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[期刊] 中国农业科学  [作者] 欧阳文文  李垚  赵伟  王明昊  金芳  
【目的】研究槲皮素对肉鸡脂肪细胞甘油三酯沉积过程中环腺苷酸(cyclic adenosine monophosphate,cAMP)信号通路的作用。【方法】将脂肪细胞随机分5组,每组6个重复;空白对照组为基础培养液,溶剂对照组为含2‰二甲基亚砜(DMSO)的培养液,试验组为含10、20和40 mg.L-1槲皮素的培养液,分别于24、48和72 h收集细胞及培养液;ELISA法测定乙酰CoA羧化酶(acetyl CoA carboxylase,ACC)、脂肪酸合成酶(fatty acidsynthase,FAS)、脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase,LPL)、cAMP、腺苷酸环化酶...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 于渤洋  吕文涛  巨婷婷  刘洋  姜美华  尹靖东  
【目的】以小鼠成肌细胞(C2C12)为模型探讨蛋氨酸代谢产物腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)对肌肉来源的多能干细胞成脂分化及脂肪沉积的影响。【方法】分别用含有0、0.25、1.0和2.0 mmol·L-1SAM的培养基处理细胞,在处理后的0、24、36和48 h分别对各处理组细胞进行油红O染色观察细胞形态并测定光密度(OD)值;在处理后第2天收集细胞总RNA与总蛋白,分别用RT-PCR和western blotting方法检测细胞成脂相关基因的mRNA与蛋白表达水平。【结果】经SAM处理后,细胞表现出脂肪细胞的形态特征;细胞内脂肪沉积水平上升,并且随SAM处理浓...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 孙理云  包鸿俊  
用灌注法自家兔获取运动正常的日本血吸虫,在含10%灭活胎牛血清的Earle氏缓冲盐溶液(含或不含药物)中37℃培养1h。显微镜下观察其运动性并测量虫长。用放免法测定37℃培养3h的日本血吸虫环腺苷酸(cAMP)的含量。结果表明:5-羟色胺(10-4mol/L)、色胺(10-4mol/L)、阿托品(10-4mol/L)、吡喹酮(10-7mol/L、10-6mol/L)和硝硫氰醚(10-4mol/L)兴奋日本血吸虫;赛庚啶(10-4mol/L)、乙酰胆碱(10-5mol/L、10-4mol/L)和槟榔碱(10-4mol/L)抑制日本血吸虫的运动性;色氨酸(10-4mol/L)对运动性影响不明显。上...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 徐妙  邬洋  杨燕  夏立秋  
【目的】利用全局性调控因子环腺苷酸受体蛋白(cyclic AMP receptor protein,Crp)基因在刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)中的过量表达,研究其对刺糖多孢菌生长及形态方面的影响,促进多杀菌素的生物合成。【方法】PCR扩增环腺苷酸受体蛋白基因(crp),通过限制性酶切、连接方法构建中间载体pOJ260-cm-PermE-crp,使crp置于红霉素增强型启动子PermE的控制下;PCR扩增PermE-crp基因片段,利用Red/ET同源重组技术将PermE-crp亚克隆至实验室保藏的大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pUC-spn上,构建成Crp表达载体...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胡丹  郝燕青  陈渠  邬晓婷  倪迎冬  
