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[期刊] 浙江农林大学学报  [作者] 王改萍  徐涛  樊莉丽  彭方仁  吕昕  陈琳月  
为了进一步研究楸树Catalpa bungei自交不亲和特性,以楸树不同产地植株云台山楸树(Cb~(-1)),老山楸树(Cb-2)和滇楸Catalpa fargesi f.duClouxii(Cf)的花粉为对象,利用普通研磨法及超声波破碎法,研究了适合于花粉壁蛋白质提取的方法。同时采用考马斯亮蓝染色法及聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)比较了不同树种花粉蛋白质质量分数及其主要蛋白质组分。结果表明:超声波破碎法适于花粉壁蛋白质的提取,最佳超声参数为功率400 W,超声时间3 s·次~(-1),间歇时间6 s·次~(-1),3个回合,工作120次,相隔5 min·回合~(-1)。蛋白质提取液三...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 王水莲  薛立群  刘进辉  袁安文  许道军  
为探明胚泡附植的分子机制,运用双向电泳技术分析了兔子宫内膜蛋白和子宫冲洗液蛋白.结果表明,在给定的时期内,子宫内膜蛋白质有差异,差异点共有11个;子宫冲洗液中蛋白质也有很大的差异,但在短时间内,存在有相对分子质量和等电点相同的蛋白质点,子宫冲洗液蛋白以分泌蛋白为主.
[期刊] 水产学报  [作者] 陈乃松  肖温温  梁勤朗  周恒永  马秀丽  赵明  
为探讨大口黑鲈饲料中不同脂肪与蛋白质含量比对其生长、体组成和非特异性免疫的影响,实验设计了8种(D1~D8)不同脂肪与蛋白质含量比的总能递增饲料。D1~D8饲料的脂肪水平递增(9.0%~26.5%),而蛋白质水平递减(52.0%~31.0%)。用上述饲料饲养体质量为(10.06±0.02)g的大口黑鲈88 d,每饲料设3重复,每重复30尾鱼。结果显示,特定生长率、饲料效率、蛋白质消化率、脂肪消化率和脂肪沉积率均以D2组最高,但随饲料中脂肪与蛋白质含量比的进一步升高呈现显著下降趋势。D3~D5组的蛋白质效率显著高于D1和D8组。D2、D3组与D4组间的蛋白质沉积率差异不显著,但显著高于其他各组。...
[期刊] 沈阳农业大学学报  [作者] 孟祥南  张迪  范海延  于洋  崔娜  宋铁峰  
以黄瓜幼苗的叶片为材料,分别采用酚提取法、盐提法、尿素提取法和真空渗透提取法分离细胞壁蛋白,比较不同提取方法的提取效果,以期为黄瓜细胞壁蛋白质组学研究的开展奠定基础。结果表明:盐提法的蛋白产率最高,尿素提取法次之,真空渗透提取法和酚提取法的蛋白产率较低;采用六磷酸葡萄糖脱氢酶活性测定法检测细胞质蛋白的污染率,其中,真空渗透提取法获得的细胞壁蛋白污染率最低(1.07%),其次为盐提法(2.17%),而酚提法和尿素提取法的污染率分别高达25.90%和2.60%;SDSPAGE电泳分析表明盐提法的蛋白条带清晰,且细胞质中高丰度蛋白Rubisco的条带不明显。
[期刊] 水产学报  [作者] 柳阳  李勇  周邦维  高婷婷  王晓晨  王顺奎  
为探讨脂肪和蛋白质水平对工业化养殖大西洋鲑相关消化酶活力、免疫及对水质指标的影响,采用3×2双因素试验设计(3脂肪水平:18%、21%、24%,即F18、F21、F24;2蛋白质水平:38%、48%,即P38、P48),形成6种实验处理的膨化配合颗粒料,每处理3重复,在工业化封闭循环海水养殖(RAS)条件下,选用初重(650.0±45.50)g大西洋鲑720尾进行56 d的养殖实验。结果显示:(1)F21可显著提高大西洋鲑胃、肠、肝脂肪酶活力,比低脂肪分别提高11.52%、14.63%、4.31%;P48使肠、肝胰蛋白酶活力分别提高8.23%、8.33%,且发现其活力水平远高于胃蛋白酶。(2)...
