调查了低密度下棉田 2代棉铃虫卵的空间特性 ,建立了东西和南北两个方向多个变异曲线球面模型 ,其中大部分表现为纯块金效应 ;棉铃虫卵的空间变程为 4 .0～ 6 .4m ,空间不连续性强度为 0 .871～ 0 .999。

1991～1994年,在冀市粮棉混作区,采用田间调查的方法,研究棉铃虫在不同作物上的种群分布.结果表明:一代卵麦田占99.6%,二代卵棉田占84.9%;三代卵棉田占47.6%,玉米田占44.9%,大豆、花生、谷、甘薯田等占7.5%;四代卵棉田占53.6%,玉米田占34.6%,大豆、花生、谷、甘薯田等占11.8%.棉铃虫幼虫在不同作物上分布与卵分布比率有所不同,玉米田幼虫分布比率明显减少.人为防治影响幼虫分布,防治后棉田分布比率下降.

棉铃虫Heliothis armigera(Hübner)是棉花的主要害虫,在我国分布广泛,各地种群因地理环境不同,生理生化指标也有差异,从9个地区采集的棉铃虫,在实验室分别饲养至室内第2代后,分别测定了各地种群6龄幼虫血淋巴的游离氨基酸种类和含量,结果表明:氨基酸种类和含量各地种群间都存在差异,同地种群不同生育期亦表现出游离氨基酸的含量随着龄期的增长由低→高→低。上述不同特点为棉铃虫种下分类提供了依据。

运用毛细柱气相色谱（ＧＣ）和气相色谱质谱联用仪（ＧＣＭＳ）分析了新疆棉铃虫（Ｈｅｌｉｃｖｅｒｐａａｒｍｉｇｅｒａ）雌蛾性信息素腺体的提取物，并从腺体提取物中鉴定出了４个组分：Ｚ１１１６∶ＡＬＤ，Ｚ９１６∶ＡＬＤ，１６∶ＡＬＤ和Ｚ１１１６∶ＯＨ。用触角电位（ＥＡＧ）对４个组分进行测试，结果表明：Ｚ１１１６∶ＡＬＤ，Ｚ９１６∶ＡＬＤ和Ｚ１１１６∶ＯＨ有明显的ＥＡＧ反应；１６∶ＡＬＤ的ＥＡＧ反应值较小。在相同方法条件下，还分析测定了新疆、山西两地棉铃虫腺体提取物中各组分相对比例的差异，结果显示：１６∶ＡＬＤ的相对比例新疆（１０．０８％）高于山西（５．７０％）；而Ｚ９１６∶ＡＬＤ的相...

【目的】克隆棉铃虫中肠羧酸酯酶基因,了解该酶的分子特性,为研究棉铃虫抗药性机理奠定基础。【方法】制备抗血清,对棉铃虫(Helicoverpa armigera(Hübner))中肠cDNA表达文库进行免疫筛选,得到编码棉铃虫羧酸酯酶基因的cDNA克隆,利用生物信息学软件和网站进行序列分析,构建原核表达载体进行表达,并以α-醋酸萘酯溶液为底物进行活性测定。【结果】测序分析表明,羧酸酯酶基因hc3(GenBank登录号:GU119888)全长2 896 bp,编码795个氨基酸。羧酸酯酶HC3的等电点pI为3.94,活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):Ser204,Glu331,His444...

根据湖北省主要产棉区 195 4～ 1997年棉铃虫第 3、4代发生程度的系统资料 ,应用Bayes判别分析原理 ,建立了棉铃虫发生程度的判别分析模型。通过对历史资料的回测及独立样本的预测 ,结果令人满意 ,从而为棉铃虫的长期预测预报提供了一个新的研究方法 ,亦可为其他虫害的预测预报提供借鉴

采用喂饲法 ,建立了转Bt基因棉叶片和蕾对棉铃虫初孵幼虫的抗虫性测定方法及相应的指标。叶片喂饲法 :第 2～ 3展开叶用浸水的脱脂棉保湿放入玻璃或塑料容器中 ,接 5头初孵幼虫 ,用扎孔的塑料薄膜封口 ,在 (2 7± 1)℃条件下饲养 5d后记录死亡率、存活幼虫发育龄期及危害级别。蕾喂饲法 :每蕾接 2头初孵幼虫 ,控制条件同上 ,喂饲 3d后 ,记录幼虫死亡率和存活幼虫发育龄期。以上方法的建立 ,为转Bt基因棉抗虫性的时空规律与害虫抗性选育和遗传规律的研究提供了较为可靠、简便的方法。

