【目的】棉花枯萎病(Fusarium wilt)是棉花种植中较为严重的土传病害之一,主要采用化学方法进行防治,但对环境和人畜安全造成一定影响。生物防治因其专一性强、安全性高的特点,成为防治棉花枯萎病的重要途径。本研究旨在获得一株高效拮抗细菌,并明确其防治机理,为棉花枯萎病生物防治提供技术支持。【方法】前期获得一株能够破坏β-1,4糖苷键的棉花内生蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)YUPP-10,通过平板对峙培养、共培养法和悬滴法分别测试其对棉花枯萎病菌(尖镰孢,Fusarium oxysporum)菌丝生长、产孢和孢子萌发的影响;利用YUPP-10菌液浸种处理,研究其对棉花生物量的影响;以尖镰孢菌土为基质种植棉花,生长1周后,用LB液体培养基培养的YUPP-10制成不同浓度(分别为1×10~8、1×10~7和1×10~6 cfu/mL)的生防菌剂灌根处理棉苗,于温室中进行棉花枯萎病的防治效果研究;通过Fosmid文库筛选到了YUPP-10关键抑菌物质为环糊精糖基转移酶(CGTase,EC 2.4.1.19),研究其对尖镰孢菌丝生长、产孢和孢子萌发的影响;利用拟南芥花序侵染法将其转化拟南芥,获得能够稳定表达CGTase的转基因株系,研究转基因拟南芥对枯萎病的抗性,以及在病原胁迫下部分防御基因的转录。【结果】YUPP-10菌株发酵液对尖镰孢菌丝生长、产孢和孢子萌发具有显著的抑制作用,随着发酵液浓度的升高,对尖镰孢产孢量和孢子萌发的抑制率越高,最高抑制率分别为98.41%和51.65%。低浓度的YUPP-10菌液能促进棉花种子发芽、出苗和地上部分的生长。YUPP-10发酵液灌根处理后,棉苗的病情指数和病株率显著降低,其中,1×10~7 cfu/mL的YUPP-10发酵液对棉花枯萎病的防治效果最高,达到45.11%。YUPP-10菌株的关键抑菌物质CGTase能够水解羧甲基纤维素和葡甘聚糖,表明其具有破坏β-1,4糖苷键的能力,进而检测了其对尖镰孢的抑制效果,结果表明CGTase对尖镰孢的菌丝生长、产孢和孢子萌发具有显著的抑制作用,对产孢和孢子萌发的最高抑制率分别达到62.63%和30.83%。转CGTase的拟南芥提高了对枯萎病的抗性,过表达CGTase的拟南芥在病原胁迫下部分防御基因的转录水平升高。【结论】蜡状芽孢杆菌YUPP-10菌株能抑制尖镰孢的生长、促进棉花部分生物量指标的增长并控制枯萎病的危害,CGTase能够抑制尖镰孢的生长,转CGTase拟南芥对枯萎病的抗性增强。

【目的】棉花黄萎病(Verticillium wilt)是世界性难以防治的病害,筛选有效的生防微生物资源成为解决棉花黄萎病的重要途径之一,本研究旨在分离一株高效拮抗细菌,并明确其防治机理,为生物防治棉花黄萎病提供技术支持。【方法】用葡甘聚糖作为碳源筛选一株能够降解β-1,4糖苷键的棉花内生细菌YUPP-10,通过平板对峙培养、平板对扣培养和悬滴法等测定YUPP-10对大丽轮枝菌(Verticillium dahliae)菌丝生长和孢子萌发的抑制效果;用YUPP-10无菌滤液培养大丽轮枝菌微菌核,检测其对微

【目的】探索杀菌剂和化肥对生防菌防病、促生作用的影响，为综合利用生防菌防治植物病害、促进植物生长提供依据。【方法】利用平板对峙法，测定生防菌Ｓｃ１１、１５３和Ｆｏ４７对尖镰孢萎蔫专化型的皿内拮抗作用及其发酵液的抑菌作用，通过盆栽试验测定生防菌与杀菌剂、化肥结合对棉花枯萎病的防治效果及对棉株的促生作用。【结果】放线菌Ｓｃ１１和１５３的发酵液对尖镰孢萎蔫专化型皿内抑制作用显著，抑制率分别为６７．５％和５５．０％；盆栽试验结果表明，生防菌与杀菌剂、化肥结合对棉花枯萎病的防效高于单因素处理，菌株Ｓｃ１１和菌株Ｆｏ４７分别与多菌灵溶液结合对棉花枯萎病的防治效果最佳，抑制率为６４．９９％和５７．１０％。【．．．