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 文李  陈颖  刘佳  陶钧  
对红莲型细胞质雄性不育水稻小孢子发育二核期花药总蛋白质进行双向电泳分离,通过考马斯亮蓝染色,获得分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定12个蛋白质点,液相色谱质谱/质谱联用技术鉴定另外7个蛋白质点,这些蛋白质分别参与糖类物质的合成及代谢(5个点)、蛋白质生物合成及代谢(3个点)、转录(2个点)、次生代谢产物合成(2个点)、信号转导(1个点)、细胞疾病和死亡(1个点)及未知功能蛋白(5个点)。除1个蛋白酶亚基(点9)仅在不育系中表达外,其他18个蛋白质点在不育系中缺失或表达量降低,因而花粉发育过程中糖类及蛋白质的正常积累受到影响,与花粉不能正常发育密切相关。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘怀华  王莉雯  刘楠  刘旭  马侠  宁丽华  张华  崔德周  姜川  陈化榜  
【目的】分离授粉早期玉米花丝的总蛋白质,为从蛋白质组角度揭示玉米花粉与花丝早期的相互作用奠定基础。【方法】以玉米(ZeamaysL.)自交系Ga25为试材,采用三氯乙酸-丙酮法提取总蛋白质,运用双向电泳、质谱分析与检索技术,比较自交授粉后1h和2h的花丝蛋白质组的差异。【结果】与授粉1h的蛋白质组相比,在授粉2h后的蛋白质组中出现28个差异蛋白点,其中,6个蛋白质点特异表达,19个蛋白质点上调表达,3个蛋白质点下调表达;通过MALDI-TOF-MS质谱测序和MASCOT序列分析,注释了23个蛋白质点,其余5个为未知蛋白;功能分类表明,差异蛋白质分别参与细胞壁合成(21.4%)、防御/抗胁迫(1...
[期刊] 华北农学报  [作者] 王鹏  王军节  李贞彪  
为了优化一种适用于粉红单端孢菌双向电泳的蛋白质提取方法,以期为蛋白质组学水平研究粉红单端孢菌的致病机制奠定基础。以分离纯化后的粉红单端孢菌为试验材料,分别采用超声-TCA-丙酮、超声-磷酸-TCA-丙酮、超声-SDS、超声-TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提和TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提等5种方法提取菌体蛋白质,通过对比分析蛋白质含量以及纯度筛选出2种较好的提取方法。在筛选聚丙烯酰胺电泳凝胶浓度的基础上,再通过双向电泳对比分析,得出最佳的蛋白质提取方法。结果表明,12%的聚丙烯酰胺凝胶浓度获得的单向电泳图谱背景清晰且无严重的拖尾现象,超声-TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提法获得蛋白样品的质量浓度和含量分别为6.650 mg/mL和2.993 mg/g,该法提取蛋白通过SDS-PAGE分析条带清晰,双向电泳分析可获得1 238个独立清晰的蛋白点。由此可知,超声-TCA/丙酮-酚/SDS联合抽提法获得的粉红单端孢菌体蛋白适合于双向电泳分析及蛋白质组学研究。
[期刊] 西南农业学报  [作者] 黄新球  杨有仙  卢焕仙  杨爽  梁铖  卢丽芬  王艳辉  
【目的】蜂花粉是蜜蜂矿物质和蛋白质营养的主要来源,分析研究云南省产量较大的5种蜂花粉的矿质元素、蛋白质,氨基酸等营养成分,为养蜂生产及蜂花粉的利用提供理论指导。【方法】检测分析了蜂花粉中12种矿质元素含量、蛋白质含量及氨基酸组成,并采用国际通用的营养评价方法对5种蜂花粉的蛋白质营养进行了综合评价。【结果】5种蜂花粉矿质元素总量为1.09%~2.73%,总蛋白含量为15.96~30.16 mg/g,总蛋白质含量与矿物质总量成正相关;含硫氨基酸(蛋氨酸+半胱氨酸)为5种蜂花粉的第一限制性氨基酸;5种蜂花粉中优质蛋白营养含量高低顺序为茶花蜂花粉、蚕豆蜂花粉、油菜蜂花粉、野玫瑰蜂花粉、鬼针草蜂花粉。【结论】5种云南主产蜂花粉的矿质元素、蛋白质等营养含量存在非常大差异,养蜂生产需要根据外界蜂花粉的营养差异作出相应调整;茶花蜂花粉、蚕豆蜂花粉、油菜蜂花粉可作为蜜蜂和人类矿物质及蛋白质营养来源的优质原料。