[目的] 本试验旨在探究饲料中添加胆汁酸(Bile acids, BAs)对皮质酮(Corticosterone, CORT)诱导的肉鸡脂肪肝综合征的缓解作用。[方法] 试验选取了120只 1日龄雄性AA肉鸡,随机分为两组,分别饲喂基础日粮和含BAs日粮。BAs添加分为前期,中期,后期三个阶段,剂量依次递增。28日龄时,从基础日粮组中选取肉鸡20只,随机分为对照组(Control, CON),皮质酮处理组(Corticosterone, CORT);从胆汁添加组中随机选取10只设为皮质酮加胆汁酸组(CORT+BAs)。CON组颈部皮下注射酒精PBS溶液(15%酒精),CORT和CORT+BAs组注射4 mg/kg皮质酮,连续注射7天。于第40日龄屠宰采样,记录器官与组织重量,采集血清和肝脏组织以测定生化指标、脂代谢相关基因和蛋白表达水平。[结果] 饲料中添加BAs可显著缓解由CORT处理引起的腹脂率的升高及腿肌重的降低 (P < 0.05)。生化分析结果表明,CORT处理显著降低了40日龄肉鸡血清中高密度脂蛋白(HDLC)水平、增加血液游离脂肪酸(NEFA)水平,而BAs处理显著升高血清HDLC水平(P < 0.05)。与对照组相比,CORT处理组肉鸡肝脏内甘油三酯(TG)水平显著升高 (P < 0.01),肝细胞内脂滴显著富集且出现空泡化现象,而BAs处理可显著缓解肝脏内的TG沉积(P < 0.01)。CORT处理显著上调肝脏脂中硬脂酰辅酶A去饱和酶(Scd1)和乙酰辅酶A羧化酶(Acc)的表达水平(P < 0.05),并显著上调ACC和脂肪酸合成酶(FASN)的蛋白表达水平(P < 0.05),但下调过氧化物增殖激活受体(PPARα)的蛋白表达水平(P < 0.05);BAs处理可显著逆转皮质酮引起的以上基因和蛋白表达变化,并显著增加肉毒碱棕榈酰基转移酶1A(Cpt1a)的基因表达水平并显著降低脂肪酸转位酶(CD36)的蛋白表达水平(P < 0.05)。[结论] 日粮中添加胆汁酸可通过减少肝脏内TG合成、促进其分解、抑制肝细胞对脂肪酸的摄取,从而缓解注射皮质酮诱导的肉鸡脂肪肝综合征。
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 胡忠泽  金光明  刘海  朱辉  
在AA肉鸡饮水中分别加入0、20和40 mg.kg-1的茶多酚,研究其对肉鸡脂肪代谢的影响及作用机制。结果表明,茶多酚显著地降低了肉鸡腹脂率、肝脂率和肌间脂肪宽度(P<0.05),显著降低了血清中甘油三酯浓度、胆固醇含量和血浆中极低密度脂蛋白水平(P<0.05),提高了血清中游离脂肪酸浓度(P<0.05);茶多酚使血清中脂肪酶活性、胰高血糖素水平以及腹脂中激素敏感脂酶活性提高(P<0.05),肝脏中苹果酸脱氢酶活性降低(P<0.05)。这提示茶多酚可能通过改变肉鸡体内脂肪代谢相关酶的活性和激素水平,对脂肪代谢起调控作用。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 范彩云  张运海  王菊花  王尚  朱飞  赵男  程建波  
为探讨HH信号通路在脂肪细胞分化过程中的作用机制,以猪脂肪间充质干细胞(ADSCS)为材料,应用油红O染色法检测ADSCS成脂分化过程中的形态变化;采用荧光定量PCR及WeSteRn BlOt的方法检测HH通路Gli1及脂肪细胞分化转录因子的时序表达。通过嘌呤衍生物2,6,9-三元取代嘌呤(PuRmORPHAmine,Pm)激活猪ADSCS细胞中HH信号通路,探讨体外激活HH信号通路对猪ADSCS向脂肪细胞分化的作用及其机制。结果显示,在成脂诱导分化的过程中,经5μmOl/ml的Pm持续处理,细胞中Gli1的mRnA及蛋白表达量增加;猪ADSCS向脂肪细胞分化的数目减少、细胞内甘油三酯含量降低...
[期刊] 华北农学报  [作者] 赵国芬  敖长金  赵志恭  张鑫  尹睿  赵春艳  张宇宏  
文章旨在研究沙葱和油籽对羊肉中肌苷酸和腺苷酸含量的影响,为沙葱和油籽用于羊肉品质的改善提供科学依据。试验选用28只蒙古羯羊,采用完全区组试验设计,试验组分别为精料中添加4%沙葱、3种油籽(8%胡麻+2%向日葵籽+2%线麻籽)及沙葱+油籽(4%沙葱+8%胡麻+2%向日葵籽+2%线麻籽),对照组饲喂基础日粮。结果表明,添加沙葱+油籽组可显著提高背最长肌IMP的含量(P0.05);添加4%沙葱组和沙葱+油籽组显著提高臀中肌IMP的含量(P0.05)。添加3种油籽组...