通过四十多年的防治研究，证明了以种植抗病品种为主的综合防治是最经济有效的防治方法，培育出具高抗枯萎病抗源品种５２—１２８、５７—６８１和抗黄萎病多菌系抗源种质川７３７、川２８０２，建立了一套早期鉴定抗性的育种程序，选育出一批抗病、丰产、优质的棉花品种在棉花生产上推广应用，控制了棉枯萎病的蔓延，结束了四川棉枯萎病大面积为害的历史，防病增产效果显著。近年来，又选育出一批抗黄萎病、抗枯萎病、兼抗虫品种并推广应用，控制棉黄萎病为害防效显著

从棉花植株根部筛选的108株芽孢杆菌中,通过对棉花黄枯萎主要病原菌大丽轮枝菌拮抗效果的复筛,分离到一株LC-105菌株,其抑菌圈达到20 mm以上;本研究从该菌株的发酵代谢产物中,分离出活性拮抗物质,进一步通过DEAE-Sephadex A-50离子交换层析和Sephacryl-S100凝胶层析对其代谢产物进行了分离纯化,证明该拮抗物质为一种蛋白质,最后通过聚丙烯酰胺凝胶电泳证实了所分离物质的纯度达到电泳纯。

利用氯酸钾毒性,诱变棉花枯萎病菌产生硝酸盐利用缺陷型突变体(nit)。在485个 nit 突变体中,生理表现型以 nit A 为最多,nit B 和 nit C 次之,nit D 极少。不同生理表现型之间的互补关系复杂。对107个菌株的突变体间进行营养体亲和性测定的结果表明,95个菌株属于同一个营养体亲和群 VCG_1,6个菌株属于VCG_2,另有2个菌株为单菌株亲和群。

在发病严重而均匀的田间病圃中，对棉花８个亲本（４抗十４感）和２８个Ｆ＿１代进行了抗枯萎病鉴定。结果表明：杂种抗性与亲本抗性呈极显著正相关，４个抗病品种的抗性为中棉１２＞苏棉３号＞鄂６２－１＞鄂抗棉１号，但苏棉３号的抗性传递能力高于中棉１２。抗病×感病组合Ｆ１抗性为部分显性，发病率、病指和病级偏向抗病亲本，中亲优势率分别为－２８．５％，－３３．３％和－４７．０％。抗×感、高抗×感组合一般为中抗，中抗×感组合一般为感病，抗性低的抗病品种×病指高的感病品种的组合Ｆ１也表现感病。抗×抗、抗×高抗、抗×中抗、中抗×高抗组合表现抗或高抗，甚至超双亲。而感×感组合仍表现为感病。发病率、病指和病级三者间呈极显...

　利用鉴别寄主法对40个新疆棉花枯萎病菌菌系进行了生理小种测定,同时采用nit硝酸还原酶缺陷型突变体技术对棉花枯萎病菌菌系进行了营养亲和性测定。结果表明,28个供试菌系高度侵染海岛棉、陆地棉及K102,属典型的7号生理小种,其余12个菌系在鉴别寄主上的反应与7号生理小种略有差异;供试菌系属于一个营养亲合群,且与7号生理小种的标准菌系相亲和,与3号、8号小种的标准菌系不相亲和;新疆棉花枯萎病菌依旧以7号生理小种为主。与以往的研究结果相比,新疆棉花枯萎病菌的群体组成基本没有发生变化。

以转SNC1基因的棉花中35和军棉1号和对应的非转基因棉花叶片为材料,接种棉花枯萎病病菌,以分析与主要抗病性有关的5类防御酶系。接菌后,和对照相比,转SNC1基因棉花和非转基因棉花防御酶的活性变化差异明显。其中,转基因中35的PAL、SOD、POD和PPO酶活性均高于非转基因中35,并且在接菌第2,4天达到峰值,然后随时间增加呈下降趋势,而CAT酶活性低于非转基因中35,随时间增加变化趋势不明显;转基因军棉1号的PAL、SOD、PPO和酶CAT活性变化趋势同转基因中35,而POD酶活性变化趋势却相反,低于非转基因军棉1号。通过本试验表明,以抗病品种和感病品种为受体得到的转基因棉在受到病原菌侵染...