[期刊] 华北农学报  [作者] 滕云龙  李春敏  赵永波  曾广娟  陈东玫  董文轩  张新忠  
利用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术(SDS-PAGE)分析了5株苹果杂种实生树(红玉×金冠)韧皮部中蛋白质含量随节位升高的动态变化。结果表明,随节位升高蛋白质带发生变化,共发现3条阶段转变特异蛋白质带,分子量估算值分别为17.0,21.0,55.0 kDa。其中55.0 kDa蛋白质表现为定性变化,从46节出现,之后含量保持稳定,到125节后突然消失。21.0 kDa蛋白质111~125节以上含量突然降低;17.0 kDa蛋白质在在实生树低节位含量低,在51~65节以上含量突然增加并保持稳定,到106~120节含量突然下降。
[期刊] 中国农业大学学报  [作者] 于静娟  徐南方  孟繁静  
[期刊] 南京农业大学学报  [作者] 方从兵  盛炳成  章镇  
[期刊] 渔业科学进展  [作者] 许团辉  高湘萍  梁萌青  王新星  郑珂珂  常青  吴立新  
以初始平均体重为38.80±0.11g的牙鲆Paralichthys olivaceus为实验对象,研究在高植物蛋白饲料中用低分子水解蛋白替代鱼粉对牙鲆生长、饲料利用及非特异性免疫指标的影响。分别以不同水解鱼蛋白替代总蛋白的0(FM1为负对照,含豆粕55%、鱼粉19%)、0(FM2为正对照,含豆粕45%、鱼粉25%)、11%(FPH11)、16%(FPH16)、21%(FPH21)、26%(FPH26)制得7组等氮等能饲料。实验结果表明,用低分子水解鱼蛋白替代总蛋白11%组的特定生长率显著高于负对照组(P0.05);FPH11、FPH16、FPH21...
[期刊] 华北农学报  [作者] 曾广娟  李春敏  张新忠  陈东玫  赵永波  董文轩  
为探索苹果叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,比较了三氯乙酸(TCA)/丙酮沉淀法、改良的Tris-HCl法、酚-甲醇/醋酸铵沉淀法、二硫苏糖醇(DTT)/丙酮法及Tris-HCl法等5种蛋白质的提取方法。制备的样品经SDS-PAGE分离采用银染显色。结果表明,改良的Tris-HCl法在加大PVPP用量和蛋白质提取缓冲液的基础上,将丙酮沉淀蛋白质的时间由30 min增加到1 h,使蛋白质的得率最高为3.243μg/μL,上样量5μL得到的蛋白质条带数量最多,条带最清晰为41条。利用这一改良方法对苹果实生树不同节位蛋白质的动态变化进行了研究,共发现6条蛋白...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 刘品华  谢景文  康照金  冯亚娟  汪帆  
【目的】去除鼠曲草粗多糖中蛋白质的最优方法,是研发的基础。【方法】以蛋白质清除率和粗多糖损失率为指标,进行综合评价。采用碱性法、酸性法、醋酸铅法、三氯乙酸法、Sevag法、酶法,研究了去除蛋白质的效果。【结果】醋酸铅法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-三氯乙酸法去除蛋白质的效果较好,其蛋白质清除率分别为97.55%、81.97%、100.00%,粗多糖损失率分别为12.17%、5.89%、52.71%。【结论】由综合指标评价可知,其效果依次为醋酸铅法、三氯乙酸法、木瓜蛋白酶-三氯乙酸法。
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