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[期刊] 西南农业学报  [作者] 陈德西  何忠全  李仕贵  向运佳  
本文对不同浓度的PSK-α在水稻成熟胚的愈伤诱导、愈伤继代和分化过程中效应进行了研究。结果表明,在成熟胚诱导效率方面,N6和NB培养基优于MS和CC培养基;在同一培养基上,不同浓度的PSK-α对成熟胚的诱导效率不同;同一浓度的PSK-α对不同品种的成熟胚诱导效应不同。明恢63在50 pmol/L PSK-α的MS培养基上、CDR22在300 pmol/L PSK-α的N6培养基上、蜀恢527在100 pmol/L PSK-α的NB培养基上、地谷在100 pmol/L PSK的N6培养基上成熟胚诱导效率较好,分别达到24%、79.0%、85.4%和67.9%。PSK-α对愈伤的继代没有促进作用,...
[期刊] 西南农业学报  [作者] 陈德西  李仕贵  向运佳  章振羽  彭云良  
本文对4份难诱导型水稻材料花药进行PSK-α低温预处理和诱导培养基中添加不同浓度的PSK-α试验。结果发现,10pmol/L PSK预处理能提高花药出愈率,100 pmol/L PSK的效果更明显,最高提高达5.67%,且NBA培养基诱导效率优于NB2培养基;诱导培养基中添加PSK以及PSK预处理和诱导培养基中添加PSK相结合对提高愈伤诱导率的效果不及PSK预处理;经PSK处理后的愈伤组织分化出的苗较对照长势粗壮,田间长势也较好,没有观察到变异。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 彭丽桃  李琼  刘合生  陈佩  丰明乾  潘思轶  
植物硫化激动素(phytosulfokine-α,PSK-α)是植物体内一种小分子肽类生长调节因子,具有促进细胞增殖等多种生物活性。但由于其在植物体内的含量极低,难以满足PSK-α研究和应用的需要。笔者在前期构建PSK-α原核型表达载体的基础上,研究了影响融合蛋白表达的因素,优化了培养条件,并运用谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)亲和柱层析对融合蛋白进行了分离纯化。通过单因素和正交试验的结果表明:培养温度、诱导剂浓度、诱导剂加入时机和诱导时间均对融合蛋白的表达量和表达形式有很大影响;在诱导温度20℃,扩大培养150 min(菌液培养至OD600值约...
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 刘青林  陈俊愉  
该文研究了花粉蒙导、植物激素和胚培养对梅花种间杂交的作用.结果表明,花粉蒙导是克服梅花与其它李属植物种间杂交不亲和性的有效方法.在花期和幼果阶段用GA144.35μmol连续处理,可将杂交结实率从1.4%提高到2.8%.通过MS附加IAA、6-BA或KT培养基的胚培养,建立了几个杂种无性系.再生植株在田间生长良好,尚需进一步鉴定
[期刊] 中国农业科学  [作者] 阎丽娜  李霞  吴丹  
【目的】研制适应性广的不同类型水稻成熟胚再生技术。【方法】采用生产上应用价值高的不同类型水稻品种成熟胚为外植体材料,比较研究9个粳稻、9个籼稻和11个新近培育的超级杂交稻(两系或三系)或优势组合在不同培养基中的出愈、分化和再生等组织培养力表现。【结果】以M8为基本培养基,在添加30g·L-1蔗糖、8g·L-1琼脂和2mg·L-12,4-D(2,4-苯氧乙酸)相同成分的基础上,供试粳稻材料单独添加较低浓度的细胞分裂素,即0.3mg·L-16-BA(6-苄基嘌呤)可获得较高的出愈率,出愈率在89.2%-61.7%之间;而供试籼稻材料则需在添加2mg·L-16-BA和0.5mg·L-1KT(激动素)...
