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[期刊] 华中农业大学学报
[作者]
金良 甘莉
综述了毛细管电泳 (CE)在蛋白质肽图构建与鉴定、物化常数和结构分析、动力学研究、定性定量与微量制备中的应用以及在核酸的纯度检测、片段置备及PCR产物分析、DNA测序与基因突变检测中的应用。
关键词：
毛细管电泳 蛋白质 核酸
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)
[作者]
张凤云 毛富春 王惠
研究了金属离子与血清蛋白形成配合物的条件,探讨了用金属离子-蛋白质配合物消除毛细管区带电泳中管壁吸附作用的方法,并将之成功应用于人血清中药物成分的分离。试验证明,血清蛋白与多种金属离子能不同程度地形成配合物,除Mg2+外,所选金属离子与血清蛋白形成配合物的优先顺序为Zn2+>Cu2+>Cd2+>Co2+>Fe3+>Cr3+>Mn2+>Ca2+>Ni2+;配合物的稳定性取决于介质的pH、温度和金属离子的浓度,其适宜范围分别为pH=6～8,温度40～50℃,金属离子浓度10～30mg/L;金属离子与蛋白质的作用有效地解决了管壁吸附问题,铜和锌离子-蛋白质配合物既不影响药物成分的分离,也不降低毛细管...
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
徐毅励 陈媛梅 郑彩霞
为验证毛细管电泳方法，研究测定重瓣榆叶梅花朵生长过程中的ＤＮＡ酶、ＲＮＡ酶和细胞色素Ｃ含量及动态变化的有效性，以磷酸氢二钠溶液为提取液，超声提取重瓣榆叶梅花朵中的蛋白质作为待测液，考察缓冲溶液种类、浓度、ｐＨ、分离电压、分离温度及进样时间等因素对ＨｐＣＥ分离检测蛋白质的影响。确定了ＨｐＣＥ最佳测定条件为：运行缓冲液为ｐＨ为２．５、浓度为３０ｍｍｏｌ／ｌ的磷酸氢二钠溶液，０．５ｍｐＡ压力进样５ｓ，分离电压为８ｋＶ，电泳温度为２５℃，检测波长为２５４Ｎｍ。在最佳条件下，样品可在２０ｍｉＮ内完全分离，线性关系良好。该方法准确、快速、简便，可同时检测样品中的ＤＮＡ酶、ＲＮＡ酶和细胞色素Ｃ。
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
吕金辉 胡建军 卢孟柱
为构建柳树遗传图谱、进行分子育种等奠定基础,以柳树为材料,基于毛细管电泳技术体系建立并优化了AFLP分子标记技术,简化了AFLP分析流程。首先提取高质量的柳树基因组DNA,对基因组进行酶切与接头连接、预扩增和选择性扩增,最后通过毛细管电泳分析各因素的影响。基因组DNA提取采用改进的CTAB法,酶切模板DNA用量450ng,EcoRⅠ酶切2h,MseⅠ酶切2h,接头过夜连接,选择性扩增时dNTP浓度0.3mmol/L,Mg2+浓度1.5mmol/L,引物浓度0.125μmol/L,DNA聚合酶浓度0.025U/μL,预扩增产物最适稀释倍数20倍。经过重复实验,证明建立的AFLP-毛细管反应体系适...
