重耐药的占84.93%。其中喹诺酮类耐药基因Aac(6')-1b的检出率为76.71%,氨基糖苷类耐药基因AadA1的检出率为...
关键词：
副猪嗜血杆菌 耐药性 耐药基因
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