[期刊] 华北农学报  [作者] 张存金  马筠  阎凤英  王洪隆  
在石刁柏花药培养过程中,2,4-D在引起愈伤组织细胞染色体倍性变异方面起主导作用,高浓度的2,4-D虽然能提高愈伤组织中单倍体细胞的频率,但同时又加剧其多倍化。不同激素配比的分化培养基在诱使再生植株染色体倍性变异方面存在着明显差异。在附加1.0ppmBA和0.2ppmIBA的培养基上,再生植株茎尖单倍体细胞频率最高,达31.17%。比较愈伤组织和再生植株的染色体倍性变异幅度,发现后者明显地大于前者。
[期刊] 华北农学报  [作者] 金迪  杨宇  徐海  马慧  陈丽静  钟鸣  徐正进  李浩戈  
以常规籼系明恢86、七山占、中优早8的成熟胚为外植体,通过根癌农杆菌介导法,建立了一种光照培养条件下的新型籼稻成熟胚高效再生和转化体系。结果表明,籼稻在MS+4%麦芽糖+2 mg/L 2,4-D+0.5 mg/L KT+1 mg/L IAA+0.5 mg/L 6-BA+2.878 g/L L-脯氨酸+1 g/L水解酪蛋白,于32℃持续光照10 d左右,可获得愈伤组织的平均诱导率约为84.9%;愈伤组织在MS+2 mg/L KT+1 mg/L IAA+2 mg/L 6-BA+1 g/L水解酪蛋白的培养基上再生率达到80.4%。建立在上述再生体系基础上的GUS基因的瞬时表达率为55.8%。
[期刊] 湖南农业大学学报(自然科学版)  [作者] 徐庆国  殷绪明  李海林  
籼稻成熟胚培养由于取材容易,因此在转基因研究中具有广泛的应用前景.但籼稻成熟胚愈伤组织诱导率不高,继代易褐化,分化率不高,严重阻碍着基因工程技术在水稻育种中的应用.本研究选用了27不同类型的籼稻品种和常规粳稻品种作为实验材料,在同一培养方式下,分析了不同籼稻品种成熟胚愈伤组织诱导率和分化率之间的差异及籼稻品种与粳稻品种成熟胚愈伤组织诱导率与分化率之间的差异,为目前应用细胞工程和基因工程技术来改良籼稻品种提供理论依据.获得了如下主要研究结果:水稻基因型是影响籼稻成熟胚组织培养力高低的关键因素;籼型杂交水稻不育系和保持系比常规籼稻品种、杂交水稻F1种子和恢复系品种成熟胚的培养力低;杂交水稻F1种子...
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘清  朱允华  吴顺  沈革志  萧浪涛  
【目的】通过对遗传转化过程中水稻愈伤组织本身的3种内源激素含量变化动态研究,探讨水稻愈伤组织生长发育过程中内源激素变化规律和激素间的相互关系,旨在为水稻遗传转化体系中合理使用植物生长物质提供参考依据。【方法】以广粳1号、特青、V20B为遗传转化供试材料,采用高效液相色谱法(HPLC)测定了遗传转化过程中4个主要时期愈伤组织中的内源脱落酸(ABA)、生长素(IAA)和玉米素核苷(Z)的含量。【结果】IAA主要存在于种胚诱导出的愈伤组织上及芽中,且过高的IAA含量不利于愈伤组织的诱导和生长;Z主要存在于种胚中,对愈伤组织诱导的启动有决定性作用,如果外植体中的Z含量太低,即使有较高的IAA含量也不能...
[期刊] 西北农林科技大学学报(自然科学版)  [作者] 张素勤  邹志荣  耿广东  吴正景  
 为了完善非洲菊组培快繁体系和推动非洲菊种苗工厂化生产,本试验以非洲菊叶片为外植体,对影响非洲菊愈伤组织诱导的基本培养基、激素种类及其浓度等关键因素进行了研究。结果表明,基本培养基以MS诱导愈伤组织效果最好,诱导率可达78.3%;2,4-D比NAA和IBA能够较快地诱导叶片产生愈伤组织,其中以1.0mg/L2,4-D诱导率最高,可达100%,且形成愈伤组织多;6-BA诱导愈伤组织的效果优于KT和TDZ,2.0mg/L6-BA的诱导率为89.7%;叶片在6-BA2.5mg/L+2,4-D0.5mg/L+NAA0.4mg/L培养基上愈伤组织诱导率最高,诱导出的愈伤组织生长快,并可分化出不定芽。
[期刊] 华中农业大学学报  [作者] 臧新  吕晓辉  杨冬之  黄象男  
研究了不同浓度的6-BA、GA3、和BR 3种激素对红豆杉离体胚培养的影响,并建立了2种红豆杉的离体胚培养和植株再生系统。结果表明,6-BA对2种红豆杉种胚的萌发促进作用最大,BR次之,GA3最小。南方红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.5 mg/L 6-BA+1.7×103ng/L BR+2 mg/L GA3。短叶红豆杉种胚萌发的最佳激素组合为1.0 mg/L 6-BA+1.7×103ng/L BR+4 mg/L GA3。
[期刊] 中国农业科学  [作者] 刘清  童建华  史齐  彭克勤  王若仲  蔺万煌  Mohammed Humayun Kabir  沈革志  萧浪涛  
【目的】比较水稻矮秆多分蘖突变体与野生型材料间的植物激素含量差异,并分析不同生长调节剂处理对其株高、分蘖的影响,探析植物激素在突变体形态发育过程中的生理功能。【方法】以T-DNA插入引起的矮秆多分蘖突变体(CA648)及对照中花11(ZH11)为供试材料,采用高效液相色谱法(HPLC)分析三叶期、五叶期、分蘖盛期、拔节孕穗期的根、假茎(或茎)、叶中的赤霉素(GA1,GA4)、生长素(IAA)、玉米素(Z)和脱落酸(ABA)的含量,进行CA648与ZH11在不同生长发育时期的不同器官中的植物激素含量差异比较分析;利用液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS/MS)测定拔节孕穗期根、基部、茎秆及叶...