关键词：
柳树 AFLP 毛细管电泳
[期刊] 林业科学研究
[作者]
刁姝 孙超 孙晓梅 张守攻
[目的]建立基于毛细管电泳的日本落叶松最佳MSAP反应体系,获得条带清晰,信号强度均一的DNA甲基化图谱,为今后开展日本落叶松表观遗传变异研究奠定基础。[方法]以日本落叶松未成熟木质部为试材,设置不同梯度的DNA模板用量以及选择扩增体系中引物浓度、Mg(2+)浓度、dNTP浓度和exTaq DNA聚合酶浓度,确定各组分不同用量对毛细管电泳效果的影响,从而确立最适的MSAP反应体系。[结果]结果表明模板DNA以及exTaq DNA聚合酶浓度对毛细管电泳结果影响不明显,而高的引物浓度会引起条带的减少。Mg(2
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
王午豪 齐芪 李赟 盖颖
杜仲作为一种传统的中药材,其药用成分主要为次级代谢产物绿原酸,是很多种中草药的重要活性成分,广泛存在于杜仲叶片和忍冬科植物的干燥花蕾或初开的花朵中。本研究提供了一种高效准确的从植物样本中检测绿原酸的方法。该方法使用萘乙酸作为内标物提高定量的精确性,减少系统误差,并通过毛细管电泳联用质谱定性提高检测的灵敏度。毛细管电泳联用质谱仪建立萘乙酸标准品与绿原酸标准品的标准曲线,其中萘乙酸与绿原酸的标准曲线相关性系数分别为0.999 4和0.999 1,均大于0.999 0,说明仪器方法及毛细管电泳参数与质谱参数可靠
[期刊] 华北农学报
[作者]
易红梅 王凤格 赵久然 王璐 郭景伦 原亚萍
以192份玉米品种为材料,用7对SSR引物对毛细管电泳荧光检测和常规的变性PAGE银染检测两种SSR标记检测方法进行比较分析。结果表明,两种方法检测的SSR标记片段大小一致。毛细管电泳荧光检测法检测的结果更为精确、灵敏、高效,更适用于高通量材料的检测分析。对少量材料进行检测分析以及SSR标记的筛选时,使用常规的变性PAGE银染检测法更经济适用。
关键词：
玉米 SSR 毛细管电泳 银染
[期刊] 中国农业大学学报
[作者]
童敬 饶钦雄 郭平 李海燕 丁双阳
建立了猪饲料中螺旋霉素、替米考星和泰乐菌素3种大环内酯类药物的HPCE检测方法。确定了该过程中缓冲溶液的pH、缓冲溶液类型及离子强度等电泳条件,同时对毛细管长度、内径及分离电压等仪器参数进行优化,得到分离的最优条件:在毛细管有效长度50 cm、内径75μm,分离电压25 kV,40 mmol/L磷酸氢二钠-20mmol/L柠檬酸(pH2.5)缓冲液条件下,3种药物在15 min内得到完全分离。3种药物在10~100μg/g范围内线性良好,R>0.9993;饲料中螺旋霉素检测限为3.0μg/g,替米考星检测限为5.0μg/g,泰乐菌素检测限为8.0μg/g,添加回收率在74.5%~87.4%,方...
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
伊爱芹 陈媛梅 郑彩霞
建立了加杨叶中芦丁含量测定的高效毛细管电泳方法。用甲醇溶解样品采用超声提取,研究了缓冲溶液浓度、pH值、电压、温度及进样时间等因素对分离检测的影响;确定了最佳的测定条件:50mmol/L硼酸盐缓冲溶液(pH值为9.3),压力进样时间为5s,温度为25℃,运行电压为20kV,检测波长为254nm。在此条件下,峰面积与芦丁浓度具有良好的线性关系,平均回收率达到98.58%,方法准确。同时,利用建立的方法研究了加杨叶生长过程中芦丁含量的变化。
关键词：
高效毛细管电泳 加杨叶 芦丁
[期刊] 西南农业学报
[作者]
黄盖群 刘刚 江生 危玲