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 李晨萱  李品  郭时惠  赵茹茜  马文强  
[目的]研究添加不同类型油脂的饲粮对黄羽肉鸡生产性能、肉品质及肌肉脂肪酸组成的影响。[方法]选取432羽1日龄快大型黄羽肉鸡(青脚麻鸡),雌雄各半,根据体重相近原则随机分为4个组,每组6个重复,每个重复18羽,分别为对照组组(Control group,采用大豆油)、棕榈油组(Palm oil group)、棉籽油组(Cottonseed oil group)和猪油组(Lard group)。试验周期为52天,分为3个饲养阶段,分别为1-20日龄、21-40日龄、41-52日龄,其中第一阶段油脂添加量为1.8%;第二阶段油脂添加量为3.2%;第三阶段油脂添加量为4.2%。记录试验起始(1日龄)、20日龄、40日龄及试验结束(52日龄)时肉鸡体重,每周各笼肉鸡饲料消耗量;检测肉品质和脂肪酸组成相关指标。[结果]与对照组相比,在生产性能方面,棕榈油或棉籽油添加在饲养前期(1-40日龄),对黄羽肉鸡生产性能无显著影响(P>0.05);在饲养后期(41-52日龄),显著降低了采食量(P<0.05)和肉鸡重(P<0.01)。在肉品质方面,棉籽油添加显著升高了肌肉45 min pH值(P<0.05)。在脂肪酸组成方面,棕榈油、棉籽油、猪油添加显著降低了黄羽肉鸡胸肌多不饱和脂肪酸(PUFA)含量(P<0.01),显著增加了腿肌饱和脂肪酸(SFA)含量(P<0.01)。[结论]不同油脂添加(大豆油、棕榈油、棉籽油或猪油)对黄羽肉鸡前期(1-40日龄)生产性能和肉品质无明显影响,但可显著影响黄羽肉鸡胸肌和腿肌脂肪酸组成。
[期刊] 华北农学报  [作者] 闫文龙  朱晓彤  王荣梅  C.d'André Hirwa  杨关福  张细权  
在培养基中添加葡萄糖和甲状腺素(T3),观察鸡前脂肪细胞的生长及分化后的增殖情况及检测THRSPα基因在不同时间段的表达情况。结果表明,葡萄糖和甲状腺素(T3)的使用没有显著促进脂肪细胞数量的增长,各试验组在前3 d细胞数量保持一定幅度的增长,但低于对照组,第4天数量降幅很大,除200 nmol/L T3外其他3组在第5天稍有回升,组间差异不显著(P>0.05)。添加50 nmol/L T3和200 nmol/L T3的2个试验组THRSPα基因相对表达量在第2天有较大幅度的增加且差异极显著(P
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王明发  王浩宇  王浩  袁林  
[目的]研究固始鸡和AA肉鸡肝脏中脂肪酸合成酶(FAS)基因表达及肌肉脂肪酸的差异,为调控不同生长速度肉鸡脂肪代谢和日粮配制提供依据。[方法]取不同周龄固始鸡和AA肉鸡肝脏组织,用Trizol试剂提取肝脏总RNA,反转录后用RT-qPCR测定FAS mRNA表达水平;按照鸡FAS ELISA试剂盒说明处理肝脏样本,通过酶标仪测定吸光值,计算FAS活性;利用索氏抽提法测定胸肌和腿肌中肌内脂肪(IMF)含量;采用《食品安全国家标准食品中脂肪酸的测定:GB 5009.168—2016》第三法测定胸肌和腿肌中脂肪酸组成。[结果]AA肉鸡肝脏中FAS mRNA表达水平显著高于固始鸡,品种与周龄互作对表达水平有显著影响,0、3和5周龄时,AA肉鸡肝脏中FAS mRNA表达水平显著高于固始鸡,而4和6周龄时两品种间没有显著差异,品种间的差异主要表现在生长前期。4周龄时AA肉鸡胸肌和腿肌中IMF含量显著高于固始鸡,6周龄时品种间没有显著差异;AA肉鸡胸肌和腿肌中IMF含量显著高于固始鸡,但这种差异主要体现在4周龄,6周龄时品种间差异不显著;与4周龄相比,6周龄AA肉鸡胸肌和腿肌中IMF含量显著降低,固始鸡胸肌中含量显著降低,而腿肌中含量没有显著变化。