[期刊] 农业现代化研究  [作者] 胡潇婕  毛东海  
水稻对低温敏感,幼苗时期的低温胁迫会影响水稻的生长,甚至致死,从而导致减产。植物激素在植物低温胁迫响应过程中发挥着重要作用。在本研究中,我们以籼稻品种特青和粳稻品种02428为试验材料,在不同低温处理时间下(10℃处理0、3或24 h),运用RNA-Seq技术开展水稻苗期低温应答转录组分析。结果表明:粳稻02428的耐低温性显著强于籼稻特青,低温处理后,在两个品种中均检测到大量差异表达基因。在差异表达基因的KEGG通路分析中,植物激素信号通路是低温胁迫下差异表达基因最显著富集的通路,说明植物激素通路在水稻苗期耐低温中具有重要作用。我们通过对生长素、细胞分裂素等8种激素信号途径中差异表达基因的数量及其表达量进行分析,解析了各激素信号通路中的关键基因在低温胁迫下表达量的变化趋势,最终发现在水稻苗期耐低温中可能起正调控作用的激素是乙烯、脱落酸和茉莉酸,负调控耐低温的是细胞分裂素和赤霉素。本研究为深入了解植物激素参与水稻苗期耐低温调控的机制提供了方向与依据。
[期刊] 华北农学报  [作者] 宋英凯  张天星  崔国惠  王立新  
研究了向日葵未成熟胚培养中不定芽的发生情况,结果表明,向日葵子叶(?)未成熟胚再生不定芽的能力很强,下胚轴较子叶容易产生不定芽;基因型和培养基是影响不定芽再生频率的重要因子.基因型不同,其不定芽的再生频率差异很大.本实验中大多数基因型都能诱导出不定芽.再生频率在40%以上.最高的达91%.自交系、杂一代和保持系的再生频率高于普通品种.培养基中高含量蔗糖及适宜的6—BA含量有利于不定芽的发生.由不定芽培育出的绿苗在温室条件下,大部分可以正常开花结实.
[期刊] 北京林业大学学报  [作者] 邓文红  赵欣蕊  张俊琦  郭惠红  
【目的】植物激素在植物生长发育和响应生物和非生物胁迫过程中起着非常重要的作用,研究植物激素的合成、运输、代谢和分子作用机理,需要对植物激素进行定量分析。针对植物激素在大多数植物组织中的含量很低,性质不稳定,与其共存的次生代谢产物背景干扰严重,此外有些植物材料非常珍稀,材料量少的问题,以毛白杨叶片为材料,建立了超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)同时测定植物组织中吲哚乙酸(IAA)、脱落酸(ABA)、赤霉素(GA3)、茉莉酸(JA)和水杨酸(SA)的新方法,为植物激素的研究提供技术支撑。【方法】在用异丙醇、水和盐酸(2∶1∶0.002,v∶v∶v)混合液4℃提取激素时,定量加入IAA、ABA、GA3、JA和SA内标(2H5-IAA、2H6-ABA、2H-JA和2H5-SA各10 ng,2H2-GA320 ng),激素提取液经二氯甲烷萃取后,UPLC-MS/MS定量测定。乙腈-0.1%乙酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速0.8 mL/min,柱温30℃,C18色谱柱分离,多反应监测(MRM)、电喷雾电离源(ESI)负离子模式下进行分析,内标曲线法定量。【结果】5种植物激素在5 min内实现完全分离,检出限为0.01~0.05 pg/g,定量限为0.05~0.15 pg/g。在实验所采用的浓度范围内线性相关系数r在0.999 4~0.999 9之间,精密度和重现性均较好,峰面积的相对标准偏差为1.1%~3.9%。经检测毛白杨叶片中IAA、ABA、GA3、JA、SA的含量分别为(74.38±4.62)ng/g、(193.80±6.04)ng/g、(674.67±18.08)ng/g、(286.62±7.48)ng/g、(746.02±13.93)ng/g。【结论】本法操作简单,灵敏度高,分析时间短,适用于多种植物激素的测定。
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