用改良理查德液体产毒培养基培养棉花枯萎病菌,取其培养滤液作为毒素液。测试了毒素液对抗病、感病品种种子发芽、愈伤组织的诱导和生长的毒害作用和对幼苗的致萎作用以及对叶片电导率的影响。为毒素液应用于抗病资源的快速筛选与鉴定、体细胞抗性突变体的筛选等研究提供了可靠的参考资料。

从棉花根围和根内分离到 17个供试菌株在平板对峙培养中 ,都能极显著抑制VerticilliumdahliaeKleb(简称Vd)的生长 ,其中 15株的抑菌率大于 6 5 % ,最高达 89.6 %。这些菌株的培养滤液也对Vd的生长有抑制作用。对供试细菌的防病及棉花出苗安全性所作的盆栽试验结果表明 ,13个菌株对棉花出苗表现安全 ;10个菌株防治棉花黄萎病效果极显著 ,其中 4株 (ICB 18、NCD 2、CS 2 5和CS 2 7)的防治效果达 72 .3%～ 81.4 % ;3株 (C 94、C 2 8和NCD 2 5 )的防治效果达 5 5 .7%～ 6 1.9% ,而且这 7株对棉...

【目的】研究内生菌（Bacillus velezensis BHZ-29、Bacillus atrophaeus SHZ-24）和根际细菌（Bacillus subtilis SHT-15、Bacillus vanillea SMT-24）在灭菌土与非灭菌土中对棉花的促生作用及诱导抗病效果。【方法】以棉花植株为试材，通过测量内生菌和根际细菌处理后第50天棉花的株高、根长、根毛数、叶片数，分析内生菌及根际细菌对棉花的促生作用；同时测定第50天棉花叶片过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）、超氧化物歧化酶（SOD）、苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性及丙二醛（MDA）含量和木质素含量，探究内生菌和根际细菌处理对棉花诱导抗性作用。【结果】接种内生菌及根际细菌后，均能提高灭菌土与非灭菌土棉花株高、根长、增加根毛数和叶片数。在灭菌土中，SHZ-24处理组株高最高为24.78 cm，是对照组的1.21倍，SHT-15处理组根长最长，是对照组的1.14倍，根毛数和叶片数最多，分别是对照组的1.71和1.18倍；在非灭菌土中，SMT-24处理组株高最高为24.33 cm，是对照组的1.11倍，叶片数最多，是对照组的1.18倍，SHT-15处理组根长最长，根毛数最多，分别是对照组的1.07和1.78倍；此外，在灭菌土中，棉花叶片中的CAT、POD、PPO、SOD、PAL活性和木质素含量均有不同程度提高，丙二醛含量下降。【结论】在灭菌土与非灭菌土中，内生菌及根际细菌对棉株具有明显促生作用，能诱导棉花体内防御酶活性的表达，降低丙二醛含量，增强棉株抗病能力。

1、参试品种品种名称来源供种单位 3308 3286×PD2614 湖北省农科院经作所 8769 (3247×鄂沙28)F_1×中12 沙洋农场农科所 505-3A 鄂沙28×86-1 沙洋农场三分场华108 [(7010×HGBR-8)(7010BF_1×鄂荆92)]中12 华中农业大学农学系 188 3247×湘抗岱159 荆州地区农科所 96273 7701×荆1418 荆州地区农科所中棉12(CK) 乌4×邢台6871 中国农科院棉花所 2、参试单位湖北省农科院经作所(武昌)、荆州地区农科所(荆州)、沙洋农场农科所(沙洋)、枝江县棉花原种场(百里州)、襄阳县棉花原种场(襄阳)、...

1、参试品种名称来源供种单位 4474 4947×PD0113 湖北省农科院经作所 D-82 3292×P8619 荆州地区农科所 4238 达棉5号×冀合3016 湖北省农科院经作所 56357 3247×(湘抗189+新培系) 荆州地区农科所东57 中331×苏3446 武汉市东西湖农科所 62-1 6062选系沙洋农场农科所中棉所12(CK_1) 乌4×邢台6871 中国农科院棉花所 5601(CK_2) 3247×苏9118 湖北省农科院经作所 2、参试单位湖北省农科院经作所(武昌),新洲县植保站(新洲),武汉市东西湖农科所(东西湖),沙洋农场农科所(沙洋),荆州地区农科所(荆...

1、参试品种名称来源供种单位 89-3308 3286×PD2614 湖北省农科院经作所东1 7701选系湖北省农科院经作所 8769 (3247×鄂沙28)F_1中12 沙洋农场农科所 505-3A 鄂沙28×26-1 沙洋农场三分场华108 [(7010×HGBR-8)7010B_1F_1×鄂荆92]中12 华中农业大学农学系 4026 中12×湘抗岱82-124 荆州地区农科所 188 3247×湘抗岱150 荆州地区农科所 96273 7701×荆1418 荆州地区农科所中12白系(CK) 乌_4×邢台6871 中国农科院棉花所 2、参试单位湖北省农科院经作所(武昌),荆州地区...