研究表明,中药材白僵蚕具有较好的抗惊作用,其主要有效成分是草酸铵。采用毛细管电泳法测定中药材白僵蚕中草酸铵,发现不同的pH,反应时间,反应温度,缓冲液浓度对测定存在着不同程度的影响;初步确立了测定僵蚕体内草酸根离子的最佳条件。草酸根阴离子在5min时间能得以很好的分离,最佳测定条件是pH为8.0,铬酸钠缓冲液浓度为5mmol/L,从而探索出毛细管电泳法在测定中药材白僵蚕中草酸铵含量上的可行性。
关键词：
毛细管电泳 白僵蚕 抗惊活性 草酸铵
[期刊] 北京林业大学学报
[作者]
谢进 田晓明 刘淑欣 侯佳音 盖颖 蒋湘宁
本实验以毛白杨芽为实验材料,采用Tris-酚法、三氯乙酸-丙酮法和三氯乙酸-丙酮+Tris-酚法对其蛋白质提取方法进行比较,采用双向电泳分离蛋白质,通过PDQuest软件和质谱对这3种提取方法得到的双向电泳胶进行分析。结果显示,三氯乙酸-丙酮法得到的蛋白点数量为231±4,得到的鲜样中的总蛋白质含量为(3.57±0.618)mg/g,均高于其他两种提取方法,并且所得到的双向电泳胶更清晰,为毛白杨芽蛋白质提取的最适方法。
关键词：
毛白杨芽 蛋白质提取 双向电泳 质谱
[期刊] 西南农业学报
[作者]
刘昌文 丁志祥 程昌文
采用聚丙烯酰胺凝胶电泳法，研究了柑桔属４个种的６个品种，两个营养系芽变品系和１个杂交后代的成熟春梢的叶片酯酶同工酶酶谱和蛋白质电泳带型。根据酶谱及带型的异同，探讨其彼此的亲缘关系，鉴别芽变品系和杂种。结果表明，酯酶同工酶酶带清晰，种间酶带差异明显，种内不明显。蛋白质电泳带无拖尾现象，清晰而窄，种间和种内不同品种间谱带差异明显；芽变品系具有原品种所有带型，并出现新的谱带；种间杂种带型复杂，谱带条数多。不仅具有双亲所具有的谱带，又不完全表现为两亲本谱带的互补型，亲本所具有的个别谱带在子代中消失，而且出现了双亲所不具有的杂种谱带。柑桔叶片酯酶同工酶分析，可作为探测基因差异和遗传关系的一种手段，其酶谱...
[期刊] 中国农业科学
[作者]
兰海燕 李立会
随着世界各国经济贸易和农业科学技术的发展 ,特别是植物新品种保护法的实施 ,品种鉴定越来越引起人们的关注。大量证据显示 ,凝胶电泳技术在作物品种鉴定中起着举足轻重的作用。对各种凝胶电泳技术现状做了全面综述 ,包括电泳方法的发展过程、电泳方法间的比较、影响因素、应用范围、己取得的成就和未来的发展方向。随着我国植物新品种保护范围的不断扩大 ,电泳方法必将在作物品种鉴定中发挥更大的作用。
关键词：
蛋白质 凝胶电泳 作物品种鉴定 种子检验
[期刊] 华北农学报
[作者]
王璐 杜国强 师校欣
双向电泳技术是蛋白质组研究的核心技术之一,本文对其原理、发展概况、优缺点及其在园艺植物蛋白质组学研究中的应用做了介绍,并对其今后的发展做了展望。
关键词：
双向电泳 蛋白质组学 园艺植物
[期刊] 华北农学报
[作者]
董婧 逯晓萍 吕二锁 薛春雷 李俊伟
为了优化玉米叶片双向凝胶电泳技术条件，通过比较３种总蛋白提取方法对玉米双向电泳结果的影响，并对蛋白质上样量、ＩＥＦ等电聚焦条件及ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶浓度等参数进行探索、优化；结果发现，与酚提取法和磷酸缓冲液法相比，采用改进的ＴＣＡ／丙酮法提取总蛋白操作简单、方便，所得的２－ＤＥ图谱中蛋白质点数量多、背景清晰，是一种适用于提取玉米苗期叶片总蛋白的有效方法；同时筛选出：第一向ＩＥＦ等电聚焦样品上样量为８００μｇ，聚焦条件为２０ ０００ Ｖ／ｈ，在浓度为１２．５％的ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶中进行电泳，能够在１７ Ｃｍ的ＩＰｇ胶条上获得背景低、分辨率较高、重复性好的双向电泳图谱，该优化体系适用于玉米叶．．．
关键词：
玉米 叶片 蛋白质提取 双向电泳
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