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[期刊] 华北农学报  [作者] 李青梅  刘庆堂  王寅彪  柴书军  王自良  郭军庆  职爱民  孟红丽  张改平  
以戊二醛法将氨苄青霉素(Ampicillin,Amp)偶联于牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA),合成免疫抗原BSA-Amp和检测抗原OVA-Amp,并进行了鉴定;用BSA-Amp免疫BALB/c小鼠,应用杂交瘤技术建立了4株分泌抗Amp单克隆抗体的杂交瘤细胞株。ELISA和竞争ELISA结果显示,单克隆抗体1G7、2A11、2D10和3F6的腹水抗体效价分别为1∶2.56×107、1∶1.28×107、1∶5.12×106和1∶5.12×106,Amp的半数抑制浓度(IC50)分别为10.22,3.58,4.03,4.95 ng/mL。Amp单克隆抗体与羧苄青霉素(1G7、2A11、...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 职爱民  李青梅  刘庆堂  刘宣兵  杨继飞  杨苏珍  柴书军  杨艳艳  邓瑞广  张改平  
【目的】制备抗庆大霉素(gentamicin,GM)的高亲和力特异性单克隆抗体,并鉴定其免疫学特性,为进一步研究GM快速检测试剂盒和试纸条打下基础。【方法】用EDC法将BSA和OVA分别和GM偶联作为免疫原或包被原,并经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定。用合成的BSA-GM免疫Balb/c小鼠,经过4次免疫后,用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、敏感的小鼠进行抗原超强免疫;取其脾细胞应用杂交瘤技术与骨髓瘤细胞建立分泌GM单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;用体内诱生腹水法制备GM mAb,对GM mAb的效价、敏感性...
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘庆堂  职爱民  邓瑞广  杨艳艳  杨继飞  柴书军  张改平  
建立了分泌抗链霉素单克隆抗体(STRmAb)杂交瘤细胞株并生产了STRmAb,采用胶体金免疫层析试验(GICA)技术成功研制出STR残留快速检测试纸(STR-Strip),并对其性能进行了鉴定。结果显示,目测检测限为12.5μg/kg;与氯霉素等药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%。研制的快速检测试纸可以在10min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合STR残留的现场快速检测。
[期刊] 华北农学报  [作者] 刘宣兵  滕蔓  张改平  杨艳艳  邓瑞广  侯玉泽  杨继飞  
用碳二亚胺(EDC)法将新霉素(NEO)偶联于载体蛋白BSA和OVA,合成免疫原BSA-NEO和包被原OVA-NEO,用红外扫描(IR)、SDS-PAGE进行鉴定;用BSA-NEO免疫BALB/c小鼠,间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠;应用杂交瘤技术建立分泌NEOmAb细胞株,用体内诱生腹水法制备NEOmAb;对NEOmAb的效价、亲和性、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果表明,成功制备了BSA-NEO人工抗原;筛选出1E9、4E8、1G1共3株敏感特异的杂交瘤细胞,间接ELISA效价细胞培养上清分别为1∶2.56×103、1∶1.28×103、1∶5.12×103,腹水...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 王大菊  袁宗辉  范盛先  孔科  
以藤黄八叠球菌(Sarcinalutea)为工作菌,用杯碟法测定氨苄青霉素在猪和肉鸡组织中的残留。结果表明,氨苄青霉素在磷酸盐缓冲液、肌肉和脂肪、肝脏和肾脏中的最低检测限分别为0.00125μg/ml、0.00625μg/g和0.0125μg/g。标准曲线的工作范围为0.00125、0.0025、0.005、0.01、0.02μg/ml。浓度在0.02、、0.005和0.00125μg/ml时,变异系数分别是(2.91±0.2)%、(3.39±0.29)%和(8.87±0.28)%。不同浓度氨苄青霉素的回收率在83%~107%。本法快速、灵敏、简便,各参数均符合兽药残留检测要求,适用于测定氨苄...