利用AFLP分子标记方法,对抗Bt棉棉铃虫(Helicoverpa armigera)抗性品系和敏感品系回交BC1代(F1(YCR♀×YCS♂)♀×YCR♂)群体进行连锁图谱的构建。经23组AFLP引物的选择性扩增,共得到406个多态位点,χ2检验后有217个为有效位点。利用Mapmaker/Exp(Version 3.0b)软件进行连锁分析,其中126个标记分属35个连锁群,连锁群标记数变化范围为2~11个,平均每个连锁群标记数为3.6个,该图覆盖的基因组长度为1 138.4 cM(图距单位),连锁群长度变化范围为4.0~166.1 cM,连锁群的平均长度为32.53 cM。连锁图谱的构建为...

用不同品种棉花的嫩叶饲养棉铃虫幼虫，其相对生长率、相对取食量、近似消化率、食物转化率、食物利用率均不相同，部分感虫品种与高抗品种间的差异显著。运用逐步回归分析，建立了棉叶中五个影响因子（棉酚、单宁、总蛋白、总糖、单糖）与幼虫相对生长率之间关系的数学模型，并明确了各因子所起的作用。通过主成分分析，得知第一主成分主要反映棉酚、单宁、抽腺的作用，第二主成分主要反映总糖、总蛋白的作用。根据第一、第二主成分对样本进行了分类，与田间鉴定结果相近。

棉铃虫核型多角体病毒(HearNPV)ORF44是一个功能未知的基因,研究对HearNPV ORF44基因的序列及原核表达进行了初步研究。结果表明,HearNPV ORF44基因全长1 137 nt,编码378aa,预测编码蛋白分子量为42.7 ku。序列分析显示,ORF44具有双相启动子特征序列,同时兼有杆状病毒早期和晚期基因转录启动子特征序列。ORF44的推导氨基酸序列中含有1个强跨膜螺旋区域,32个磷酸化位点和4个糖基化位点。除HzNPVORF45外,未发现与ORF44氨基酸同源性高于30%的基因。构建了pET-44表达载体,并在大肠杆菌BL21中得到了高效表达,表达的融合蛋白分子量为4...

昆虫围食膜是保护其中肠的一道物理屏障,破坏围食膜就可能使其中肠处于不正常的生理状态而最终导致死亡。本研究提取棉铃虫Helicoverpa armigera(Hbner)围食膜蛋白,成功制备棉铃虫围食膜蛋白多克隆抗体,并对棉铃虫中肠cDNA表达文库进行免疫筛选,共得到385个阳性克隆。对其中26个克隆进行鉴定并测序分析,结果表明19个克隆为肠粘蛋白。过碘酸-希夫试剂(PAS)显色法检测棉铃虫围食膜蛋白组成,发现围食膜蛋白大部分为糖蛋白。通过对棉铃虫中肠围食膜蛋白的分离鉴定,为进一步分析棉铃虫围食膜蛋白的生理功能,寻找生物防治新靶标,开发新型高效生物杀虫剂提供理论依据。

