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年份: 2018(1)

作者: 义(1); 伟(1); 大(1); 平(1); 张伟(1); 文(1); 春(1); 李(1); 海(1); 涛(1); 王(1); 褚(1); 赵(1); 辉(1)

学科: 鹿(1)

机构: 业(1); 中国(1); 中国农业(1); 中心(1); 农(1); 农业(1); 农业科学(1); 分子(1); 分子生物(1); 分子生物学(1); 动物(1); 吉(1); 吉林(1); 吉林省(1); 国家(1); 国家重点(1); 学(1); 学院(1); 实验(1); 实验室(1); 室(1); 家(1); 工程(1); 所(1); 林(1); 济(1); 特产(1); 特种(1); 生物(1); 生物学(1)

基金: 1610342018028(1); 20170101003(1); 20170101003jc(1); 20170101032(1); 20170101032jc(1); jc(1); 专项(1); 业务(1); 业务费(1); 中央(1); 中央级(1); 公益(1); 公益性(1); 吉(1); 吉林(1); 吉林省(1); 基本(1); 基金(1); 基金项目(1); 性(1); 本科(1); 林(1); 益(1); 省(1); 科学(1); 科学基金(1); 科研(1); 科研院所(1); 级(1); 自然(1)

期刊: 业大(1); 中国(1); 中国农业(1); 农(1); 农业(1); 农业大学(1); 大学(1); 学学(1); 学报(1)

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梅花鹿Thymosin beta 10基因的原核表达、活性鉴定和多克隆抗体制备

[期刊] 中国农业大学学报 [作者] 褚文辉张伟赵海平王大涛李春义

为研究梅花鹿Thymosin beta 10基因(Tβ10)在鹿茸快速生长过程中的作用,利用Gateway技术构建梅花鹿Tβ10基因的原核表达载体—pDEST17-Tβ10并诱导表达,对融合蛋白进行功能检测及多克隆抗体制备。结果表明:1)获得了190bp Tβ10基因开放阅读框序列,并获得重组表达载体pDEST17-Tβ10。2)pDEST17-Tβ10在宿主BL21-SI中诱导表达条件为0.3mol/L NaCL诱导2h,获得产物的最终浓度为0.50mg/mL。3)制备的Tβ10蛋白多克隆抗体血清效价在105之上,该抗体可以特异性结合天然和原核表达的Tβ10蛋白。4)离体检测发现,Tβ10融合蛋白一方面可以促进人脐静脉内皮细胞增殖,另一方面可以抑制鹿茸前成软骨区细胞的增殖。综上所述,本研究获得了具有生物活性的Tβ10融合蛋白,并制备了高度特异性的梅花鹿Tβ10蛋白多克隆抗体,为深入研究Tβ10基因的生物学功能奠定了基础。

关键词：梅花鹿 Thymosin beta 10 原核表达鹿茸多克隆抗体

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