[期刊] 华北农学报  [作者] 齐红莉  杨广  刘金兰  
采用碳二亚胺(EDC)法合成卡那霉素完全抗原,免疫BALB/c小鼠,通过杂交瘤技术获得3株能稳定分泌抗卡那霉素单克隆抗体的杂交瘤(5D7、6H8、7G4)。选择其中的5D7株抗体,经ELISA鉴定,细胞上清的效价达103以上,腹水效价达到5×104以上;建立了间接竞争ELISA法,通过优化,其检测限为0.5ng/mL,抗体IC50为3.7ng/mL,与妥布霉素交叉反应率为63.8%,与其他抗生素无交叉。可见ELISA具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合于KAN残留的快速检测,具有较高的推广应用价值。
[期刊] 华北农学报  [作者] 王自良  张改平  杨艳艳  张海棠  杨继飞  刑广旭  柴书军  
以分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞株的建立为基础,应用胶体金免疫层析试验(GICA)成功研制出CAP残留快速检测试纸(CAP_Strip),并对其性能进行了测定。结果表明,CAP_Strip的标准曲线呈典型的S型,符合4参数logit曲线拟合,目测检测限为0.5μg/L;与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应为160%,与其他酰胺醇类和抗菌药物无交叉反应;其敏感性与竞争ELISA试剂盒相当,符合率为100%;10 min内显示结果,具有快速、敏感、特异、简便等特点,适合CAP残留快速检测的推广应用。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 余少梅  艾晓辉  甘金华  刘永涛  索纹纹  
以人工合成的强力霉素-牛血清白蛋白(DC-BSA)为抗原免疫BALB/C小鼠,用间接ELISA和间接竞争ELISA法选择细胞融合的备用小鼠;应用杂交瘤技术建立分泌DC McAb的杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备DC McAb,并对DC McAb的免疫学特性进行鉴定;应用DC McAb建立检测DC的ciELISA方法,并对其相关特性进行检测。结果表明:筛选后获得1株分泌特异性抗体的细胞3D1-H4,细胞培养上清效价为1∶(8×102),腹水效价为1∶(5.12×105),抗体为IgG1型免疫球蛋白,与四环素、土霉素和金霉素分别有8.87%、5.86%和2.74%的交叉反应率,与其他抑制物无交叉反应...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 聂继云  
展青霉素是由青霉属、曲霉属、丝衣霉属等真菌产生的一种聚酮类次生代谢产物,广泛存在于果品及其制品中,苹果及其制品是主要污染源,也是人类膳食中展青霉素最主要的来源。展青霉素有各种急性、慢性和细胞水平的危害。国际组织和不少国家均制定了果品及其制品中展青霉素限量。扩展青霉是最主要的产展青霉素真菌,能污染许多种果品及其制品。扩展青霉地域分布甚广,许多国家均分离到了其菌株。作为植物病原菌,扩展青霉往往通过果实上的伤口如受伤部位、害虫为害部位、病菌感染部位,以及果柄、开放的萼筒、皮孔等部位入侵。过熟和长期贮藏的水果更易
[期刊] 淡水渔业  [作者] 陈超然  孟长明  陈昌福  
从患病牛蛙的病灶部位分离菌株 ,在对分离菌株进行初步鉴定和药物敏感性测定的基础上 ,采取内服分离菌株敏感的氨苄青霉素与在水体中泼洒稳定性粉状二氧化氯 (ClO2 )相结合的方法 ,对患病牛蛙进行了治疗试验。以 5 0 0mg/kg蛙体重的氨苄青霉素拌饵口服 ,每天 1次 ,连续投喂 5天 ,同时采用 0 14mg/L的ClO2 溶液全池泼洒 ,每隔 1天 1次 ,连续泼洒 3次。试验结果表明 ,这种方法对治疗牛蛙的链球菌症具有良好的效果 ,有效率达到了 70 %以上。
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 王自良  王建华  杨艳艳  杨继飞  张海棠  范国英  张改平  
以BSA-CAP-HS免疫Balb/C小鼠,用细胞融合技术筛选抗氯霉素单克隆抗体(CAP mAb)杂交瘤细胞,体内诱生腹水法制备cAP mAb,并鉴定其免疫学特性;依据胶体金免疫层析试验(GICA)原理,以CAP mAb 为金标抗体,研制CAP残留快速检测金标试纸(CAP-Strip),并对其性能进行测定。结果表明,筛选出了3株杂交瘤细胞,其中最好的4F9-B2株间接ELISA效价细胞培养上清为1:1 280,腹水为1:640 000,亲和常数(Ku)为 1.84×1010 L/mol,对CAP的半数抑制浓度(IC50)为0.88μg/L,与氯霉素琥珀酸钠的交叉反应(CR%)为150%,与其他...
[期刊] 浙江林学院学报  [作者] 吴礼栋  吴菊华  翁关豪  
连续2a使用医用青霉素,防治杉苗猝倒病和赤枯病试验所得资料表明:在发病期间,100m ̄2苗床,每次用80万单位注射用青霉素钠1瓶,加水10.0kg,喷洒杉苗,4月初揭去覆草后喷洒第1次,半月1次,连喷9次,防治效果比使用相同次数的600倍液50%敌克松粉剂或1000倍液70%甲基托布津可湿性粉剂提高24%~43%,苗高增长14%~22%,苗木地径增粗13%~19%,而防治成本分别降低29.30%~45.57%和52.34%~56.50%。
[期刊] 淡水渔业  [作者] 钱续  
青霉素对产后虹鳟成活率的影响钱续(甘肃省榆中县渔业工作站)作者于1993年开始在榆中县虹鳟鱼试验场进行了产后亲鱼注射青霉素对其成活率影响的试验,现将结果介绍如下。一、材料与方法1.试验材料试验鱼为本场精心选育的成熟雌雄亲鱼,年龄3-5龄,体重1.8─...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 许建平  孙志良  谭超  袁慧  
为探明桔青霉素对动物机体小肠运动的影响 ,以健康家兔为试材 ,研究了桔青霉素对其小肠平滑肌活动的影响效果 .结果表明 ,0 .1mg/ m L桔青霉素能使小肠运动的张力增加 ,收缩幅度增大 ,与对照药物乙酰胆碱相比差异不显著 ;与小肠运动的正常情况相比差异极显著 ;桔青霉素对小肠运动的频率影响不大 .
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 张秋菊  韩英  
为探索青霉素和赤霉素对香石竹切花保鲜的生理效应,研究了以不同浓度的青霉素和赤霉素为主要成分的保鲜剂对香石竹鲜切花离体衰老过程的调控作用.结果表明:含不同浓度青霉素和赤霉素的保鲜剂均能延长香石竹切花的瓶插寿命,增加切花鲜重,增大花朵开放度,提高花瓣POD酶的活性,改善切花体内水分状况,维持花瓣膜结构的相对稳定.其中,以2%蔗糖+300mg/L8-HQS+100mg/L赤霉素处理的保鲜期最长,以2%蔗糖+300mg/L8-HQS+300mg/L青霉素处理的保鲜品质最佳.
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