【目的】克隆获得棉铃虫(Helicoverpa armigera)磷脂酰乙醇胺结合蛋白(phosphatidylethanolamine binding protein,PEBP)的c DNA序列,分析Ha PEBP在棉铃虫体内的表达规律,检测2-十三烷酮处理条件下棉铃虫体内Ha PEBP的变化情况,为进一步明确棉铃虫PEBP的功能和选择该基因作为调控棉铃虫种群数量的分子靶标提供依据。【方法】利用RACE技术从棉铃虫6龄幼虫的中肠组织中扩增得到Ha PEBP的c DNA序列,并对其氨基酸序列和蛋白结构进行分析。将Ha PEBP的ORF序列连接至p ET32a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导后检测目的蛋白的表达形式,并通过镍柱的亲和层析纯化融合蛋白。最后通过实时荧光定量PCR检测棉铃虫幼虫不同时期和6龄幼虫不同组织中Ha PEBP的表达规律,以及2-十三烷酮处理棉铃虫6龄幼虫后中肠内Ha PEBP的变化规律。【结果】获得的Ha PEBP c DNA序列长760 bp,其中ORF为588 bp,编码195个氨基酸,蛋白质分子量和等电点分别为21.76 k D和5.93。氨基酸序列分析表明Ha PEBP无信号肽、跨膜结构域和二硫键,是一个由4个α螺旋和9个β折叠片组成的胞质单体蛋白。将BL21(DE3)-p ET32a-Ha PEBP重组菌用1 mmol·L-1的IPTG在37℃条件下诱导4 h,约40 k D的融合蛋白His-Ha PEBP能以可溶的形式存在于重组菌中。按照同样的方法诱导1 L的重组菌,将超声处理后的上清液与Ni-NTA柱结合,进行咪唑缓冲液梯度洗涤,200 mmol·L-1的咪唑洗涤两次后得到约40 k D的单一蛋白,与融合蛋白的大小一致。将此流出液超滤浓缩,获得183.3 ng·μL-1的融合蛋白,能被抗His-Tag的单克隆抗体识别发生免疫反应。Ha PEBP在棉铃虫幼虫的1—6龄期和预蛹期均表达,且6龄幼虫的表达量最高。该基因在6龄幼虫的脂肪体、中肠、头部和体壁中也均有表达,且脂肪体内的表达量最高。不同浓度的2-十三烷酮处理后,棉铃虫6龄幼虫中肠内Ha PEBP的表达量均有所降低;低浓度(2.5和5 mg·g-1)在6 h就能降低Ha PEBP的表达量,其m RNA含量随着时间的延长逐渐增加;而高浓度(10和15 mg·g-1)在12 h才会降低Ha PEBP的表达量,其m RNA含量随着时间的延长先下降后上升。【结论】克隆分析了Ha PEBP,利用大肠杆菌系统表达出可溶的融合蛋白His-Ha PEBP,并通过镍柱-咪唑纯化法得到了高纯度的融合蛋白,时空表达分析显示Ha PEBP在棉铃虫6龄幼虫和脂肪体中表达量最高,2-十三烷酮处理6龄幼虫后中肠内Ha PEBP的表达量显著降低。

比较了枫杨Pterocaryastenoptera枝把与加拿大杨Populuscanadensis枝把在田间对棉铃虫Helicover paarmigera (H櫣ｂｎｅｒ)的引诱作用。结果表明 ,2种树枝把在田间均能有效地诱集棉铃虫 ;加拿大杨枝把的诱蛾效果要强于枫杨枝把 ;枫杨枝把与加拿大杨枝把诱集的雄蛾量与上把的雌蛾量呈显著的正相关 ,与田间雄蛾量相关性不显著 ;将枫杨与加拿大杨制成混合枝把后与加拿大杨枝把相比诱蛾量没有变化 ,但与枫杨枝把相比则诱蛾量显著增加 ,把上的雄蛾量与上把的雌蛾量呈显著的正相关 ,而与田间雄蛾量无显著相关 ;各种树枝把上的棉铃虫雌雄比均大于 1。在预测田间棉铃虫...

室内测定了虱螨脲对棉铃虫实验种群的生物活性及低剂量下对其生命参数的影响。拒食活性的测定结果显示,虱螨脲对棉铃虫三龄幼虫具有明显的拒食活性,在10 mg/kg浓度时,96 h后拒食率达到95.04%;虱螨脲也表现出较强的杀卵作用,在50 mg/L浓度下,棉铃虫1日龄卵死亡率达到87.59%。分别用叶片浸毒法和浸虫体法测定了对棉铃虫幼虫的胃毒活性和触杀活性,其对棉铃虫二龄幼虫的LC50分别为0.743 4,12.369 6 mg/L,胃毒活性约是触杀活性的17倍,表明虱螨脲对棉铃虫的作用方式主要为胃毒作用,兼有一定触杀作用。虱螨脲对棉铃虫生长发育和繁殖力影响的测定结果表明,虱螨脲可抑制幼虫生长,延...

以羧酸酯酶抑制剂磷酸三苯酯（ＴＰＰ）和多功能氧化酶抑制剂增效醚（ＰＢＯ）以及￣（１４）Ｃ－氰戊菊酯为材料，选择对氰戊菊酯具有不同抗性程度的棉铃虫自然种群为试虫，研究其抗性机理。结果表明：棉铃虫对氰戊菊酯的抗性与其体内酯酶活性无关，而与多功能氧化酶活性直接相关；同时，表皮对氰戊菊酯的渗透性降低也是棉铃虫对氰戊菊酯产生抗性的强化因子。