AA肉鸡、固始鸡胸肌和腿肌中脂肪酸总含量没有显著差异;脂肪酸组成品种间呈现显著差异,固始鸡胸肌和腿肌中多不饱和脂肪酸含量显著高于AA肉鸡,特别是影响肉质风味的花生四烯酸含量;随着周龄增加,AA肉鸡胸肌和腿肌中多不饱和脂肪酸含量没有显著变化,固始鸡则显著降低,AA肉鸡花生四烯酸含量没有显著变化,固始鸡则显著增加。[结论]品种间FAS mRNA表达水平及FAS活性的差异可能是造成肉鸡前期IMF含量显著不同的原因之一;脂肪酸含量可能是影响固始鸡鸡肉风味的重要因素。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 申珅  李贞杨  赵玉兰  李盼  韩建民  郝志敏  董金皋  
【目的】获得玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)环腺苷酸磷酸二酯酶(c AMP phosphodiesterase,PDE)基因,并分析其在病菌侵染结构发育过程及侵染寄主早期阶段中的表达,为深入探索c AMP信号途径调控病菌致病性的作用机制打下基础。【方法】根据酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、白色念珠菌(Candida albicans)、灰霉病菌(Botrytis cinerea)、稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)、绿僵菌(Metarhi
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 王曼  陈娟  孔一力  马海田  邹思湘  
300羽1日龄雄性AA肉鸡随机分为4组,每组3个重复,每个重复25羽。分别于基础日粮中添加质量分数为1%、5%和10%丙酮酸肌酸(CrPyr),以不添加CrPyr为对照,饲喂至42日龄时各组每个重复分别随机宰杀4只,采集血样、肝脏、腹脂、左侧胸肌和腿肌,测定血清葡萄糖(BG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、肌酸激酶(CK)、尿酸(UA)、三碘甲腺原氨酸(T3)、甲状腺素(T4)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、胰高血糖素、胰岛素和瘦素含量,以及肌肉核酸和蛋白质含量。结果表明:与对照组相比,CrPyr...
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 袁继红  龙欢  雷霆  陈小冬  杨在清  
用不同种类、不同浓度游离脂肪酸(FFA)处理体外培养的成熟3T3-L1脂肪细胞,实时荧光定量PCR和Western-blotting分析FFA处理前后脂联素基因mRNA和蛋白质水平的表达差异。结果表明:各类脂肪酸对脂联素mRNA的表达均具有下调作用,且抑制效应呈时间、剂量依赖性;并且各种脂肪酸显著地影响脂联素蛋白的分泌作用。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 谭文彪  李寿希  
采用套算法通过代谢试验测定肉鸡对蚯蚓脂肪的利用率,比较肉鸡对蚯蚓脂肪和基础饲料脂肪利用率的差异是否显著,探究蚯蚓脂肪是否也像其他饲料脂肪那样被肉鸡有效地利用。试验按蚯蚓脂肪的添加量分为两个阶段,第一阶段添加10%,第二阶段添加20%。结果显示肉鸡对蚯蚓脂肪的平均表观利用率第一阶段为72.89%,第二阶段为77.50%,而肉鸡对基础饲料脂肪的平均表观利用率第一阶段为72.43%,第二阶段为76.89%,肉鸡对蚯蚓脂肪和基础饲料脂肪在2个阶段的利用率差异均不显著。试验结果还显示肉鸡对试验饲粮总能的平均利用率第一阶段为85.65%,第二阶段为86.89%,而肉鸡对基础饲料总能的平均利用率第一阶段为8...
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